生物技术在其他方面的应用知识点题库

请回答下列有关细胞和分子生物学技术的问题：

（1） DNA粗提取的实验原理是：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在mol/L的NaCl溶液中的最低；鉴定DNA所用的试剂是，沸水浴加热呈色；实验中使用酒精的目的是；实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA，第二次目的是。
（2） PCR技术的中文全称是，在操作过程中需要添加引物，它的化学本质是。反应过程中控制不同温度的意义是不同的： 90℃以上时，双链DNA解聚为单链；50℃左右时，引物与两条单链DNA结合； 72℃左右时延伸，Taq DNA聚合酶有最大活性，使DNA新链沿着方向延伸。

凝胶色谱法是根据（）分离蛋白质的有效方法

A . 分子的大小 B . 相对分子质量的大小 C . 带电荷的多少 D . 溶解度

PCR是聚合酶链式反应的缩写，利用PCR技术可对目的基因进行扩增．请根据下面PCR反应原理示意图回答有关问题：

（1）PCR的原理是．

（2）PCR技术使DNA解链是通过实现的，DNA的这种解链现象在一定的条件下是（填“可逆的”或“不可逆的”）．

（3）DNA解链后冷却的目的是让与相结合．

（4）当温度加热至70～75℃时，是酶把单个脱氧核苷酸，通过键连接到引物上．如此逐渐延伸形成互补链，进而使目的基因加倍．

（5）通过重复循环（3）、（4）、（5）过程，使目的基因以形式扩增．

下列生物学实验操作，不合理的是（）

A . 试管中加入层析液，使液体面高度低于滤液细线 B . 解离的洋葱根尖先用龙胆紫染色，然后进行漂洗 C . 进行大肠杆菌计数前，将浓度较大的培养液梯度稀释 D . DNA粗提取时，通过控制NaCl浓度去除杂质

轮状病毒（RV）是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一，其主要感染小肠上皮细胞，从而造成细胞损伤，引起腹泻。有专家指出物质X可以预防轮状病毒感染。为了验证物质X的作用，研究者计划用新生小白鼠做实验。

实验材料：生长发育状况相同出生3天的健康小白鼠30只（试验前各小鼠粪便轮状病毒检测为阴性），RV （来源于RV流行高峰期腹泻患儿）。（注：给药方式和给药剂量不作具体要求。）

（1）完善实验思路。
①，分别编号为甲、乙、丙。

②，乙组和丙组每只小白鼠注射等量的生理盐水。

③将甲、乙、丙三组小白鼠置于相同且适宜的条件下饲养。一段时间后，，丙组不作处理。

④将甲、乙、丙三组小白鼠置于相同且适宜的条件下饲养。一段时间后，观察并记录小白鼠的患病情况，统计并分析各组小白鼠的患病率。
（2）预测实验结果：用坐标柱状图将实验结果表示出来（注：预测每组的发病情况等，不记个体）。
（3）对轮状病毒进行检测的方法有。

红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成。下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题：

（1）血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有功能。我们选用动物的血液进行实验时加入柠檬酸钠的目的是。
（2）甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是；该操作目的是去除样品中。乙装置中，操作压一定，保证C溶液的流速(快或慢或一定)。
（3）用乙装置分离蛋白质的方法叫。
（4）最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行。
（5）还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质，一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的分子大小、以及分子的形状等。而另一位同学则利用乙图分离，待蛋白质接近色柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是先收集到的蛋白质。

某生物兴趣小组在学习了生物技术实践的相关知识后，欲利用一些实验装置来进行相关实验。请回答下列问题：

（1）该小组欲了解固定化酶与固定化细胞的技术。
①制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是。

②制备固定化酵母细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和溶液中形成凝胶珠。部分同学实验制得的凝胶珠不是圆形或椭圆形，其主要原因是。
（2）该小组欲用甲、乙装置进行血红蛋白的提取和分离：

