二 微生物的选择培养和计数 知识点题库

下列有关微生物的实验室培养相关叙述,正确的是(  )

A . 对实验操作空间、操作者衣着和手,进行灭菌 B . 培养基配制好应先灭菌,然后立即倒平板 C . 接种操作应在酒精灯火焰附近进行 D . 培养细菌时,需将pH调至酸性

由于石油价格的不断上涨,替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等的开发备受世界关注,有人想利用玉米秸秆生产燃料酒精,其大致流程为:

(1)玉米秸秆预处理后,应该选用 进行水解,使之转化为发酵所需的葡萄糖.

(2)分离这种水解酶的野生菌株一般从土壤中筛选,所需要的培养基为 培养基,但现有的野生菌株对玉米秸秆的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株.

实验步骤:

①配制 (固体、半固体、液体)培养基,该培养基的碳源应为 .

②将野生菌株接入已经用 法灭菌的培养基平板上.

③立即用适当剂量的紫外线照射,其目的是对野生菌株进行 .

④菌落形成后,加入 染液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小,周围出现 (现象)的菌落即为初选菌落.

⑤分离、纯化菌种时为得到单菌落,常用 法和 法接种.

(3)发酵阶段需要的菌种是 ,生产酒精必须要控制的条件是 .

(4)生产的酒精易挥发但可溶于水,宜选用水蒸气蒸馏的方法从酵母菌代谢产物中提取.

为了检测饮用水中是否会有某种细菌,配制如下培养基进行培养:


  1. (1) 该培养基中提供碳源的物质有 ,提供氮源的物质有

  2. (2) 该培养基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质是 .

  3. (3) 该细菌在同化作用上的代谢类型是 型.

  4. (4) 该培养基可用来鉴别哪种细菌 (      ) .

    A . 霉菌 B . 酵母菌  C . 大肠杆菌 D . 乳酸菌 E . 醋酸菌
有关培养基配置原则表述正确的是(    )
A . 任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子 B . 碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素 C . 微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧、渗透压的影响 D . 营养物质的浓度越高越好
回答有关微生物的问题

分析表1培养基配方,回答有关问题.

表1

成分

葡萄糖

KH2PO4

FeSO4

NaCl

MgSO4•7H2O

琼脂

蒸馏水

含量

30g

1g

3g

3g

0.5g

15g

1L

  1. (1) 根据物理性质,该培养基属于培养基;根据用途划分,则属于培养基;根据培养基成分,所培养微生物的同化作用的类型是
  2. (2) 不论何种培养基,配制完成后都要在121℃,1.05kg/cm2下保持15﹣30分钟,此操作的目的是
  3. (3) 选用适合的培养基,制备成平板,分别用三个平板涂布接种三种细菌(E.coli、S.albus、B.subtilis),然后用镊子将三块沾有1万单位抗生素X、10万单位抗生素X和25万单位抗生素Y的圆纸片放在每个平板上,恒温培养.上述实验过程中需要灭菌的有_______(多选).
    A . 平板 B . 涂布工具 C . 圆纸片 D . 镊子
  4. (4) 经24小时培养后,测量圆纸片周围清晰区的宽度,数据如表2.

    表2

    细菌

    抗生素(浓度)

    X(1万单位)

    X(10万单位)

    Y(25万单位)

    E.coli

    7min

    14min

    18min

    S.albus

    32min

    36min

    17min

    B.subtilis

    8min

    16min

    26min

    在控制S.albus感染时,选用哪种抗生素及浓度较为合理?

