第2节 微生物的培养技术及应用 知识点题库

（1） 培养基中的营养物质主要有 ． 为了使发酵菌种迅速繁殖，应用培养基．发酵过程中应采用技术来防止外来杂菌的入侵，保证发酵正常进行．

（2） 在胡萝卜素的提取过程中，石油醚是理想的萃取剂，因为它具有：、等优点．萃取过程采用水浴加热，不用明火加热的原因是 ．

（3） 若用胡萝卜的根尖细胞组织培养，则培养成的植株叶片的颜色为 ， 说明根尖细胞 ．

（1） 为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是．制备的培养基常用法进行灭菌．

K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4		琼脂
0.1g	0.5g	3g	0.01g	2g	15g	加至1L

（2） 科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行，用法接种于固体培养基上．接种后的培养基状态放人培养箱．

（3） 选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．

（4） 将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的（填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．

（1） 图甲是利用法进行微生物接种，图乙是利用法进行微生物接种．这两种方法所用的接种工具分别是和；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是和酒精消毒．

（2） 接种操作为什么一定要在火焰附近进行？．

（3） 接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？．

（1） 图甲A所用到的接种工具是．得到图甲B的接种方法是，通过该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目．

（2） 图乙属于血红蛋白提取的步骤，其目的是．

（3） 图丙的操作方法叫作，该装置制作成功的标志是．

（1） 此培养基填“能”或“不能”）用于植物组织培养，理由是．

（2） 培养基中加入尿素的目的是，这种培养基属于培养基．

（3） “目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的和，实验需要振荡培养，原因是．

（4） 图中将细菌转到固体培养基上时，可采用或在含尿素的培养基上接种，获得单菌落后继续筛选．初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成色，则可准确说明该菌种能够分解尿素．

（5） 在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是，需要消毒的是 （填序号）．

①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手

（6） 在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有（填序号）．

①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照

（7） 实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉．

（1） 为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择(硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是。

（2） 纯化菌株时，通常使用的划线工具是。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是（答一点即可）。

（3） 进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有mL的无菌水中；常用法进行活菌计数，其原理是，但统计的菌落数往往（填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是。

（4） 实验数据显示，当培养基中加入碳源葡萄糖时，该细菌降解速率明显提高，原因可能是。

（1） 培养基中加入化合物A的目的是，这种培养基属于培养基。

（2） “目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的。实验需要振荡，培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是。

（3） 在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是。

（4） 某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10^-4、10^-5、10^-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是，此对照实验的目的是。

（5） 有同学将“目的菌”破碎并提取得到该菌蛋白质，之后一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的、以及分子的形状等。而另一位同学则利用凝胶过滤法分离蛋白质（下图），他在操作中加样的正确顺序是。待蛋白质接近色柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是。

（1） 微生物接种方法很多，最常用的是平板划线法和。平板划线时，接种环通过灭菌，在第二次及以后的操作时，总是从上一次的末端开始，这一样做的目的是。

（2） 要从土壤中分离纯化产脂肪酶细菌时，常常需要进行选择培养，目的是，然后再接种并培养，接种时挑取了菌液在3块相同平板上划线，结果其中1块平板的各划线区均未见菌落生长，最可能的原因是。

（3） 为了统计样品中活菌的数目，在细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，则每克土壤样品中的细菌数量个。对菌落数目进行统计时，应选取菌落数日稳定时的记录作为结果，这样做的原因是。

（4） 为长期保存纯化的优质菌种，可以采用的方法。

（1） 同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是，出现图B结果可能的失误操作是。纯化菌株时，还可釆用平板划线法。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有。

（2） 同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3 个平板上分别接入0.1mL稀释液；培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为个。

Ⅱ.贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造，其中风味豆豉深受大众喜爱，远销国内外。风味豆豉的主要工艺流程是：黄豆→洗净浸泡→煮熟→加适量盐→发酵→加入配料→装坛密封→成品。请回答下列问题：

（3） 制作豆豉前期发酵的目的是让霉菌产生相应的酶，如蛋白质转变为小分子肽和氨基酸，脂肪转变为，使豆豉营养更加丰富，有利于健康。发酵过程中需采用人工培养纯净菌种，接种前随机选取若干灭菌后的平板，先培养一段时间目的是。

（4） 豆豉制成成品后，需测定其亚硝酸盐含量，原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成色染料。

（1） 在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是（填序号）。

①酒精灯    ②接种环    ③高压蒸汽灭菌锅    ④培养皿

（2） 将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以为碳源的培养基中，（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。

（3） 将搜集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后，用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为（C÷V）×M，其中C代表。对于需要长期保存的菌种，可以采用的方法。           

（4） 纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明。       

（5） 生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在（“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶 A。一般来说，酶不适合采用法固定化。

（1） 人们利用水果及附着在果皮上的菌，在18～25℃、无氧条件下酿造果酒；在利用醋酸菌在条件下，将酒精转化成醋酸酿得果醋。酿造果醋时，得到了醋酸产率较高的醋酸菌群，为进一步纯化获得优良醋酸菌菌种，采用的接种方法是。

（2） 先酿制果酒再生产果醋的优势有（填编号）。

①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率

②酿制果酒时形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的产率

③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中

（3） 果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果见图。

该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有（填写两种）。据图可知，醋酸发酵的最适初始酒精浓度是；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，此时，若要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有（填写两个方面）。