①为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是。

②甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是；乙装置中，C溶液的作用是。

③自己制作凝胶色谱柱时，在装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是

。

下列实验探究活动中都用到了酒精，有关酒精的作用和体积分数叙述均正确的有几项（）

序号	实验探究名称	酒精
序号	实验探究名称	作用	体积分数
①	绿叶中光合色素的提取和分离	提取绿叶中的色素	100%
②	制作并观察有丝分裂临时装片	漂洗被解离后的根尖	95%
③	检测生物组织中的脂肪	洗去花生子叶薄片上的浮色	50%
④	土壤中小动物类群丰富度的研究	对小动物进行固定和防腐，利于保存	95%
⑤	DNA的粗提取与鉴定	析出DNA	70%

A . 1 B . 2 C . 3 D . 4

生命科学新技术的应用对生物学发展至关重要。下列技术与应用不匹配的是（　　）

A . PCR技术--扩增蛋白质 B . 显微注射技术--培育转基因动物 C . 细胞融合技术--制备单克隆抗体 D . 细胞核移植技术--培育体细胞克隆动物

2020年新型冠状病毒（COVID--19）在全球大爆发，起人体患病毒性肺炎，该病毒为单链RNA病毒。请回答下列问题：

（1）研究表明，RNA酶广泛存在而稳定，RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA的降解。病毒核酸检测是新冠肺炎诊治的关键一步，常采用核酸检测试剂盒（RT-PCR技术——逆转录荧光PCR技术）进行检测。RT-PCR技术首先经酶的作用，以病毒RNA为模板合成，再以其为模板，扩增合成目的片段。不直接用病毒RNA进行核酸检测，而采用RT-PCR技术的原因是。
（2）得到足够量的逆转录病毒DNA之后，可用放射性同位素将其标记作为探针，利用技术，按照原理对待测人员进行核酸检测。如果显示出，即为阳性。
（3） PCR技术中使用的Taq酶是来自于温泉的一种嗜热菌，该菌能在高温环境中生长的特殊本领是由细胞内直接决定的。

利用鸡血进行DNA的粗提取与鉴定，有关叙述错误的是（）

A . 将鸡血离心后取上清液进行实验 B . DNA在0.14 mol·L-1 NaCl溶液中溶解度最大 C . 可用95%的冷酒精进行DNA的纯化 D . 在沸水浴条件下，提纯的DNA直接与二苯胺试剂反应呈蓝色

关于高中生物学实验的基本原理，叙述不正确的是（）

A . 噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统 B . 提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异 C . 成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透（过）性 D . PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应模板

2017年CAR-T疗法获批可用于癌症治疗。其核心是将具有肿瘤识别功能的CAR基因整合到人体T淋巴细胞，形成能准确定位并杀死癌细胞的CAR-T细胞，请回答下列问题：

（1）已知CAR基因的全部序列，科研人员通过法和PCR技术可获得大量该基因片段。在PCR反应体系中除模板外还需加入。
（2）治疗基本过程是：分离患者T细胞并构建CAR-慢病毒运载体→体外基因转移形成CAR-T细胞→筛选、培养CAR-T细胞→输入患者体内，该疗法属于治疗，该运载体进入人体细胞的方式通常是。该方法采用的是自身T细胞，而不用异体T细胞，其原因是。
（3）为检查CAR基因能否在T细胞中翻译成蛋白质，可采用法检测，CAR-T细胞培养基中通常需加入等天然成分，传代培养时，贴满瓶壁的细胞需要用处理后再进行分瓶培养。

以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是（）

A . 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 B . 蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢 C . 红细胞洗涤过程中要加入 5倍体积的蒸馏水，重复洗涤3次 D . 将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的氯化钠溶液中透析12小时

通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是（）

A . 在PCR反应体系中还需要加入4种游离核苷酸、解旋酶、Taq酶等 B . 第2轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因 C . 引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入运载体 D . 第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/2

基因工程中，需要用PCR技术获取大量目的基因，通常是利用质粒作为载体，将目的基因送入细胞中，PCR技术和对质粒的改造是基因工程中重要的技术过程。回答下列相关问题：

