题目

PCR技术于1985年诞生，应用十分广泛，几乎包括生物技术的各个方面，例如∶分离与扩增目的基因，基因表达的研究，DNA测序以及基因诊断等。回答下列问题 （1） PCR技术扩增目的基因的前提是，以便根据此前提合成引物，引物的作用是。 （2） RT-PCR是以 mRNA为模板进行的特殊 PCR 技术，过程如图 1，该过程所需要的酶有和。 （3） 一定浓度范围内，模板浓度与 PCR 产物的浓度呈正比。在 RT-PCR过程中加入 TaugMan探针，原理如图 2 所示，Tag Man探针序列对应待扩增的目的基因的序列，在其5'端连接一个报告荧光基团（R），在其3'端连接一个淬灭荧光基因（Q）），探针完整时，报告荧光基团与淬灭荧光基团位置接近，发射的荧光被淬灭剂吸收，荧光强度很低。PCR 过程中 Tag 酶从5'端切断 Tag Man探针，释放荧光基团。根据荧光强度可对PCR 产物进行定量分析，原理是。根据 PCR 产物的浓度又可以估算的浓度，以此代表目的基因在特定组织中的表达量。 （4） 利用 PCR 技术，在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基，就可以在目的基因中带来定点突变，据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质，该过程属于（填工程技术）的范畴。 答案： 【1】已知一段目的基因的核苷酸序列【2】使Taq酶能从引物的3端（一端）连接脱氧核苷酸（或为子链的延伸提供起点） 【1】逆转录酶【2】Taq酶（热稳定性DNA聚合酶） 【1】随着PCR循环次数的增加，释放的荧光基团也会越多，荧光就会越强【2】起始模板RNA 【1】蛋白质工程

查看本题答案和解析