第2节微生物的培养技术及应用知识点题库

请选出下列正确的取样培养操作步骤
①土壤取样
②称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中
③吸取0.1ml进行平板涂布
④依次稀释至10、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷稀释度

A . ①→②→③→④ B . ①→③→②→④ C . ①→②→④→③ D . ①→④→②→③

图甲表示酵母菌的细胞结构，图乙表示血细胞计数板一个中方格的实验结果。下列说法正确的是

A . 图甲中酵母菌可产生CO₂的场所是②、③，产生酒精的场所是③ B . 酵母菌厌氧呼吸的终产物经主动转运到细胞外 C . 图乙中利用标志重捕法调查该中格有酵母菌23个 D . 计数操作时，应先往计数室滴1mL培养液，盖上盖玻片后再镜检

某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。请回答：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。
（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行处理。为了排除，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。
（3）为了筛选出菌株，可将适量的试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。
（4）纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用法接种于新的培养基平板上。
（5）试验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是。

为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如下培养基进行培养：

（1）该培养基中提供碳源的物质有，提供氮源的物质有．
（2）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是．
（3）该细菌在同化作用上的代谢类型是型．
（4）该培养基可用来鉴别哪种细菌　（）　．

A . 霉菌 B . 酵母菌 C . 大肠杆菌 D . 乳酸菌 E . 醋酸菌

生命科学探究

氧化硫硫杆菌（TT03）是一种化能自养细菌，它能将硫单质氧化为硫酸，常用于改良盐碱地，而盐碱地中的重金属离子会影响改良效果．以下是有关硫酸锌对TT03产酸量影响的研究：

试剂与仪器：蒸馏水，两种浓度的硫酸锌溶液，液体培养基，恒温摇床等．

（1）实验步骤：

①第一步：在液体培养基中先加入等量硫单质、再分别加入等量蒸馏水和两种浓度硫酸锌溶液并标记．

②第二步：对配制好的培养基进行．

③第三步：各组接种．后放入恒温摇床中培养7天．

④第四步：每天测定并记录各组的．

⑤实验结果：如图1所示．

（2）分析回答：

①TT03将CO₂和H₂O合成有机物所需能量来源于．

②培养TT03的液体培养基与培养大肠杆菌的液体培养基组成成分上最大的区别是

③分析图22可知，硫酸锌对TT03产酸的影响是．

④研究人员用相同的方法继续研究醋酸铅对TT03产酸量的影响，请完善实验结果记录表．

如图是微生物平板划线示意图．划线的顺序为1、2、3、4、5．下列操作方法正确的是（）

A . 操作前要将接种环放在火焰旁灭菌 B . 划线操作须在火焰上进行 C . 在5区域中才有可能得到所需菌落 D . 在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌

为调查自来水的水质情况，某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌数量进行了测定．回答下列问题：

（1）用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应（填“大于”或“小于”）大肠杆菌，将已知体积的水用滤膜过滤，然后将放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现色，该培养基属于（填“液体”或“固体”）培养基，培养基中的蛋白胨为大肠杆菌提供．
（2）该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因而遗漏菌落的数目．通过统计菌落的数目计算出水样中大肠杆菌的数量，其原理是，但测定值比实际值（填“偏高”或“偏低”），原因是．
（3）大肠杆菌与制作果酒用的酵母菌在结构上最主要的区别是．

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是（）

A . 筛选出能分解尿素的细菌 B . 对分离的菌种做进一步的鉴定 C . 培养基中还缺乏酚红指示剂作细菌的营养物质 D . 若指示剂变蓝我们就能准确地认定该菌能分解尿素

苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学设计实验从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株，请回答下列问题：

（1）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学设计实验从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株，请回答下列问题：
①苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K₂HP0₄、MgS0₄、苯酚和水，其中可作为碳源的有。
②将采集到的样品进行选择培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐，以达到增加苯酚降解菌浓度的目的。
③下图为平板划线法示意图，在图中（填图中序号）区域更易获得单菌落。制备平板培养基时除了需要水、无机盐及各种营养物质外，还必须添加。
④采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中2〜5号比色管的苯酚浓度应分别为。
试管号
1
2
3
4
5
6
苯酚浓度（mg/L）
0

1
（2）番茄红素是一种类胡萝卜素（脂溶性），不溶于水，化学性质比较稳定，主要存在于番茄、西瓜等植物中。
a.提取番茄红素常用（填“乙醇”或“石油醚”）萃取，理由是。
b.番茄红素提取实验的流程为：植物→粉碎→①→萃取→②→浓缩→番茄红素，其中，①表示，②表示。
c.该实验操作过程中萃取环节采用水浴加热的原因。
d.番茄红素粗品的鉴定方法是。

目前，β一胡萝卜素既可以从岩藻中提取，又可以利用微生物的发酵生产。请回答以下问题。

（1）从岩藻中提取β一胡萝卜素常用法，在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是，提取的β一胡萝卜素粗品可通过进行鉴定。
（2）利用红酵母菌发酵生产β一胡萝卜素时，首先要对操作仪器进行无菌处理，其中对培养皿进行灭菌。培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右才能倒平板，估计培养基温度的方法是。
（3）微生物接种常采用法进行微生物的分离和计数，这种操作的核心是。通过观察菌落的、大小、颜色隆起程度等特征对微生物进行鉴定。

下图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：

（1）土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌中的脲酶催化尿素分解成。因此，图中选择培养基应以尿素为微生物营养中唯一。鉴别培养基还需添加酚红作。
（2）在向培养基接种土壤稀释液中微生物时，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。此外，微生物接种技术还包括、等方法。
（3）若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品0.1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为个。运用这种方法统计的结果往往较实际值（填“偏大”或“偏小”），原因是。

漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，下列相关叙述错误的是(　　)

A . 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B . 筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C . 在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化 D . 在适宜温度下，接种后的斜面培养基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株

关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述错误的是（　　）

A . 只能用于固体培养基接种 B . 都可以用于微生物的计数 C . 接种培养后均可获得单菌落 D . 接种用具都需进行严格灭菌

如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（　　）

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A . 3号试管的稀释倍数为10³倍 B . 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁸个 C . 4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数约为5号试管的10倍 D . 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高

我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个，大肠杆菌不得检出。某兴趣小组为测定本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌，进行了如下实验：

①分别配制营养琼脂培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂、H₂O）和伊红美蓝培养基（成分：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、H₂O），灭菌。

②取水样。

③先测定甲项指标：用灭菌吸管吸取ImL水样，涂布到营养琼脂培养基中；置于37 ℃培养24h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。

④用滤膜法测定乙项指标，装置和操作如下图。

回答下列问题：

（1）步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3min，目的是。
（2）步骤③测定的指标甲是。水样涂布前无需稀释，理由是。
（3）步骤④测定乙项指标，主要观察滤膜上是否会出现色菌落。配制伊红美蓝培养基时，先用蛋白胨、NaCl、琼脂配制基础培养基，在l00kPa、121℃条件下灭菌后，冷却至60^。C左右，再加入经70kPa、115℃条件下灭菌的乳糖、伊红、美蓝水溶液，后者灭菌条件不同的原因是。
（4）兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少，担心检测不到，因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据（填“可信”或“不可信”）.理由是。

酵母菌是一类真菌，在生产生活中有许多应用，多个生物兴趣小组围绕酵母菌展开研究请回答相关问题：

（1）兴趣小组一进行自制葡萄酒实验。他们共制作了3套发酵装置，加入材料后发醇10天。发酵结束后小组成员用试剂检验酒精产生与否，若呈现色则证明有酒精产生。
（2）在进行“产品”品尝时，兴趣小组一的同学都感到其中一套装置中的“产品”明显发酸，其原因最可能该装置，导致最终的产品中含有
（3）兴趣小组二用液体培养基培养能产生胡萝卜素的酵母菌品种。为了检测培养3天后培养液中酵母菌的数量，他们取了1mL培养液，在稀释倍数为10⁴倍下，涂布了三个平板（每个平板的涂布量为0.1mL），培养后统计菌落数分别为147、152、163，则稀释前所取的1mL菌液中所含酵母菌为个。此种方法统计的微生物数目往往比实际数目。
（4）兴趣小组二用纸层析法对培养液中获得的“产品”进行鉴定，点样时除了点提取样品外还要点样品，当观察到时，说明产品含有胡萝卜素。

下列常用的无菌操作错误的是（）

A . 无菌操作不要求杀死培养基内的一切微生物 B . 用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒 C . 实验操作过程中应在酒精灯火焰附近进行 D . 玻璃器皿可用酒精擦拭来进行灭菌

金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液〉上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题。

（1）从培养过程分析，金黄色葡萄球菌的代谢类型是。
（2） 7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分，除氮源外还有。氮源进入细胞后，可参与合成的多聚体有（答出两点即可）。用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是。
（3）实验操作中，在血平板上的接种方法是。若取培养液1mL，稀释100倍后吸取0.1mL的稀释液，用上述接种方法接种到5个血平板上，经培养后，5个血平板上出现透明圈的菌落数分别为50、48、51、52、49，由此可知每毫升培养液中活菌的数目为个。
（4）在制备血平板时需将pH调节至（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基冷却后，再加入适量血液。血平板在接种金黄色葡萄球菌前，往往随机选取部分灭菌后的空白培养基先培养一段时间，这样做的目的是。
（5）经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。

为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（）

A . 将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B . 涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C . 需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间 D . 挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析

葡萄酒作为葡萄的主要深加工产品之一，在生产过程中会产生大量的酿酒残渣，每年我国的酿酒残渣量大概有50万吨左右，仅有少量被回收利用，绝大部分用做肥料、饲料甚至被当作垃圾扔掉，造成了资源的极大浪费，也给环境带来了巨大的压力。因此，如何合理利用酿酒葡萄残渣成为葡萄产业发展中亟待解决的问题。请回答下列问题：

（1）制作葡萄酒需要酵母菌，其代谢类型为，家中制作葡萄酒时可以不添加酵母菌，原因是。酿酒时先通气，其中O₂的作用是，之后需要密封，若密封不严混入空气，发酵液会变酸，其可能原因为。
（2）可以利用萃取法从葡萄残渣中提取植物油，萃取前将原料干燥和粉碎的目的是。萃取效率主要取决于。植物油溶解于有机溶剂后，只需，就可以获得纯净的植物芳香油。
（3）为了解残渣中微生物的数量，取10g残渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上。10⁴倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为88、92和99，则每克残渣中微生物数量为个。
（4）酿酒葡萄残渣中膳食纤维含量较高，约占干物质的75%，其中的纤维素可以被纤维素酶水解，纤维素酶是一种复合酶包括C₁酶、和，前两种酶使纤维素分解为。在筛选纤维素分解菌的过程中，发明了染色法，其原理为。
（5）有科学家利用黑曲霉菌株发酵酿酒葡萄残渣生产出了果胶酶，果胶酶在果汁生产中有着重要的应用，其作用有 (写出一条）。

试管号	1	2	3	4	5	6
苯酚浓度（mg/L）	0					1

第2节 微生物的培养技术及应用 知识点题库

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