（1） PCR过程中加热至90―95℃以后，需要冷却到55―60℃，目的是，在PCR反应体系需要加入引物，加入引物的原因是。
（2）一个DNA分子上有多个基因，现需要获取其中某一个基因作为目的基因，在引物设计时，要将2种引物设计在，此时（酶）只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列。
（3）通常用质粒作为基因工程的载体，作为基因工程载体的质粒需要满足一些条件，现有两种质粒：①质粒容易在物种之间转移，②质粒不能在物种之间转移，应该选择（选编号）作为基因工程的载体。
（4）载体需要在受体细胞内能进行复制，同时能够控制自身复制，阐述控制自身复制的目的是。

普通棉花中含β甘露糖苷酶基因（GhMmaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β甘露糖苷酶催化半纤维素降解.棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如下。请分析回答：

（1）纤维细胞E6启动子基本组成单位为，基因表达载体除了图示组成外，至少还有等（至少答两个），构通的因表达载体的目的是使目的基因稳定存在并且可以遗传在下一代，使目的基因能够。
（2） PCR技术扩增β－甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）原理是，该过程除需要根据设计特异性引物序列处为保证GhMnaA2能插入到质粒2中，还需要在引物的端添加限制酶识别序列。
（3）为什么不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞？。
（4） ③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaI酶和NotI酶切割正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、8.45kb四种长度的DNA片段，则用NotI酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是和。
（5）导入细胞内的反义GhMnaA2能阻止β－甘露糖甘酶合成，使棉纤维更长原理是。

新冠病毒是一种单链RNA病毒，常用“荧光RT-PCR技术”进行检测，方法是取检测者的mRNA在试剂盒中逆转录出cDNA，并大量扩增，同时利用盒中荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA，在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加，可通过荧光强度的变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图（如下图）。请回答下列问题：

（1）题中“荧光RT-PCR技术”所用的试剂盒中应该含有酶、酶、检测者mRNA，、引物，dNTP、缓冲体系。
（2）如果要同时扩增两种基因，则试剂盒中的引物应该有种，引物的作用是。
（3）上图中“平台期”出现的最可能的原因是。理论上，在检测过程中，有荧光标记的“杂交双链”出现，则说明检测结果呈（填“阴”或“阳”）性，但为了保证检测结果的准确性，一般要达到或超过阈值时才确诊。现有甲乙两个待检样本，检测时都出现了上述形态的曲线，但甲的a点比乙的a点明显左移，请给这种结果做出科学合理的解释（试剂盒合格且正常，操作过程规范且准确）：。

新冠病毒引起的疫情仍在一些国家和地区肆虐。新冠病毒为RNA病毒，我国研制出的1针剂新冠疫苗——克威莎已经上市并广泛接种。克威莎是一种重组腺病毒（双链DNA病毒）新冠病毒疫苗。它是以一种腺病毒作为载体，与新冠病毒的S蛋白基因连接后制成的疫苗。接种人体后，疫苗能诱导人体产生强烈的特异性免疫。请回答下列相关问题：

（1）腺病毒的DNA能否直接与S蛋白基因连接？原因是。
（2）腺病毒与S蛋白基因连接后的重组DNA分子的组成中通常包括：复制原点、标记基因、、。
（3） S蛋白在人体细胞中合成的场所是，它能诱导人体产生免疫和免疫。
（4）现在对新冠病毒的检测通常使用病毒核酸检测试剂盒。检测原理是以新冠病毒独特的基因序列为检测靶标进行荧光标记作为探针，再将待测样品通过一定的方式处理，使样品中的核酸序列指数级增加，如果样品中含有新冠病毒，则其核酸可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号。使样品中核酸序列指数级增加的方法被称为技术，该过程需要的酶是，利用的原理是。

图1为几种蛋白质通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后的图谱，图2是利用同一种样品通过凝胶色谱分离得到的结果，下列叙述正确的是（）

A . 相对分子质量最大的蛋白质是图1中的M和图2中的甲 B . 相对分子质量最大的蛋白质是图1中的P和图2中的甲 C . 相对分子质量最大的蛋白质是图1中的P和图2中的丙 D . 相对分子质量最大的蛋白质是图1中的M和图2中的丙

生物技术在其他方面的应用 知识点题库

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