基因工程的基本操作程序知识点题库

关于生物工程技术的说法正确的是（）

A . PCR技术扩增人胰岛素基因需要加入从人体内提取的DNA聚合酶 B . 体内受精作用时保证一个精子只能和一个卵细胞受精的机制有透明带反应和卵黄膜封闭作用 C . 检测转基因生物是否具有目的基因控制的性状，用目的基因制作成的探针来检测 D . 体外受精前，需要进行精子获能过程和将卵细胞培养到减数第一次分裂中期

基因工程中，常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是（）

A . 结构简单，操作方便 B . 繁殖速度快 C . 遗传物质含量少 D . 性状稳定，变异少

下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是（）

A . cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因 B . 如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同 C . cDNA文库中的基因都没有启动子 D . 一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种

在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（）

A . 用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B . 用选择培养基筛法导入目的基因的细胞 C . 用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合 D . 用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽

哪是基因表达载体的必需组成部分（）

①启动子　②终止密码子　③标记基因　④目的基因　⑤终止子．

A . ①②③④ B . ①②④⑤ C . ①③④⑤ D . ①②③⑤

请回答以下有关基因工程的问题．

（1）基因工程中切割DNA的工具酶是．DNA连接酶根据其来源不同，分为和
（2）利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便根据这一序列合成
（3）是基因工程的核心步骤．启动子是识别和结合的部位，它能驱动基因转录出mRNA．
（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是
（5）要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的方法是技术．

生长激素是一种由垂体分泌的蛋白质类激素，缺乏生长激素会导致侏儒症．传统制药工业是从猪脑中提取这类激素，产量很低．基因工程以细菌为受体细胞，将人生长激素基因导入其中，细菌增殖并表达产物．示意图如图：

（1） D是．A在基因工程中称为．获得B与C需要酶，过程④需要酶．
（2） C在基因工程中称为．
（3）过程⑦通过细菌的分裂增殖获得大量的工程菌，产物的表达是通过过程完成．

在基因工程技术中，需要用氯化钙处理的步骤是（　　）

A . 目的基因的提取 B . 目的基因与载体结合 C . 将目的基因导入受体细胞 D . 目的基因的检测与表达

正确表示基因操作“四步曲”的是(　　)

A . 提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因与运载体结合→目的基因的检测与鉴定 B . 目的基因的检测与鉴定→提取目的基因→目的基因与运载体结合→将目的基因导入受体细胞 C . 提取目的基因→目的基因与运载体结合→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 D . 目的基因与运载体结合→提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定

下列实践与基因工程无关的是( )

A . 利用DNA探针检测饮用水是否含病毒 B . 将一种植物的叶绿体移入另一种植物以提高光合作用效率 C . 选择“工程菌”来生产胰岛素 D . 培育转基因抗虫棉

研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是（）

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A . 构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶 B . 使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组 C . 能在添加四环素的培养基上生存一定是含有重组质粒的大肠杆菌 D . 利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙

基因组文库和cDNA文库区别相比，基因组文库所含基因（）

A . 种类较多 B . 无内含子 C . 无启动子 D . 在不同物种间不能交流

我国科学家利用Bt毒蛋白基因培育出转基因抗虫棉。检测目的基因的探针是（）

A . 标记的含有Bt毒蛋白基因的DNA片段 B . Bt毒蛋白的特异性抗体 C . 标记的Bt毒蛋白的特异性抗体 D . 含有Bt毒蛋白基因的DNA片段

在基因工程的操作过程中，下列叙述正确的是（　　）

A . 限制性核酸内切酶只能用于切割目的基因 B . DNA 连接酶一般作用于碱基对之间的氢键 C . 质粒可存在于细菌和酵母菌等生物的细胞中 D . 目的基因成功导入受体细胞后一定能表达

【生物一选修3:现代生物科技专题】

科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组，得到的重组质粒导入牛的受精卵，使其发育为转基因牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和3个限制酶切点（如图2）。将重组质粒导入大肠杆菌，并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。

（1）图1中的mRNA是从人体的细胞中获取，过程①需要的酶是。
（2）获得的目的基因通常还需要PCR技术扩增，制备PCR反应体系时，需向缓冲溶液中分别加入目的基因模板、4种脱氧核苷酸及等，最后补足H₂O。
（3）重组质粒的构建，是基因工程的核心。一个重组质粒的组成，除了目的基因和标记基因外还必须有。
（4）重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌，通过含抗生素的培养基进行培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断，如图3所示：
如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落、而不能在培养基B上生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的中。（切点1、切点2、切点3 ）
（5）筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，经多代培养后，仍能从大肠杆菌中提取出人的生长激素基因。据此判断，你认为人的生长激素基因是否已在大肠杆菌中成功转化？请说明你的观点及理由：。
（6）将重组质粒导入牛的受精卵所用的方法是。

