二微生物的选择培养和计数知识点题库

在细菌的连续培养过程中，要以一定速度不断添加新的培养基，同时以同样速度放出老的培养基。右图表示培养基的稀释率（培养基的更新速率）与培养容器中营养物质浓度、细菌代时（细菌数目增加一倍所需的时间）、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是

A . 在稀释率很低的情况下，稀释率的增加会导致细菌密度增加 B . 稀释率从a到b的变化过程中，细菌生长速度不断提高 C . 稀释率超过b点后，营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大，细菌密度降低 D . 为持续高效地获得发酵产品，应将稀释率控制在b点附近

分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )

①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂

⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐

A . ①③⑤⑦ B . ①③⑤⑧ C . ②④⑥⑧ D . ①④⑥⑦

科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株，步骤是：采集菌种→选择培养→纯种分离→性能测定．下列相关的叙述中，错误的是（）

A . 筛选目的菌的培养液中必须以多环芳烃菲作为唯一碳源 B . 选择培养需多次进行的 C . 利用平板划线法纯化目的菌，接种环只灼烧2次 D . 接种后需将平板倒置且需一个未接种的培养基作对照

研究发现乳酸菌素和香茅油均有抑菌作用，请回答下列问题：

（1）实验室中为获得纯净的乳酸菌菌种，常用的接种方法有稀释涂布平板法和．某同学在采用稀释涂布平板法分离乳酸菌时，其实验操作规范，结果发现培养基上菌落连成一片，请提出合理的改进措施．
（2）现要通过培养乳酸菌获得乳酸菌素，则发酵前要对发酵装置和培养基进行处理，在发酵过程中要保证的环境条件．
（3）香茅油难溶于水，化学性质稳定，现要从驱蚊草中提取香茅油，可采用法，利用该法提取香茅油的过程中需要加入NaCl和无水Na₂SO₄ ，其作用分别是和．
（4）在培养出大肠杆菌的平板上加入香茅油或乳酸菌素，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，可通过来比较香茅油和乳酸菌素的抑菌效果．

下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是（）

A . 第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B . 每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 C . 在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D . 划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者

废纸主要成分是木质纤维．左下图是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程．回答下列问题．

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在的环境中．②中获得的酶是酶．
（2）若从土壤中分离出上述微生物，应以为唯一碳源的培养基进行培养，并加入形成红色复合物进行筛选，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的．
（3）接种后一个平板经培养后的菌落分布如图所示，推测接种时可能的操作失误是．向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是．
（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是．玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供．从玉米胚芽中提取的胚芽油不易挥发，宜选用法从玉米胚芽中提取．

回答有关微生物的培养与应用问题：

（1）微生物的培养需要使用培养基，不同培养基的配方不同，但一般都古有碳源、氮源；在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时，需加入作为唯一的碳源，该培养基属于培养基；若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生来筛选纤维素分解菌．
（2）若要统计土壤样品中纤维素分解菌的数目，宜采用法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的就能大约推测出样品中的活菌数．
（3）一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，则每毫升样品中的活菌数是（所用稀释液的体积为0.2mL）．

下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是（）

A . 应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基pH B . 实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触 C . 待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板 D . 使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃

急性肠胃炎是由细菌通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的微生物问题：

（1）接种微生物的方法有很多,图1中所示为。图2所示的四种菌落分布图中，不是由该方法得到的是。
（2）不论何种培养基，在各成分溶化后灭菌前，要进行的是。
（3）用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是什么？
。
（4）从结构上看，与大肠杆菌属于同一类生物的是（多选）
A.金黄色葡萄球菌 B.酵母菌 C.乳酸菌 D.霍乱弧菌 E.霉菌
（5）为了检测大肠杆菌对抗生素的敏感性，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A，B，C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，结果见图：
①根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好选择的抗生素是。若透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是该抗生素的。
②治疗肺结核的常用抗生素是利福平，写出其抑菌机理：。

某生物兴趣小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡葡皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。请回答下列问题：

（1）在培养基配制过程中，加入了青霉素等抗生素，其目的是。纯化酵母菌时，常用的接种方法是。
（2）该实验小组成功分离出某品种的酵母菌后，用移液器设定1mL的接种量分别接种于三个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，放罝在摇床上培养，分别设定摇床转速为210r/min、230r/min、250r/min，检测结果如图所示。从图中可看出，原因是。
（3）该小组同学在计数时观察到酵母菌出现抱团现象。抱团现象可能是酵母菌混合不均造成的，因此取样前将锥形瓶中的培养液，取样时用吸管。如果该现象是培养液中酵母菌数目过多而造成的，需对培养液进行一系列的梯度稀释，稀释10倍的操作方法是吸取1mL菌液注入盛有的试管中，并。

关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是(　　)

