二微生物的选择培养和计数知识点题库

在农田土壤的表层自生固氮菌较多。用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（    ）
①加抗生素   ②不加抗生素    ③加氮素    ④不加氮素    ⑤加葡萄糖
⑥不加葡萄糖    ⑦37℃恒温箱中培养     ⑧28～30℃恒温箱中培养

A . ①③⑤⑦ B . ②④⑥⑧ C . ②④⑤⑧ D . ②④⑥⑦

酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：

（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于培养基。该培养基的氮源来自。
（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是和。配制浓度梯度为10^-1的系列稀释液时，需用移液管将1mL菌液移入盛有mL蒸馏水的试管中。
（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量（多于／等于／小于）后者，其原因是。
（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。右表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用g／dL。若利用固定化酶技术，它的优点是。
海藻酸钠质量浓度（g/dL）
凝胶强度
凝胶气泡量
成球难度
凝珠形状
1.0
中
没有
较易
扁圆形
2.0
中
少量
易
圆球形
3.0
强
较多
稍难
有托尾
4.0
强
大量
难
难成球形

在人工培养根瘤菌时，当向无菌培养箱中充入N₂时，其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时（　　）

A . 多和大 B . 多和小 C . 少和大 D . 少和小

关微生物营养物质的叙述中，正确的是（）

A . 是碳源的物质不可能同时是氮源 B . 凡碳源都提供能量 C . 除水以外的无机物只提供无机盐 D . 无机氮源也能提供能量

关于微生物的叙述，完全正确的是（）

①古细菌的细胞壁与大肠杆菌的细胞壁成分不同 ②青霉素不能杀灭肝炎病毒

③酵母菌主要通过芽孢进行繁殖 ④古细菌对利福平敏感

A . ①② B . ③④ C . ①②④ D . ②③④

某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员利用以下两种方法获得了能高效降解化合物A的细菌．

（1） Ⅰ方法一：研究人员利用有机化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌．实验的主要步骤如图所示，请分析回答：
①培养基中加入化合物A的目的是．
②“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的．实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是．
③在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是．
④转为固体培养时，常采用的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
⑤若研究“目的菌”的群体生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用显微直接计数法进行计数．若以一个大方格（体积为0.4mm³）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为B，菌液稀释倍数为C，那么原菌液的菌群密度为个/mL．
（2） Ⅱ方法二：研究人员通过化学方法合成了高效降解化合物A的某种酶的基因，利用PCR扩增后，采用一定方法导入细菌细胞中，经筛选、培养获得高效降解化合物A的细菌．请分析回答：
①在利用PCR扩增该酶的基因时，在扩增缓冲液中添加4种脱氧核苷三磷酸作为原料而不是脱氧核苷酸，从而使反应体系不需要再加入ATP提供能量，请推测PCR反应合成DNA子链时能量来源于．
②假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性，且引物不被切除，则经过n次循环，具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为．

下列关于微生物的培养，叙述错误的是（）

A . 培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 B . 培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性 C . 培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性 D . 培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件

通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( )

①大肠杆菌　②霉菌　③放线菌　④固氮细菌

A . ④②③ B . ①②③ C . ①③④ D . ③④①

大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。

回答下列问题：

（1）利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmOl/L的到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是蛋白质。
（2）通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。
①伊红-美蓝培养基属于(填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨的作用有(答出两点即可）。

②培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是。

③用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应 (填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是。

三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素，但该菌株的高产性状容易退化，需要定期筛选出高产菌株，研究表明菌体细胞内含有可将无色的TTC还原为红色复合物的物质，且菌体细胞内该物质的含量越高，还原能力越强，胡萝卜素合成能力也越强。结合下列筛选菌株及提取胡萝卜素的流程图回答问题：

三孢布拉霉菌→梯度稀释→涂布到含TTC的培养基上→挑取单菌落→扩大培养→收集菌丝并处理→萃取→鉴定

（1）上述流程图中提取到胡萝卜素后进行鉴定一般要用法。胡萝卜素能够治疗夜盲症、干皮症等是因为夜盲症、干皮症等疾病是由于缺少维生素A而引起的，而1分子的β-胡萝卜素可被氧化分解成2分子。根据胡萝卜素的理化性质分析，为了让胡萝卜素更容易被人体吸收，炒胡萝卜时要多加些。
（2）流程图中将菌液涂布到含TTC的培养基上，目的是筛选出合成胡萝卜素较强的菌体(高产菌株），含TTC的培养基属于(填“选择”或“鉴别”)培养基。如何判断培养基是否被污染，请简要回答：。挑取单菌落时，若菌落周围，则菌株合成胡萝卜素的能力较强。
（3）为了验证萃取物是否是胡萝卜素，该同学将叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素、萃取物和色素混合液(含叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素和胡萝卜素）依次点样在滤纸的 1、2、3、4、5 位置（如图甲所示），并进行分离，滤纸条上各色素带的位置为(填字母)时，即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素。

