第2节微生物的培养技术及应用知识点题库

关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（）

A . 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B . 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C . 待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D . 待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置

配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO₃、Na₂HPO₄、KH₂PO₄、MgSO₄、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖（）

A . 酵母菌 B . 自生固氮菌 C . 各种细菌 D . 纤维素分解菌

下列有关生物技术在实践中的应用的叙述，正确的是（）

A . 加酶洗衣粉就是添加了固定化酶的洗衣粉 B . 微生物培养基的各种组分均来源于动物原料 C . 果酒制成后，可将装置转移至温度较高的环境中并持续通氧制果醋 D . 腐乳发酵过程中毛霉和根霉为互利共生关系

下列操作中，能防止杂菌污染的有（）

A . 早期胚胎的培养液中添加维生素 B . 分离酵母菌的培养基中添加青霉素 C . 腐乳装瓶腌制时在近瓶口处加大用盐量 D . 微生物培养时在酒精灯火焰旁倒平板

【生物--选修1：生物技术实践】.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶．其中的葡萄糖苷酶可将分解成．
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物．用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的．
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
酵母膏
无机盐
淀粉
纤维素粉
琼脂
CR溶液
水
培养基甲
+
+
+
+
﹣
+
+
培养基乙
+
+
+
﹣
+
+
+
注：“+”表示有，“﹣”表示无．
据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是．

美国科学家发现了一种能将溶解在水中的铀还原成难以溶解的铀的地杆菌，可缩小铀污染的范围，而其他的细菌则不能在含铀的环境中生存．科学家为了研究这种地杆菌的生理特性，需对其进行分离和培养．请回答下列问题：

（1）培养基中一般含有微生物生长所需的水、和无机盐等．制备培养基时常用的灭菌方法是．
（2）为了分离出能够还原铀的地杆菌，可在培养基中加入，从用途上看，这种培养基称为．对样品中地杆菌活菌的数目进行统计时常采用的方法是和显微镜直接计数法．
（3）在稀释倍数为10⁶倍下涂布了三个平板（每次取0.1mL），统计菌落数分别为240、250、260，则稀释前1mL菌液中所含细菌为个．
（4）获取地杆菌后如要临时保存，可将其接种在上，等长成菌落后放在的冰箱中保存．

自生固氮菌是一类能独立固定氮气的细菌，其中有些好氧的种类能产生PHB（一种可以被生物降解的塑料）．现欲获得高产PHB的自生固氮菌菌种，操作流程如下：采集土样→富集培养→分离、纯化培养→初步筛选PHB固氮菌→筛选高产PHB固氮菌→保存备用．回答下列问题：

（1）富集培养时，为达到筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时不应添加．培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，其目的是．
（2）进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板．此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，其中添加了一定量的．倒平板时，要待高压灭菌后的培养基，再在附近操作．平板冷凝后，需置于恒温箱中1﹣2天后再用于接种，目的是．
（3）分离纯化培养后，得到8种形态特征有所不同的单菌落．经染色鉴定，其中3种能产生PHB．那么如何进一步筛选出高产PHB的菌种呢？请说出你的实验思路．

近年来市民中流行自酿葡萄酒，但自酿葡萄酒时培养瓶发生爆炸的新闻时有报道．回答下列问题：

（1）自酿葡萄酒用的培养瓶爆炸，原因可能是发酵过程中产生的过多，导致内部压强过大所致．为避免这种危险的发生，应采取的措施是．
（2）在分离和培养酵母菌时，需要进行无菌操作，对耐高温、需要保持干燥的培养皿和金属用具，宜采用灭菌．将得到的菌株接种到液体培养基中混匀后，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现振荡培养的细菌生长速度更快，究其原因，振荡培养能提高培养液中的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的利用率．
（3）在酸性条件下，可用来检测发酵产物中是否有酒精产生．若要检测所得果酒中活体酵母菌的密度，一般采用法，但此种方法最终计算得出的菌体数目往往比实际菌体数目少，原因是．

如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题．

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K₂HPO₄	指示剂	琼脂
含量（g）	10.0	5.0	5.0	2.0	0.2	12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

