第2节微生物的培养技术及应用知识点题库

下面对有关无菌操作理解不正确的是

A . 实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行 B . 无菌操作的目的是防止杂菌污染 C . 玻璃器皿如培养皿可用酒精擦拭 D . 培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法

生物柴油能减缓人类对石油的依赖，降低大气污染物的排放．假丝酵母分泌的脂肪酶能把植物油转化为生物柴油（脂肪酸甲脂）．请回答：

（1）筛选假丝酵母时，培养基中应以为唯一碳源．根据培养基中菌落外周大小，挑取脂肪酶产量及活性高的假丝酵母．
（2）脂肪酶为胞外酶，存在于假丝酵母培养液中，利用多孔树脂柱可分离酵母液中脂肪酶，此方法称为．测定培养液中假丝酵母数量的常用方法是．
（3）用氨基化硅胶做载体，用戊二醛做交联剂可固化脂肪酶，此种固化方法为．固化酶技术使酶得以，降低了生产成本．
（4）微藻中的ACC基因可提高油脂的含量，在将ACC基因导入微生物前，需用技术扩增ACC基因，该过程需要催化．

在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数．

（1）如图是利用法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面．

（2）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O．若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述成分，并加入，以补充源．

（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量．在对应稀释倍数为106培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，平均值248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；在三位同学统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确．

（4）若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233，那么每毫升样中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）

梯度稀释过程中用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次，其目的是（）

A . 增加试管内的溶氧量 B . 使菌液与水充分混匀 C . 使试管中菌液的浓度降低 D . 使细菌的形态结构发生改变

请回答下列有关问题：

（1）辣椒中产生辣味的物质是辣椒素，不溶于水，易溶于有机溶剂，可以用的方法提取，其效率主要取决于，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量等条件的影响．
（2）在对具有优良性状的辣椒进行组织培养，对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是，外植体的消毒所需酒精的体积分数是，用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是和纤维素酶，若愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是．
（3）若组织培养过程中感染了某种霉菌，可采用法接种进行分离并计数．与这种方法相比，显微镜直接计数的不足是．

【加试题】回答与生物技术实践有关的问题：

（1）制作果醋时，需事先将醋化醋肝菌进行培养，可在含酵母提取物、、甘露醇等的液体培养基中扩大菌种数量。如未能获得醋杆菌，则可用代替。然后加入果酒与蒸馏水配比为的发酵液。
（2）制作泡菜时欲缩短发酵周期，可加入适量。在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，显色剂由对氨基苯磺酸与组成。
（3）在微生物实验操作中，为了防止污染，往往需要事先进行消毒或灭菌。下列是用于消毒处理的是___________。
①外植体 ②培养基 ③医用注射器 ④注射药物时的皮肤 ⑤接种环 ⑥手术刀

A . ①④ B . ①②③ C . ③④⑥ D . ①②③④⑤⑥

下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（　）

A . 菌落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据 B . 可利用液体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型 C . 利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌 D . 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌

以下是制作酸奶的生物化学过程：将适宜的菌种接种到牛奶中，产生的乳酸使牛奶蛋白凝聚形成浓稠的酸奶。酸奶的发酵剂中含有大体等量的两种细菌（保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌）。保加利亚乳杆菌在无氧条件下分解牛奶中的乳糖产生乳酸，还产生多肽酶，将牛奶蛋白分解成多肽和氨基酸；这些反应会刺激嗜热链球菌生长，产生二氧化碳和甲酸，使得发酵液的pH降低，这又会促进保加利亚乳杆菌的生长和代谢。

（1）用于制作酸奶的牛奶原液首先必须进行高温处理，其目的是，以保证接种
后的正常发酵；操作者的双手需进行清洁和；操作间内静止空气中的细菌可用物理方法杀灭，也可以用化学试剂（列出两种）进行消毒。
（2）牛奶原料中不能含有抗生素，这是因为。
（3）发酵剂中的两种细菌之间的关系属于。
（4）包装的酸奶在2～4℃下保存，这样可使细菌存活但无活性，食用酸奶前不需要杀死
细菌这是因为用于酸奶发酵的两种微生物，且能抑制人体中的某些有害菌群，因此不必灭菌即可食用。

以下关于实验和实验方法的叙述中正确的是 ( )

A . 微生物实验中所有用具和材料都要经过高压蒸汽灭菌法灭菌 B . 通过比色法检测亚硝酸盐含量不需要每次配制标准显色液 C . 泡菜腌制的时间长短会影响亚硝酸含量，温度和食盐的用量不影响 D . 可应用放射性同位素标记的病毒基因来检测病毒感染

