第三节 蛋白质工程 知识点题库

（1） 干扰素的作用机理是：干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活使病毒的RNA水解；有些则可与（细胞器）结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用．

（2） 利用基因工程产生干扰素的方法之一：利用酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起构建基因表达载体，采用的方法导入牛的受精卵细胞中，经胚胎早期培养至期，移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛．

（3） 由于干扰素在体外保存困难，可利用蛋白质工程队干扰素进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的→找到相对应的脱氧核苷酸序列．

（1） 基因工程常见的运载工具（体）有．将目的基因导入酵母细胞，最常用的化学方法是．

（2） 酵母细胞导入AFB1解毒酶基因后，采用技术，检测到AFB1解毒酶基因存在酵母细胞内．实验发现酵母菌中没有检测到合成的AFB1解毒酶，分析原因可能是．

（3） 采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的．

（4） 生态工程需遵循其基本原理，系统整体性原理强调各组分之间要有，只有这样地才能顺利完成能量、物质、信息等的转换和流通，并且实现．

（1） 人体白细胞受到乙肝病毒感染后，将会合成并分泌IFN -α。IFN-α从合成到分泌依次经过的细胞结构是。

（2） IFN-α能够结合到其他被感染细胞细胞膜上的原因是。结合后，病毒的增殖受到抑制的机理是。IFN-α的作用体现了蛋白质具有功能。

（3） 为延长IFN-α的保存时间，可以通过蛋白质工程，对IFN-α进行改造。具体的过程是先设计IFN-α的，推测出应有的氨基酸序列，再找出相应的序列，然后通过基因合成或，最终生产出符合要求的IFN-α。

（1） 科技人员先从“促早蘖”这一功能出发，预期构建出“促早蘖”的结构，再推测出目的基因对应的序列，从而出“促早蘖”基因。

（2） 科技人员为获得大量的“促早蘖”基因，在体外通过对该基因进行了大量扩增。

（3） “促早蘖”基因只有导入水稻细胞的中，才能确保“促早蘖”基因在水稻细胞中得以稳定遗传，科技人员利用农杆菌转化法，将“促早蘖”基因插入中，实现了上述目标。

（4） 在通过基因工程获得“促早蘖”植株后，为了确保育种成功，科研人员不仅要采取技术检测“促早蘖”基因是否导入，还要通过从个体水平加以鉴定。

（1） 利用基因工程制造速效胰岛素过程中，构建的基因表达载体一般包括目的基因、启动子、、标记基因和复制原点，标记基因的作用是。

（2） 为了获得目的基因，可以通过提取分析毒蛋白中的序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列，再用DNA合成仪直接合成。基因工程中需要DNA连接酶，根据酶的来源不同分为两类，其中“缝合”双链DNA片段平末端的是。

（3） 将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内，一般先用处理大肠杆菌使之成为细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于中与该类细胞混合，在一定温度下促进细胞吸收DNA分子完成转化过程。

（4） 经过目的基因的检测和表达，获得Con-Ins GI毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性，导致这种差异的原因可能是。

（1）  科学家已经测出该酶的氨基酸序列，因此可以通过方法来获取目的基因。获得目的基因后，常利用（填写中文名称）在体外将其大量扩增，该技术的应用的原理是。

（2） 构建重组DNA分子（如图所示）最好选用酶和酶同时切，理由是。（答出两点）

（3） 工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，现多采用重组的酵母菌来生产，酵母菌作为受体细胞的优势是。

（4） 研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是。

（1） PCR技术扩增目的基因的前提是，以便根据此前提合成引物，引物的作用是。

（2） RT-PCR是以 mRNA为模板进行的特殊 PCR 技术，过程如图 1，该过程所需要的酶有和。

（3） 一定浓度范围内，模板浓度与 PCR 产物的浓度呈正比。在 RT-PCR过程中加入 TaugMan探针，原理如图 2 所示，Tag Man探针序列对应待扩增的目的基因的序列，在其5'端连接一个报告荧光基团（R），在其3'端连接一个淬灭荧光基因（Q）），探针完整时，报告荧光基团与淬灭荧光基团位置接近，发射的荧光被淬灭剂吸收，荧光强度很低。PCR 过程中 Tag 酶从5'端切断 Tag Man探针，释放荧光基团。根据荧光强度可对PCR 产物进行定量分析，原理是。根据 PCR 产物的浓度又可以估算的浓度，以此代表目的基因在特定组织中的表达量。

（4） 利用 PCR 技术，在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基，就可以在目的基因中带来定点突变，据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质，该过程属于（填工程技术）的范畴。