（1）若根据用途划分，该培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基．若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？，并用作为指示剂．
（2）图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是：和，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的菌落．图所用的接种方法可用来对活菌进行计数．某实验小组采用该方法检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为．
（3）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有　　．

A . 制作果酒 B . 由果酒制作果醋 C . 制作泡菜 D . 制作腐乳．

如图是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。实验步骤：

①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。

②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基二上，随即再影印到含链霉素的培养基3上，进行培养。

③在培养基3上，出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出。请分析回答：

（1）配制培养大肠杆菌的培养基除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对、和的要求。若在培养基中加入伊红美蓝，则培养皿中长出的菌落颜色为。
（2）从功能上看，含有链霉素的培养基3属于。
（3）由上图可知，原始菌种接种到培养基1的方法是。
（4）对培养基2和培养基3上的菌落进行比较，在培养基2上找到培养基3上相应的菌落。挑取其中一个菌落，接种到（含链霉素/不含链霉素）培养基4上。经培养，发现有较多的菌落。则发生抗链霉素基因突变发生在（填“接触到链霉素之前”或“接触到链霉素之后”）。
（5） 3中的菌落比1，2中的菌落少很多，这说明了基因突变具有的特点。

关于MS培养基与微生物培养基的配方相比不同之处，说法错误的是（）

A . MS培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要 B . MS培养基中的碳源和能源是蔗糖，微生物培养基中的碳源和能源主要是葡萄糖 C . MS培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素 D . MS培养基中不需加维生素，微生物培养基中要加维生素作生长因子

请选出下列正确的操作步骤（）

①土壤取样 ②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中

③吸取0.1mL进行平板涂布 ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵稀释度

A .

B .

C .

D .

通过生物技术提取胡萝卜素的流程图如下：

（1）培养酵母菌D时，培养液中的葡萄糖为酵母菌D的生长提供。提取胡萝卜素所使用的玻璃器皿灭菌方法是。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素时需要尽量除去其内的水分，干燥过程应控制好温度和时间以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用方式加热，以防止温度过高；萃取剂宜选用（填“石油醚”“乙醇”或“乙酸乙酯”），主要原因是（答出两点即可），萃取的效率主要取决于。
（3）胡萝卜素粗品的鉴定方法是。

土壤中的细菌数量多、分布广，包括自养细菌和异养细菌。自养细菌能直接利用光能或无机物氧化时所释放的化学能同化CO₂合成有机物（例如硝化细菌），异养细菌从有机物中获得能源和碳源（例如纤维素分解菌），人类根据需要从土壤中分离提纯各种细菌。回答下列相关问题：

（1）对培养基灭菌的方法是。
（2）若要筛选硝化细菌，培养基中不应该加入，从功能上分，该培养基属于培养基。
（3）若要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌，则应该在培养基中加入，观察培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是。
（4）纯化菌种时，为了得到单菌落，常用的接种方法是和。
（5）细菌计数，根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的数目往往比实际数目低，原因是

如图为某同学取1 mL培养液稀释100倍后，用血球计数板(1mm×1mm×0.1mm)通过显微镜观察到的培养液中的酵母菌在血球计数板中的分布情况。下列相关叙述错误的是（）

A . 该培养液中酵母菌的数量为6×10⁵个/mL B . 选择图示乙规格的计数室，含25个中方格、400个小方格 C . 一个血细胞计数板中央仅含有一个计数室 D . 取样时滴管从静置的培养液底部吸取，会导致数据偏大

锈去津是一种含氮的有机化合物，是一种广泛使用的除草剂，且在土壤中不易降解。为修复被其污染的土壤，某研究小组按下图选育能降解锈去津的细菌（目的菌）。已知锈去津在水中溶解度低，含过量锈去津的固体培养基不透明。下列说法错误的是（）

A . 图中A~C均为以锈去津为唯一氮源的选择培养基 B . A~C培养的目的是增加目的菌的数量 C . 本实验用到的固体培养基在接种前是不透明的 D . 周围无透明圈的菌落即为目的菌落