下列关于统计菌落数目方法的叙述，错误的是（）

A . 采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数 B . 当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C . 为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D . 在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果

为了分离以尿素为氮源的细菌，下列叙述正确的是（）

A . 需要配制LB固体培养基用于筛选该细菌 B . 应将培养皿倒置于4℃恒温培养箱内培养 C . 筛选该细菌的方法是划线分离而非涂布分离 D . 将目的菌接种在斜面培养基上培养24h后保存于冰箱

嗜盐菌常分布在晒盐场、盐湖、腌制品中，某生物兴趣小组对嗜盐菌进行了如下探究和分析，请回答以下问题：

（1）获得嗜盐菌的第一步是从合适的环境中采集菌样，然后按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的培养基较普通培养基中含量高
（2）如图是采用不同接种方法接种嗜盐菌后纯化培养的效果图，其中图方法不适合用于微生物的计数，出现图A结果的原因是在操作时。在进行计数时，最终选取菌落数在范围内的平板进行计数，不能选用菌落数过多的平板的原因是。
（3）在实验过程中，无菌操作是非常重要的，对实验过程中使用的玻璃器皿通常使用法进行灭菌。
（4）该兴趣小组在研究过程中分离纯化得到了多株嗜盐菌，经筛选发现其中某种嗜盐菌能产生胡萝卜素。提取该菌产生的胡萝卜素应选用（填“蒸馏”或“萃取”）法，原因是答两点即可）

漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，下列相关叙述错误的是(　　)

A . 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B . 筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C . 在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化 D . 在适宜温度下，接种后的斜面培养基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株

如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5，下列操作方法正确的是（）

A . 操作前要将接种环放在火焰旁灭菌 B . 划线操作须在火焰上进行 C . 在5区域中才可以得到所需菌 D . 在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

下列关于实验材料及用法的叙述，正确的是（）

A . 提取菠菜叶光合色素时，需加入少许二氧化硅、碳酸钙和50%乙醇 B . 观察花生子叶细胞的脂肪颗粒时，需用50%乙醇洗去多余的苏丹Ⅲ染液 C . 涂布法分离细菌时，要将保存在50%乙醇中的玻璃刮刀放在酒精灯火焰上灼烧 D . 植物组培中，外植体可先后放入90%乙醇、5%次氯酸钠和无菌水中消毒

下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，错误的是（　　）

A . 选择菌落数在30〜300之间的实验组平板进行计数 B . 将实验组和对照组平板倒置，放在25℃恒温培养箱中培养 C . 利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度 D . 判断选择培养基是否起选择作用，需设置接种的普通培养基作对照

土壤中的溶磷菌能够把难溶态的磷转化为可被植物直接利用的可溶性磷，从土壤中筛选出溶磷能力强的溶磷菌制成菌肥，有利于植物对磷元素的吸收。下列有关操作和分析错误的是（）

A . 土壤取样、称取土壤、稀释样品都在酒精灯的火焰旁进行 B . 需要用含难溶态磷的固体培养基进行目的菌株的分离 C . 推测难溶态磷的分解可能与溶磷菌分泌的代谢产物有关 D . 实验组与对照组可溶性磷含量差值最大的菌株适合制成菌肥

日前微信传言手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析正确的是（）

A . 通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物 B . 以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等 C . 两组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同，原因可能是取样部位不同 D . 该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养

下列关于微生物的培养与分离的叙述，正确的是（）

A . 配制培养基时，需要在酒精灯火焰旁进行 B . 选择高压蒸汽灭菌条件时，不需考虑灭菌的材料和数量 C . 倒好培养基的培养皿要立即将平板倒过来放置 D . 单菌落的分离是微生物纯化的通用方法

海藻酸钠质量浓度（g/dL）	凝胶强度	凝胶气泡量	成球难度	凝珠形状
1.0	中	没有	较易	扁圆形
2.0	中	少量	易	圆球形
3.0	强	较多	稍难	有托尾
4.0	强	大量	难	难成球形

二 微生物的选择培养和计数 知识点题库

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