下图为利用大肠杆菌重组表达系统生产HPV疫苗的过程，质粒中lacZ基因可使细菌利用培养基中的物质X-gal，从而使菌落呈蓝色，若无该基因，则菌落呈白色。下列有关叙述错误的是（　　）

A . 过程①最好选用限制酶BamHI和EcoRI B . 过程②需要先用Ca²⁺处理大肠杆菌细胞 C . 筛选含重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入X-gal和青霉素 D . 在选择培养基上筛选出含重组质粒的大肠杆菌，应挑选蓝色菌落

型冠状病毒是一种RNA病毒，会导致人患严重的肺炎。目前官方已宣布完成了相关基因序列合成，重组质粒构建和工程菌筛选工作，并且研制的新型冠状病毒疫苗已投入生产和使用，请联系基因工程的相关知识，回答下列问题。

（1）新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与宿主表面ACE2蛋白结合完成感染，在研制疫苗时需要先找到新冠病毒上S蛋白的基因（下图中的黑色部分），具体做法为，然后把微生物当作培养基，生产出我们需要的S蛋白，之后做成疫苗。为了获取大量S蛋白的目的基因，我们需要进行PCR扩增，该技术需要dNTP、酶以及引物（从下图中①②③④中选择）等，扩增四轮需要引物的数量为个。为了保证扩增的目的基因和表达载体能连接，PCR扩增时，应在基因上、下游引物的5’端分别添加相应的酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点，主要目的是。
（2）研究中将改造后的腺病毒作为运载目的基因的载体，目的基因与腺病毒构建重组腺病毒载体必须包括：新型冠状病毒S蛋白基因及其用启动子（至少答出两点）等。设置该步骤的目的是。
（3）重组腺病毒载体侵染宿主细胞后，利用宿主细胞翻译出，引发机体免疫反应，产生可用于治疗的抗体。在转录过程中，识别其启动子的酶是。
A．病毒的DNA聚合酶B．宿主的DNA聚合酶

C．病毒的RNA聚合酶D．宿主的RNA聚合酶

在下列基因工程操作的四个基本步骤中，不需要进行碱基互补配对的步骤是（　　）

A . 人工合成目的基因 B . 将目的基因导入受体细胞 C . 目的基因与运载体结合 D . 目的基因的检测和表达

自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。

下列相关叙述错误的是（）

A . 上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因 B . 将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeI和BamHI C . sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的 D . 农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上

阅读下列材料，完成下面小题

材料1：新冠肺炎的病原体是2019-nCoV"病毒，该病毒为有包膜RNA病毒，具有RNA聚合酶基因，无逆转录酶基因。新冠病毒借助其表面的S蛋白（刺突蛋白）与人体黏膜细胞表面的ACE2受体结合而进入细胞。目前病毒出现了传染性更强的德尔塔、奥密克戎等变异株。

材料2：疫苗接种和重点人群应检尽检是阻断病毒传播的有力措施。目前病毒的检测方法有：①核酸检测：以病毒的基因序列为检测对象，通过PCR扩增，水解荧光标记探针产生荧光；②抗原检测：检测病毒表面的特异性糖蛋白；③抗体检测：检测感染者体内是否存在特异性抗体。

（1）下列有关新冠病毒叙述正确的是（　　）

A . 病毒变异株中发生基因突变可产生新的等位基因 B . 奥密克戎病毒进入宿主细胞需要载体蛋白和能量 C . S刺突蛋白与ACE2受体结合体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能 D . 德尔塔毒株和奥密克戎毒株的传染性增强是病毒与宿主相互选择的结果
（2）下列有关病毒的检测的说法错误的是（　　）

A . 方法①②③都需要从患者体内采集病毒样本 B . 方法②③都需要用到抗原–抗体杂交的方法 C . 某人有可能①②为阳性③为阴性，也可能③为阳性①②为阴性 D . 采用①方法时，需要用到引物、探针、逆转录酶、Taq酶、dNTP等
（3）小韬同学自愿接种新冠疫苗加强针，下列说法正确的是（　　）

A . 注射疫苗时，针头刺入的部位是静脉血管 B . 注射疫苗时，小韬能够忍住刺痛感保持手臂不动，属于简单反射 C . 注射疫苗前，小韬因紧张心跳加快，与肾上腺素分泌增加有关 D . 注射疫苗后，机体产生的抗体由浆细胞分泌，与T细胞无关

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