如表表格内容中，有错误的选项是（）

	检测物质或生物	检测方法	显示颜色变化
A	大肠杆菌	滤膜法	菌落变黑
B	亚硝酸盐	比色法	玫瑰红色
C	分解尿素的细菌	酚红指示剂检测法	红色
D	分解纤维素的细菌	刚果红检测法	红色变深

A . A B . B C . C D . D

防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（）

A . 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B . 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌 C . 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染 D . 平板划线接种时，应先将皿盖打开并放置于桌面上，以便于划线操作

羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质，目前缺乏对其高效降解的处理方法。实验人员从废弃羽毛堆积处的土壤中升离筛选出具有高效降解羽毛角蛋白的细菌，请回答下列问题：

（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是。
（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入作为唯一碳源，该培养基中还需要加入适量的K₂HPO₄和KH₂PO₄ ，其作用是，对培养基灭菌的常用方法是。
（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了测定其角蛋白酶的活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子的不同，将蛋白质分离。测定羽毛降解菌角蛋白酶活性的主要目的是。

有些细菌可分解原油，从而消除原油泄漏造成的环境污染，某同学欲从土壤中筛选出高效降解原油的菌株，回答下列问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行，以避免环境中微生物的污染。
（3）对这些微生物的临时保藏，通常首先将菌种接种到试管的固体培养基上，在合适的温度下培养，菌落长成后，将试管放入℃的冰箱中保藏。
（4）醋酸杆菌是生产葡萄醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，一般采用平板倒置培养，原因是。

某种细菌菌株需要亮氨酸才能生长，但此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表格中细菌菌株类型，则配制相应选择培养基类型正确的是（）

选项	筛选出不需要亮氨酸的菌株	筛选出抗链霉素的菌株	筛选出不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株
A	L＋　S＋	L－　S－	L＋　S－
B	L－　S－	L＋　S＋	L－　S＋
C	L－　S＋	L＋　S＋	L－　S－
D	L＋　S－	L－　S－	L＋　S＋

注：L代表亮氨酸，S代表链霉素；“＋”代表加入，“－”代表不加入A．A

A . B B . C C . D

米诺环素（分子式：C₂₃H₂₇N₃O₇）是一种四环素类抗生素，应用于人类疾病治疗和畜禽养殖。由于进入人体或动物体内不能完全被吸收，造成其在环境中残留。某研究人员在自然水域中筛选和分离得到了一种米诺环素高效降解菌DM13，并展开相关研究。下表是研究过程中使用的培养基种类及配方，回答下列问题。

培养基种类	配方
BP培养基	蛋白胨5.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g，蒸馏水定容至1000mL
BPA培养基	蛋白胨5.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g、琼脂25.0g，蒸馏水定容至1000mL
MM培养基	MgSO₄•7H₂O 0.15g、FeSO₄•7H₂O 0.01g、CaCl₂0.02g、KH₂PO₄1g、Na₂HPO₄1g、NH₄NO₃1g、葡萄糖0.5g，蒸馏水定容至1000mL

（1）分离微生物前，可通过选择培养来增加米诺环素降解菌的浓度，需在BP培养基中添加一定浓度的，该物质同时提供微生物生长需要的。
（2）选择培养得到的微生物样品先稀释，再涂布到（BP/BPA/MM）培养基的平板进行培养。如果水样中降解米诺环素的微生物数量较少，为了避免分离筛选失败，可采取的措施是（回答1点）。
（3）为了测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果，在锥形瓶中用自然水体配制四种不同初始浓度的米诺环素溶液，进行实验。
①8h处理后，在米诺环素溶液初始浓度100ug/L的水体中，空白对照测得的米诺环素溶液浓度41.8ug/L，加入菌株DM13测得的浓度24.3ug/L，相较空白对照组，米诺环素降解菌的降解率为。

②为了测定菌株DM13的实际降解效果，可选择表中的MM培养基替换自然水体，这样做的目的是。

下列关于“分离以尿素为氮源的微生物”实验的叙述，正确的是（）

A . 在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌 B . 液体培养基振荡培养的目的是使微生物均匀分布以便涂布 C . 对含有尿素的培养基进行灭菌时，需降低高压蒸汽灭菌的压力与温度 D . 称取土壤、稀释土壤溶液、涂布平板这些操作都需要在酒精灯火焰旁进行

羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，PHA可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列叙述错误的是（）

①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌体的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株

A . ④中扩大培养应选用液体培养基培养 B . 步骤③的培养基为固体培养基，长出的单菌落不一定能合成PHA C . 步骤②采用稀释涂布平板法，培养基为添加了PHA的选择培养基，目的是筛选嗜盐细菌 D . 步骤⑤所获数据，可用于计算单一菌体产生PHA的效率

我国传统酿造技术历史悠久，如腐乳的制作、白酒和陈醋的酿造等。其中白酒的发酵和醋的酿造主要生产工艺流程如下图。请回答下列有关问题：

（1）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。先通气的目的是，有利于密闭时获得更多的酒精产物，酒精可使用对其进行检测。
（2）在醋酸发酵过程中，除严格控制温度外，还需。采用活菌计数法测定醋酸杆菌活菌的数量，常用稀释涂布平板法，为保证结果准确，一般选择菌落数为的平板进行计数，除上述活菌计数法外，也是测定微生物数量的常用方法。
（3）腐乳是豆腐经多种微生物发酵后制成的食品，其中起主要的作用的微生物是。制作的后期可加入卤汤，卤汤中需要加入酒，含量一般控制在%左右，加酒的作用是。

阅读下列材料，回答下列题：

发酵食品的制作就是利用有益微生物来酿造人类喜爱的风味食品。发酵食品中微生物的种类多种多样，不同的发酵食品需要不同的微生物，在发酵过程中选择和培养合适的菌种尤为重要。我国有着悠久的发酵史，除了酿酒，酱油也是我国最早生产的，而在西周时期就已经有了高粱变酒变醋的传说。

（1）国产食醋的发酵菌种中有曲霉、酵母菌、醋酸菌等多种微生物。下列关于培养基的叙述正确的是( )

A . 培养基都含有水、无机盐、琼脂、碳源和氮源 B . 培养基只能用来扩增、分离和鉴定菌种 C . 培养基各成分都需要进行高压蒸汽灭菌 D . 培养基中的成分与所培养菌种的代谢有关
（2）现代工艺酿酒采用的酵母菌菌种要求发酵稳定，出酒率高。为了得到理想菌株，人们需要通过实验室培养从众多酵母类群中分离纯化出目标菌株。下列关于分离纯化操作的叙述中，错误的是( )

A . 分离纯化的目标菌株是能耐较高浓度酒精的菌株 B . 分离微生物可用平板划线法或稀释涂布法 C . 得到的目标菌株常需要进一步稀释分离 D . 常在通入足量氧气的液体培养基中进行纯化培养
（3）酱油是以大豆、小麦为原料，经蒸煮、酱曲与盐水混合发酵制成的。需要曲霉、酵母菌、乳酸菌等多种菌种参与，米曲霉在曲料上生长发育，可产生蛋白酶、肽酶、淀粉酶、谷氨酰胺酶、果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶等。由乳酸菌产生适量乳酸，由酵母菌发酵生产乙醇。醇、醛、酸、酯等代谢产物虽微量却能构成酱油复杂的香气。下列叙述错误的是( )

A . 酱油制作是一种混菌发酵过程 B . 各种微生物的营养物质都直接来自发酵原料 C . 小麦粉含有淀粉、蛋白质、果胶和纤维素 D . 酱油中含有蛋白质、氨基酸、乙醇等成分
（4）高粱经蒸煮后加入酒曲，酒曲中的红曲霉菌对淀粉具有糖化功能。并能产生多种色素，酒曲中的酵母能进行酒精发酵，发酵完毕后可得到红曲酒。该制酒流程在温度、菌种等方面都需要一定的操作要求。下列叙述正确的是( )

A . 淀粉糖化过程发生在红曲霉菌细胞内 B . 红曲酒的酒精浓度与酵母菌对乙醇的耐受性有关 C . 发酵过程中每天需开盖翻动发酵料，以加快发酵速度 D . 红曲酒风味只与发酵过程中温度、pH、氧气等环境因素有关

无菌操作是微生物培养过程中的关键环节，下列叙述错误的是（）

A . 煮沸可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，达到消毒目的 B . 培养真菌时，在培养基中加入青霉素可抑制某些细菌的生长 C . 在酒精灯火焰旁操作可以减少空气中微生物落入培养基的可能性 D . 含葡萄糖的培养基需在121℃（1kg/cm²）条件下高压蒸汽灭菌20分钟

第2节 微生物的培养技术及应用 知识点题库

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