  5. (5) 有病人感染B.subtilis而患病,选用25万单位抗生素X治疗该病人是不明智的做法,理由是_______
    A . 缺乏25万单位抗生素X的实验数据 B . 避免抗生素滥用 C . 10万单位抗生素X对 D . subtilis亦有作用 E . 25万单位抗生素X会对人体细胞造成损害
关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,叙述错误的是(    )
A . 将称量好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 B . 待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 C . 待平板冷却凝固约5~10分钟后将平板倒过来放置 D . 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物,某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。下列相关叙述错误的是( )

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A . 使用平板划线法可以在⑥上获得单个菌落 B . 如果要测定②中的活细菌数量,常采用稀释涂布平板法 C . 图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源 D . 微生物培养前,需对培养基和培养皿进行消毒处理
某培养基可用于分离土壤中特定的微生物,成分见表。回答下列问题:

葡萄糖

K2HPO4

K2SO4

NaCl

CaCO3

MgSO4•7H2O

蒸馏水

10g

0.2g

0.2g

0.2g

5g

0.2g

1000mL

  1. (1) 该培养基能为微生物提供的营养物质是。在该培养基和牛肉膏蛋白胨培养基上接种等量稀释的土壤浸出液,若牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数,则说明该培养基具有选择作用。
  2. (2) 获得纯净培养物的关键是,实验室中常使用(设备)对培养基灭菌。为了获得单个的菌落并计数,应在该培养基中加入并采用法接种。
  3. (3) 恰当的稀释度是计数成功的关键,若样品浓度过高,会出现的问题是。某同学将不同稀释度的菌液均取n毫升,分别接种在多个平面上,进行适宜条件的培养,待菌落数目稳定时记录结果,得到m倍稀释度的三个平板菌落数分别为32、42和52,则每升菌液中的细菌数为个。
图是在实验室中培养某种微生物的结果,相关说法错误的是(   )

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A . 该实验所采用的接种方法为平板划线法 B . 每次接种前都要将接种环进行灼烧灭菌 C . 该接种方法常用于微生物的分离纯化 D . 只有最后的划线区域才能得到单菌落
研究表明艾叶煎液具有抗细菌和抗真菌的作用。为研究艾叶煎液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌的抑菌能力,科研人员将若干浸泡了艾叶煎液的无菌圆纸片贴于分别培养有三种菌的平板上,然后将平板置于恒温培养箱中进行培养,一段时间后,测量抑菌圈直径并求平均值,结果如下表:

大肠杆菌

金黄色葡萄球菌

黑曲霉菌

抑菌圈直径/mm

6.38

7.65

0

请回答下列问题。

  1. (1) 可用法将菌液接种在固体培养基上,使菌体均匀分布,该种接种方法还可以用来计数,但统计的菌落数往往会比活菌的实际数目(填“多”或“少”),原因是
  2. (2) 置于培养箱中培养的平板需要(填“倒置”或“正置”),这样做的目的是。使用后的培养基在丢弃前需要经过处理。
  3. (3) 实验结果说明艾叶煎液对的抑制作用最明显。通过抑菌圈的直径可以判断艾叶煎液抑菌活性的高低的原理是。为使实验更具有说服力,应如何设置对照组?
  4. (4) 近些年人们发现了抗药性极强的金黄色葡萄球菌,有人认为是滥用抗生素诱发了基因突变所致,该观点(填“正确”或“不正确”),原因是
夏日炎炎,空调是人们日常生活不可或缺的家电之一舒爽的凉风里可能藏着引发“空调病”的危险分子——嗜肺军团菌。该病菌被免疫细胞吞噬后不被分解而让自己不断扩增壮大,最终导致重症肺炎。回答下列问题:
  1. (1) 嗜肺军团菌的培养基的营养成分包括和特殊营养物质五大类,配制好的培养基通常采用法进行灭菌。
  2. (2) 为了避免培养基在培养过程中被污染,一般需将含有培养基的培养皿。为了排除培养基被污染,需设置接种等量的培养基作为空白对照。
  3. (3) 筛选获得的嗜肺军团菌株经鉴定后,将菌株进行液体扩大培养用于药物研究。培养时需要振荡,其主要目的是。为了测定培养液中的菌体数量,一般采用法将一定量的菌液接种到固体培养基上,该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数,一般选择菌落数在的平板进行计数。该方法使用时需对菌种进行梯度稀释,原因是
地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨,其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用,这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维酶的纤维素分解菌,其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养,得到若干菌落后用刚果红处理,看到如图2所示情况,下列有关叙述,错误的是(   )

