生物技术在其他方面的应用知识点题库

下列实习、实验常规操作方法正确的是

A . 微生物接种前接种环只要用75％的医用酒精消毒即可 B . 观察二氧化硫对植物的影响所用亚硫酸钠与稀硫酸要用小烧杯分装置于玻璃罩内 C . 提取含杂质较少的DNA时使用体积分数为95％的冷酒精凝集效果较佳 D . 调查人群中的遗传病应选择群体中发病率较高的多基因遗传病

下面关于多聚酶链式反应(PCR)的叙述正确的是

A . PCR过程中需要引物，是为了使DNA双链分开 B . PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步 C . PCR过程中DNA合成方向是3'到5' D . PCR过程中边解旋边复制

关于DNA的复制，下列叙述正确的是（）

A . DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5′端延伸DNA链 B . DNA复制不需要引物 C . 引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合 D . DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸

在蛋白质的提取和分离实验中,下列对样品处理过程中,正确的是（）

A . 洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B . 洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果 C . 洗涤过程选用0.1%的生理盐水 D . 透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质

若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐．加入食盐的目的是（）

A . 利于DNA的溶解 B . 分离DNA和蛋白质 C . 溶解细胞膜 D . 溶解蛋白质

下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（　　）

A . 切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B . PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 C . 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D . 抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达

如图表示PCR扩增某个目的基因的基本过程，有关叙述正确的是（　　）

A . PCR技术的主要原理是DNA复制，解旋酶和DNA聚合酶分别在图中①、③两步中起作用 B . 据图分析PCR操作过程中使用的DNA聚合酶至少要能忍受72℃的高温 C . PCR技术使用的前提是能够利用目的基因的部分序列合成至少1种引物 D . 因为引物不能重复使用，所以在第n轮扩增过程中至少消耗2ⁿ个引物

用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，两种引物及其与模板链的结合位置如下图所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，下列叙述错误的是（）

A . 第一轮复制得到2个DNA分子，即①②各一个 B . 第二轮复制得到4个DMA分子，即①②③④各一个 C . 第三轮复制得到8个DNA分子，其中有2个等长的，也就是有2个X基因 D . 第四轮复制得到16个DNA分子，其中有4个X基因

在DNA粗提取实验中，实验前制备鸡血细胞液时，用吸管除去离心管或沉淀后的试管上层液体的主要原因是上清液（）

A . 不含DNA但含较多蛋白质 B . 含有大量血细胞 C . 上清液的存在不利于细胞的破裂 D . 上清液中有色素影响实验结果

下表中对实验的相关叙述不合理的是（）

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A . A B . B C . C D . D

Bl-2基因是细胞凋亡抑制基因，可以利用PCR技术检测其转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。如图为克隆猪的培育及Bl-2基因转录水平检测流程，下列说法错误的是（）

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A . 图中A细胞表示去核的卵母细胞，B细胞表示体细胞 B . 在早期胚胎发育的不同时期提取的总mRNA是不同的 C . 图中过程X表示反转录，获得的cDNA可用于克隆猪基因组的测序 D . 在PCR过程中，（Bcl-2 cDNA）/cDNA的值反映Bcl-2基因的转录水平

请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答下列问题：

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（1）将实验流程按先后顺序补充完整：、。
（2）凝胶色谱法的基本原理是根据分离蛋白质。
（3）洗涤红细胞的目的是去除,洗涤干净的标志是。为防止血液凝固，在采血容器中通常要预先加入（抗凝剂）。
（4）下图是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品加入过程的示意图,正确的加样顺序是。
（5）在装填色谱柱时不能有气泡存在，因为，降低分离效果。如果，说明色谱柱制作成功。

乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如图。回答下列问题：

（1）筛选产乳糖酶的微生物L时，培养基中的唯一碳源应该是，在实验室培养微生物L时，一方面需要为L提供合适的营养和环境条件，另一方面需要，以获得纯净的培养物。
（2）将微生物L研磨破碎得到提取液后，可采用凝胶色谱法分离纯化其中的乳糖酶分离过程中，比乳糖酶相对分子质量小的蛋白质，在凝胶中的移动速度比乳糖酶（填“快”或“慢”），原因是。
（3）工业生产中，若要将乳糖酶固定化，一般（填“适宜”或“不适宜”）采用包埋法原因是，与使用游离酶相比，工业生产中使用固定化酶的优点是。

图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作示意图，下列有关叙述正确的是（）

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A . 图1、2中加入蒸馏水的目的相同 B . 图1、2中完成过滤之后都保留滤液 C . 图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.014mol/L D . 在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质

基因工程为培育抗病毒植物开辟了新途径。下图为研究人员培育转花叶病毒外壳蛋白基因（CMV—CP基因，长度为740个碱基对）番茄的主要过程示意图。（Kan^r为卡那霉素抗性基因）。请回答：

