尿素分解菌的分离与计数知识点题库

在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是

A . 加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为选择培养基 B . 加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基 C . 加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基 D . 加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基

对分解尿素细菌的初步筛选中，加入酚红指示剂的目的是（）

A . 指示剂变蓝能认定该菌能分解尿素 B . 对菌种进一步鉴定 C . 筛选分解尿素的细菌 D . 培养基中缺乏酚红作营养物质

细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖．下列与此有关的说法正确的是( )

A . 乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的 B . 氮源不可能作为细菌的能源物质 C . 琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质 D . 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌

生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄·7H₂O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4 g	2.1 g	0.2 g	10 g	1 g	15 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，调pH为7.2

（1）分解尿素的细菌能分泌酶，能将尿素分解成。
（2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自和。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是。
（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。
（4） A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是。

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄•7H₂O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4 g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？（能/不能），原因是．
（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的就能大约推测出样品中活菌数．
（3）接种前要对培养基进行处理．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行．
（4）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是，应当怎样操作才可避免此种现象？．
（5）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是，应该保持　（至少答两项）等不变．

尿素是一种高浓度氮肥用长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH₂pO₄	Na₂HPO₄	MgS0₄·7H₂O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	l.0g	10.0g	l.0g	15.0g

（1）根锯培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌(能/不能），原因是，不能选择出只分解以尿素为氮源的微生物。
（2）接种前要对培养基进行。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。
（3）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是，应当怎样操作才可避免此种现象？。
（4）获取分解尿素的细菌后，如要临时保存，可将其接种在培养基上，等长成
菌落后放在4℃的冰箱中保存。若要长期保存，可以采用的方法。

对尿素分解菌进行初步鉴定，可在培养基中加入（）

A . 重铬酸钾 B . 酚红指示剂 C . CR D . 结晶紫

下列有关实验的描述中，正确的是（）

A . 平板划线法容易获得单菌落和计数活菌数目 B . 土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上可筛选出能分解尿素的细菌 C . 在植物组织培养生芽时，培养基通常应含较多的α﹣萘乙酸等生长素类调节剂 D . 在探究生物体维持pH稳定的机制实验中，用缓冲液和自来水作为对照，盐酸的浓度属于无关变量

如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（　　）

A . 在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH值后高压蒸汽灭菌 B . 步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落 C . 步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素 D . 步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力

分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　)

①加尿素　②不加尿素　③加琼脂糖　④不加琼脂糖⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐

A . ①③⑤⑦ B . ②④⑥⑧ C . ①③⑤⑧ D . ①④⑥⑦

幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：

配制培养基―→灭菌、倒平板―→X―→培养―→观察

请回答：

（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现色环带。
（2）下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

A . 高压蒸汽 B . 紫外灯照射 C . 70%酒精浸泡 D . 过滤
（3）步骤X表示。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液到培养基平面上。菌液稀释的目的是获得个菌落。
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在中。若不倒置培养，将导致。
（5）临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的分解为NH₃和¹⁴CO₂。

请选出下列正确的操作步骤（）

①土壤取样 ②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中

③吸取0.1mL进行平板涂布 ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵稀释度

A .

B .

C .

D .

将相同的大肠杆菌样液分别接种于成分不同的三种培养基中，36小时后统计菌落数，结果如下表。下列叙述不正确的是（）

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A . 葡糖糖是培养基中的碳源也是能源 B . 配置培养基过程中应先灭菌后倒平板 C . Ⅰ和Ⅱ对照，说明生长因子不利于大肠杆菌的生长 D . Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类

微生物培养过程中，需通过选择培养或鉴别培养来筛选目标菌株。下列相关叙述不正确的是（）

A . 能够在选择培养基上生长出来的菌落一定是目标菌株 B . 培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株 C . 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，使酚红指示剂变红 D . 纤维素分解菌能够分解纤维素，菌落周围出现透明圈

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中的活菌数目，培养基配方如下表，将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成培养基备用。具体操作步骤及结果如下图。回答相关问题：

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO4·7H₂O	蛋白胨	葡萄糖	尿素
1.4g	2.1 g	0.2 g	1.0g	10.0g	1.0g