在微生物的培养和分离实验操作中，无菌操作是实验成功的关键，下列不会造成污染的措施是（　　）

A . 用自来水稀释菌液 B . 培养基灭菌后调pH C . 接种时完全打开培养皿盖 D . 在超净台上完成实验操作

植物内生真菌是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的真菌，而宿主植物一般不表现出外在的症状。由于植物内生真菌与宿主在长期的进化过程中形成了特殊的生态关系，因而内生真菌能产生与宿主相同或相似的具有生理活性的代谢产物。研究人员进行了以下实验：

实验材料与试剂：东北红豆杉树皮(红豆杉可产生紫杉醇，紫杉醇是一种良好的抗癌药物)、 80%乙醇、无菌水、葡萄糖、琼脂、青霉素、链霉素、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(简称PDA培养基)等。

实验步骤：

①将PDA培养液均分成3份，编号甲、乙、丙。待高温灭菌后，在甲、乙中都加入青霉素 100mg/L、链霉素200mg/L的混合液20mL。甲、乙、丙都制成平板。

②将东北红豆杉树皮严格按程序消毒处理，剪切成0.25cm²的小块，放入甲平板中。28℃恒温培养3〜15天，定时观察。

③观察到甲平板中组织块边缘有少量菌丝产生时，采用菌丝尖端挑取法将其转入乙平板中培养。经鉴定后最终分离出真菌并保存。

回答下列问题：

（1）从功能上来看，甲、乙中的培养基属于培养基。PDA培养基中的碳源是。
（2）实验中培养基需灭菌，东北红豆杉树皮需消毒，灭菌与消毒的区别是。平板丙的处理应该是。
（3）获得内生真菌后可临时保藏：将菌种接种到上，在合适的温度下培养，观察有菌丝长出后放入4℃冰箱保藏备用。分离红豆杉内生真菌的意义是。

（4）研究人员利用紫杉醇、BOS172722(一种抗肿瘤药物)对乳腺癌细胞进一步展开研究，处理方式和实验结果如表所示：

组别	加入的药物	迫使癌细胞加速分裂以导致细胞凋亡所需的时间	癌细胞存活率
1	空白对照	不凋亡	100%
2	紫杉醇	110分钟	40%
3	BOS172722	52分钟	29%
4	紫杉醇 + BOS172722	15分钟	0

据此推测治疗乳腺癌的最好方式是，依据是。

[生物—选修1：生物技术实践]

世界环境日为每年的6月5日，环境保护和卫生健康是国家重点关注项目，我国正在普遍推行垃圾分类制度，其中易腐垃圾（以厨余垃圾和餐饮垃圾为主）是我国城乡生活垃圾的主要成分。回答下列问题：

（1）为获得能分解易腐垃圾的微生物，应从的环境中处去寻找。
（2）从化学组成上看，厨余垃圾的主要成分包括纤维素、淀粉、脂肪和蛋白质等。为了筛选能同时降解这四种成分的微生物，某兴趣小组提供了如下实验思路：首先，将微生物样品接种在以纤维素为唯一碳源的培养基上，多次接种培养筛选出纤维素分解菌；其次，，筛选出能同时降解纤维素和淀粉的菌种；以此类推，最后筛选获得能同时降解四种成分的
微生物（假设为菌种A）。

① 从功能上划分，该兴趣小组使用的培养基应属于培养基。

② 在筛选纤维素分解菌的过程中，需要在培养基中加入刚果红染料，以便能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选，该方法中刚果红能与培养基中的纤维素形成。在筛选纤维素分解菌时，科研人员通过观察产生透明圈的菌落认为该土壤中存在多种纤维素分解菌，

其依据是。为了进一步确定得到的是纤维素分解菌，还要进行的实验。
（3）若要利用（2）中筛选的菌A就近就地处理厨余垃圾，在确定处理厨余垃圾的方案时，通常需要考虑的因素有（至少答2点）。

下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是（）

A . ①步骤使用的培养基是已经调节过pH并灭菌的培养基 B . ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 C . ③到④的过程中，接种环共灼烧了5次 D . ④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连

	酵母膏	无机盐	淀粉	纤维素粉	琼脂	CR溶液	水
培养基甲	+	+	+	+	﹣	+	+
培养基乙	+	+	+	﹣	+	+	+

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