（1）将CMCP基因导入番茄细胞后，培育的番茄植株具有抗CM感染能力，这种现象属于植物的特异性免疫，该免疫过程中抗原是。
（2）过程①接种的农杆菌细胞中，Kar^r及CMV—CP基因应整合在Ti质粒的T—DNA内部，这是由于。使用液体培养基培养农杆菌的目的是。
（3）过程③、④所需的培养基为（填“固体”或“液体”）培养基。研究发现高浓度的卡那霉素会使番茄的愈伤组织不能生长甚至死亡，③、④培养基中加入适宜浓度Kan的作用为。
（4）过程⑤再生植株抗性鉴定时，引物序列设计的主要依据是，引物序列长度及G+C比例直接影响着PCR过程中（填“变性”或“退火”或“延伸”）的温度。
（5）过程⑤电泳结果如下图所示，其中1号为标准参照，2号为重组Ti质粒的PCR产物，3～6号为抗性植株DNA的PCR产物，可以确定3～6号再生植株中号植株基因组中整合了CMVCP基因。

双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)与脱氧核苷三磷酸(dNTP)的结构如图所示。已知ddNTP按碱基互补配对的方式加到正在复制的子链中后,子链的延伸立即终止。某同学要通过PCR技术获得被³²P标记且以碱基“C”为末端的、不同长度的子链DNA片段。在反应管中已经有单链模板、引物、DNA聚合酶和相应的缓冲液等,还需要加入下列哪些原料?(　　)

①dGTP,dATP,dTTP,dCTP

②dGTP,dATP,dTTP

③α位³²P标记的ddCTP

④γ位³²P标记的ddCTP

A . ①③ B . ①④ C . ②③ D . ②④

某基因的反义基因可抑制该基因的表达。科学家克隆了乙烯生物合成酶的一种基因，并将该基因的反义拷贝插入番茄的基因组中，得到了利于储存的转基因番茄，过程如图所示。回答下列问题：

（1）提取乙烯生物合成酶的mRNA时，宜选用成熟的番茄果实组织，原因是。以mRNA为模板合成DNA所需要的原料是，合成后再将该基因反向连接到质粒上，即得到基因的反义拷贝。
（2）可以通过技术扩增基因的反义拷贝，但前提是需要提供一段已知基因的反义拷贝的核苷酸序列，以便根据这一序列合成。
（3）将重组质粒导入植物细胞的方法除农杆菌转化法外，还有和。图2所示表达载体中卡那霉素抗性基因的作用是。
（4）根据以上信息分析，转基因番茄比野生型番茄更加有利于保鲜和运输，原因是。

我国考古学家利用现代人的 DNA 序列设计并合成了一种类似磁铁的“引子”，成功将极其微量的古人类 DNA 从提取自土壤沉积物中的多种生物的 DNA 中识别并分离出来，用于研究人类起源及进化。下列说法正确的是（）

A . “引子”的彻底水解产物有两种 B . 设计“引子”的 DNA 序列信息只能来自核 DNA C . 设计“引子”前不需要知道古人类的 DNA 序列 D . 土壤沉积物中的古人类双链 DNA 可直接与“引子”结合从而被识别

CBFI基因过量表达能提高拟南芥植株的抗寒性。苜蓿是包草料产业发展的主要草种，低温等逆境胁迫会导致苜蓿减产。科研人员从拟南芥植株中克隆得到冷诱导转录因子（AtCBF₁）基因，通过转基因技术培育抗寒紫花苜蓿，以使苜蓿安全越冬和提高产量。回答不列问题：

（1）在扩增AtCBF₁基因的过程中，先根据设计引物，再进行PCR扩增。扩增时，反应体系的初始温度设置在90~95℃的目的是。PCR过程中需要使用酶。
（2）回收PCR产物并酶切后用将AtCBF₁ 基因连接到T质粒上，以得到T-CBF₁重组质粒。构建T-CBF₁重组质粒时，同时使用BamHI和SacI进行双酶切的目的是。
（3）将目的基因导入受体细胞，培育后筛选转化阳性的植株。若采用分子杂交技术检测转基因紫花苜蓿植株目的基因的转录水平，则需要将片段制成探针。
（4）为进一步研究转基因紫花苜蓿的抗寒机制，还需要进一步开展研究。请完成下列研究技术路线图：。

如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列。

已知的DNA序列为：

设计的一些PCR引物为：①5′- AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′- GCAATGCGTAGCCTCT-3′③5′- AGAGGCTACGCATTGC-3′ ④5′- TCATGAGCGCATAGTT-3′

扩增过程选用的引物是（）

A . ①和④ B . ②和③ C . ②和④ D . ①和③

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