（1）评价一下该培养基配方设计是否合理？说明理由。。
（2）不同微生物生长所需的pH是不同的，在配制培养基时，pH的调节应在灭菌（填“前”或“后”）。
（3）根据图示，5号试管的土壤样品稀释了倍，采用法接种，根据图示结果估算每克土壤中的菌株数为个。实际活菌数目比该实验方法统计得到的结果往往会，原因是。
（4）对分解尿素的细菌进行初步筛选，只是分离纯化菌种的第一步，如何借助生物化学方法，进一步鉴定筛选出的菌种是否为尿素分解菌？。

[生物——选修1：生物技术实践]

产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：

（1）常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是（填编号）。

编号	①	②	③	④
物品	培养基	接种环	培养皿	涂布器
灭菌方法	高压蒸汽	火焰灼烧	干热	臭氧

（2）称取1.0 g某土壤样品，转入99 mL无菌水中，制备成菌悬液，经后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1 mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌个。
（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。
（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如下图。据图分析，应选择菌株进行后续相关研究，理由是。

某同学将1 mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是(　　)

A . 可得出土壤样液中活菌大约为5.7×10⁷个/L B . 此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低 C . 一般选择菌落数为30～300的平板进行计数 D . 显微镜直接计数法统计的是稀释液中的活菌数

如表所示甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方，图丙所示为相关分离过程，回答下列问题：

KH₂PO₄	1.4 g	纤维素粉	5.0 g
Na₂HPO₄	2.1 g	NaNO₃	1.0 g
MgSO₄·7H₂O	0.2 g	Na₂HPO₄	1.2 g
葡萄糖	10.0 g	KH₂PO₄	0.9 g
尿素	1.0 g	MgSO₄·7H₂O	0.5 g
琼脂	15.0 g	KCl	0.5 g
		酵母膏	0.5 g
		水解酪素	0.5 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000 mL
甲		乙

注：水解酪素，即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到。

（1）从功能上看，甲培养基属于。从物理性质上看，甲培养基属于。其中提供氮源的物质是。
（2）如果将乙培养基配制成固体培养基，则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤维素？。如果培养基中加入可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株，同时透明圈越(填“大”或“小”)，表示该菌分解纤维素的能力越强。
（3）为了计数微生物的数量，图丙采用法进行接种培养计数，除此之外，还可以采用法进行计数。其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方法所得结果(填“大”或“小”)。
（4）用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目(填“少”或“多”)，原因是。
（5）一位同学利用图丙的方法步骤在4个平板培养基上分别接种0.1 mL土壤稀释液④，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则1 mL原土壤样液①中微生物数量约为。

从某污水处理系统中分离出多种细菌，经进一步筛选获得具有高效降低污水中有机污染物（COD为有机污染物分解时化学需氧量）能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是（）

A . 牛肉膏蛋白胨培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌 B . 为确定接种时菌液的最佳稀释倍数，可先初选一个较宽的范围，分别涂布培养后，从中选择菌落数在30~300的平板计数 C . 图中平板划线法获得的菌落具有不同的菌落特征 D . 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是扩大化培养菌株

尿素 $\text{[math]}$ 含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用，某科研小组为了将土壤中分解尿素的细菌纯化培养，进行了如下操作，请回答相关问题：

成分	$\text{[math]}$	$\text{[math]}$	$\text{[math]}$	葡萄糖	尿素	琼脂
含量（g）	1.4	2.1	0.2	10.0	1.0	15.0
操作	将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000毫升

（1）上表是尿素分解菌的选择培养基配方，选择培养基是指。本实验中有两组对照，一组是未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板，另一组是已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板。前一组的平板上如果，可以说明培养基在使用前未被杂菌污染；后一组的平板上如果，可以说明选择培养基具有选择作用。
（2）图中图2所示方法接种工具至少需灼烧灭菌次。
（3）将5g土壤溶于45mL无菌水，再稀释 $\text{[math]}$ 倍，按图[]（填数字及名称）接种方式将0.1mL样品接种到3个培养基上，统计菌落数目为134、131、137，据此可得出每克土壤中的纤维素分解菌活菌数约为个。若某同学利用相同样品进行接种，只统计出34个菌落，出现该结果的原因是。
（4）分解尿素的细菌能合成，催化尿素分解产生的 $\text{[math]}$ 可以作为细菌生长的氮源。如果培养基中加入了酚红指示剂，尿素分解的产物 $\text{[math]}$ 会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，根据功能划分该培养基属于培养基。土壤中的某些固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源（如圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为 $\text{[math]}$ ），请设计实验进一步确定平板上分离得到的细菌是否是固氮菌。（写出简要思路、预期结果和结论）

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