A . 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解 B . 等培养基冷却50℃左右时进行倒平板 C . 待平板冷却凝固5～10 分钟后将平板倒过来放置 D . 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（）

A . 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B . 筛选培养基中不需要加入漆酶的底物，即可通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C . 在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化 D . 斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株

在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为（）

①溶化

②调pH

③加棉塞

④包扎

⑤培养基的分装

⑥计算、称量

A . ①②⑥⑤③④ B . ⑥①②⑤③④ C . ⑥①②⑤④③ D . ①②⑤④⑥③

多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品，接种到以为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于。
（2）对初步提取到的菌株要进行，一般操作方法有两种，右图表示法。
（3）将1 mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为。

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲所示，据此配置伊红美蓝培养基配方如图乙所示。回答下列相关问题：

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（1）图甲中滤膜的孔径应(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌：。
（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入(一种营养成分)，以及；伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于培养基。
（3）该小组通过统计计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值要比实际(“偏高”或“偏低”)，理由是。

为探究适宜环境下，固定容积的培养液中酵母菌种群数量变化规律，研究者进行了相关实验。下列叙述错误的是（）

A . 利用血细胞计数板计数时需要振荡均匀后取样 B . 生长旺盛期的培养液上层比下层酵母菌数量多 C . 涂布平板法计数可用接种等量无菌水组做对照 D . 涂布平板法统计的酵母菌数目会比实际值略大

植物组织细胞内或细胞间是否存在内生菌?为探究该问题，某兴趣小组分别以豌豆的根、茎、叶等进行相关实验。回答下列问题：

（1）小组成员分别称取了根、茎、叶并用75%的酒精浸泡适宜时间，再用无菌水冲洗，根、茎、叶属于豌豆的结构层次，用 75%的酒精浸泡的目的是，为验证证该操作是否已达到目的，可进行的操作是（写出简单思路即可）。
（2）取上述根、茎、叶进行研磨获得滤液，将滤液接种在灭菌后的培养基上并放入恒温箱中培养48h。实验室中对培养皿常采用的灭菌方法为。灭菌后的培养基倒入培养皿后，为防止皿盖上的冷凝水滴落入培养基造成污染，可进行的操作是
（3）实验结果：接种根、茎、叶滤液的培养基上均出现菌落，可根据菌落的等特征判断其是否为同一种菌。接种根部滤液的培养基上所形成的菌落最可能属与菌（写出一种即可），挑取的单菌落可在温度条件为下进行临时保藏。

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充：

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过灭菌处理的（填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。
（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行处理。之后，将菌液涂布接种于以为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计作为空白对照。
（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是，则说明此种菌能够。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用法接种于新的培养基平板中，可对菌株进行进一步的纯化。

苯酚(C₆H₅OH)是一种工业生产排放、装修材料释放的有毒污染物质，其对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用，对人体危害极大。某污水处理厂检测出要处理的废水中含有较高浓度的苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员欲从淤泥中筛选出能高效降解苯酚的菌株，筛选的主要步骤如下图所示，回答下列问题：

（1）在实验时，对图中所用的培养基通常采用法进行灭菌，培养基甲和乙营养成分相同，都要加入苯酚作为唯一的源，只是在甲中还加入了使其与乙物理性质不同；甲、乙两种培养基按用途分均属于培养基。
（2）实验中初步估测瓶C中细菌细胞数为1×10⁸个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过100个，则至少应将瓶C中的菌液稀释倍；涂布平板后，通常要将甲倒置培养，目的是防止，还能防止培养基中的水分过快挥发。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的苯酚超过某一浓度时，细菌对苯酚的降解量反而下降，其原因可能是。

通过微生物发酵获得各种类型的脂肪酸是开发新油源的一种途径。下图表示从土壤中分离筛选高产油细菌的流程，其中平板B上的5个菌落是初筛得到的细菌，C为平板B上菌落的原位影印，利用苏丹黑B可使脂类物质呈黑色的特性，对C进行染色，得到了结果D．回答下列问题：

（1）从土壤取样后，一般用（填溶剂）将土壤菌进行系列梯度稀释。
（2）培养基A中含有的营养物质有水、牛肉膏和蛋白胨等，其中蛋白胨提供的主要营养是，培养基的pH需要调至。对接种使用的涂布器可采用法灭菌。
（3）根据D的染色结果可判断，平板B中的（填图中的数字）是高产油细菌的菌落。
（4）将平板B中高产油细菌的单菌落进一步纯化培养得到E。将E中的菌落接种到试管F的固体斜面培养基上进行培养后，放入4℃的冰箱中进行临时保藏，这种方法不适合长期保藏菌种，原因是。如果需要长期保藏菌种，可采用的方法。

二 微生物的选择培养和计数 知识点题库

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