A . ②过程是涂布器取乙中的菌液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面 B . 甲、乙试管中的液体都属于液体培养基,主要作用是稀释菌种 C . Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基,配置时先灭菌后调节pH D . 可挑取图2中周围出现透明圈的菌落,用平板划线法继续纯化
研究小组为了探究覆盖保鲜膜对西瓜表面微生物的种类和数量的影响,他们将覆盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液,再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是(  )
A . 应用液体培养基接种浸出液进行培养 B . 应采用平板划线法对浸出液进行接种 C . 每组至少设置三个平板,确保实验结果的准确性 D . 只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照.
大肠菌群是指一类在35~37 ℃条件下培养48 h,能发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌的总称,大肠杆菌属于大肠菌群的一种。我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准是:一、细菌总数1 mL水中不超过100个;二、大肠杆菌数1 L水中不超过3个。国标一般采用多管发酵法检测样品中大肠菌群数,具体分为三步:

蛋白胨

10.0

牛肉膏

3.0

乳糖

5.0

氯化钠

5.0

pH

7.3±0.2

H2O

定容至1000 mL

①初发酵试验:将待测样品稀释后,选择3个稀释度,每个稀释度分别接种到5支发酵管中,37 ℃培养48 h,观察是否产气。

②平板分离:将产气发酵管中的菌液分别接种于伊红美蓝培养基(生长在此培养基上的大肠菌群呈深紫色,有金属光泽)上,置于37℃恒温箱内培养24h,观察菌落形态。

③复发酵试验:挑取平板上呈深紫色,有金属光泽的菌落,进行染色镜检。将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步发酵试验。最后根据证实为大肠杆菌阳性的管数,按统计学原理即可得出大肠菌群数(每升或每100 毫升中的个数)。

  1. (1) 初发酵乳糖蛋白胨培养基配方(g/L)如表所示,按物理性质分类,乳糖蛋白胨培养基属于培养基,其中的碳源有
  2. (2) 若检测饮用水中的大肠杆菌数,则①步骤无须稀释,原因 ,①步 骤每个稀释度分别接种到5支发酵管中的原因是
  3. (3) ②步骤中不能直接用涂布器把菌液涂布在平板上进行大肠菌群计数,原因是
  4. (4) 伊红美蓝培养基在配制后通常用法进行灭菌,③步骤中只能挑取符合特征的菌落其中的一小部分进行镜检,这是因为
硒是一种生命活动必需的微量元素。亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用,土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。

 

请回答下列问题:

  1. (1) 在接种土壤样品之前,需要对①中的培养基进行高压蒸汽灭菌。灭菌时间到后,要先切断电源,待灭菌锅内温度自然下降至压力表降到零时再打开排气阀。这样做的目的是
  2. (2) 在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中,用到的器具除了烧杯、酒精灯之外,还有,从功能上看,③中的培养基属于培养基,在④中,可根据对符合要求的目的菌株进行筛选。
  3. (3) 研究者要根据培养基④中的菌落数目来计算出②的培养液中的菌体数目,其依据的原理是:当样品的时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
  4. (4) 上述实验的各个环节都必须做到严格的操作,有些用品还必须进行灭菌处理。灭菌是指
如图为某同学设计的酿制苹果醋的基本流程和发酵装置示意图。请回答下列问题:

  1. (1) 过程①需要先清洗后切块,以减少,过程③发酵所需的微生物是
  2. (2) 过程④为醋酸发酵,在变酸的酒表面观察到的菌膜是在液面大量繁殖而形成的。若要对该菌进行初步分离纯化,比较便捷的操作是采用(填“平板划线”或“稀释涂布平板”)法把它们接种到(填“固体”或“液体”)培养基上,经培养得到肉眼可见的菌落。
  3. (3) 在发酵装置示意图中,进行过程④需要将装置中的充气口开关
  4. (4) 制作果酒和果醋的两种微生物,两者在结构上最主要区别是;从代谢类型上看,两者的相同之处是
  5. (5) 果酒进一步发酵能获得果醋,酒变醋的原理是
结核杆菌是一种专性需氧菌,是引起肺结核的罪魁祸首。由于多种因素的影响,近年来肺结核病日趋严重。在2018年的调查中发现全球51%的结核病患者细菌利福平(一种抗生素)耐药检测为阳性,为了筛选新的抗结核药物,进行了下述研究。

实验一:结核杆菌的筛选和鉴定。步骤如图。

  1. (1) 罗氏培养基的主要成分为蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿(可抑制杂菌生长)。实验中步骤②的目的是
  2. (2) 获取单菌落时,使用(工具)采用法将菌液接种在罗氏固体培养基上。
  3. (3) 以下关于结核杆菌及其筛选和鉴定中的说法,正确的有       
    A . 结核杆菌细胞内只有一种核酸 B . 完成步骤①后,应对牛肉膏蛋白胨液体培养基进行振荡培养 C . 可根据在固体培养基上形成菌落的形状、颜色、边缘及表面来鉴别结核杆菌 D . 罗氏培养基中的蛋黄可为结核杆菌提供生长因子
  4. (4) 实验二:特效药物筛选

    近年来,德拉马尼、贝达喹啉和普利土曼3个药物已经获得监管部门的上市批准。通过药敏试验研究这三种药物对肺结核的疗效,结果如图。A、B、C、D分别为浸过无菌水、相同浓度的德拉马尼、贝达喹啉和普利土曼的滤纸片。

    MIC是药敏试验中评价药物药效的常用指标,其定义为某种药物对测试菌的最低抑制浓度。据图判断,三种药物中MIC最小的是

  5. (5) 贝达喹啉是结核杆菌腺苷三磷酸合成酶抑制剂。试述其抑菌机理:
人体皮肤表面存在着多种微生物,某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述有关叙述正确的是(   )
A . 对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌 B . 使用无菌棉拭子从皮肤表面取样 C . 采用平板划线法对获得的菌株进行计数 D . 观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌,在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力,并分析两个菌株的其他生理功能。

实验所用的培养基成分如下。

培养基Ⅰ:K2HPO4 , MgSO4 , NH4NO3 , 石油。

培养基Ⅱ:K2HPO4 , MgSO4 , 石油。

操作步骤:

①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养,得到A、B菌液;

②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂,分别制成平板Ⅰ、Ⅱ,并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。

回答下列问题。

  1. (1) 实验所用培养基中作为碳源的成分是。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源,氮源在菌体内可以参与合成(答出2种即可)等生物大分子。
  2. (2) 步骤①中,在资源和空间不受限制的阶段,若最初接种N0个A细菌,繁殖n代后细菌的数量是
  3. (3) 为了比较A、B降解石油的能力,某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验,结果如表所示(“+”表示有透明圈,“+”越多表示透明圈越大,“-”表示无透明圈),推测该同学的实验思路是

    菌株

    透明圈大小

    平板Ⅰ

    平板Ⅱ

    A

    +++

    ++

    B

    ++

    -

  4. (4) 现有一贫氮且被石油污染的土壤,根据上表所示实验结果,治理石油污染应选用的菌株是,理由是
涂布分离法可用于微生物的技术,下列叙述正确的是(   )
A . 选取具有最少菌落数的稀释倍数进行计数 B . 严格厌氧微生物的计数宜采用涂布分离法 C . 涂布培养基上的菌落数代表样品中的全部菌数 D . 样品中待测菌数量多而稀释倍数太小时计数结果会偏小
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