尿素分解菌的分离与计数知识点题库

根瘤菌是一种固氮微生物，其生物学特征之一是( )

A . 在土壤中独立生活时能够固氮 B . 需氧的异养细菌 C . 所需能量由自身的线粒体提供 D . 单细胞真核生物

下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）

A . KH₂PO₄、Na₂HP0₄、MgS0₄•7H₂0、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B . KH₂PO₄、Na₂HP0₄、MgS0₄•7H₂0、葡萄糖、琼脂、水 C . KH₂PO₄、Na₂HP0₄、MgS0₄•7H₂0、尿素、琼脂、水 D . KH₂PO₄、Na₂HP0₄、MgS0₄•7H₂0、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

自然界中的微生物往往是混杂生长的．人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定．下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题．

（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用的培养基进行分离，这种培养基属于培养基（按功能分类）．也可在培养基中加入指示剂对该类微生物鉴别．
（2）若取土样5g，应加入 mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成10¹～10⁷不同浓度的土壤溶液．将10³～10⁷倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板．这种接种方法称为．
（3）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如表，其中倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为．这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目（低/高）．
稀释倍数
10³
10⁴
10⁵
10⁶
10⁷
平均菌落数（个）
＞500
367
248
26
15
（4）实验分离得到的能够分解尿素的细菌需要临时保藏，需将其接种到试管的培养基上，将试管放入的冰箱中保藏．

如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图．据图分析正确的是（）

A . 3号试管中的菌落稀释倍数为10³倍 B . 4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号的10倍 C . 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁹个 D . 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高

下列说法正确的是（）

A . 果酒自然发酵时，应将葡萄反复冲洗干净 B . 实验室常用尿素作为唯一氮源的培养基来筛选土壤中的纤维素菌 C . 月季花药培养时常采摘未完全开放的花蕾作为材料 D . 胡萝卜素提取实验常采用水浴加热

下列有关生物技术的说法，正确的是（）

A . pH、温度、光照条件是影响植物组织培养的主要环境因素 B . 在探究不同pH对果胶酶活性的影响实验中，应该用0.1%盐酸调节pH，不能用NaOH C . 萃取法提取胡萝卜素时，冷凝装置的使用是为了防止温度过高引起爆炸 D . 从土壤中分离出能分解尿素的细菌，应采用无氮源的培养基

以下关于分解尿素的细菌的说法，正确的是（）

A . 能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶 B . 以尿素作为唯一的碳源 C . 环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性 D . 以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红

分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（）

选项	尿素	琼脂糖	葡萄糖	硝酸盐
A	+	+	+	+
B	﹣	﹣	﹣	﹣
C	+	+	+	﹣
D	+	﹣	﹣	+

注：“+”表示加入，“﹣”表示不加．

A . A B . B C . C D . D

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如表所示，实验步骤如图所示．请分析回答．

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄•7H₂O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL．

（1）此培养基填“能”或“不能”）用于植物组织培养，理由是．
（2）培养基中加入尿素的目的是，这种培养基属于培养基．
（3） “目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的和，实验需要振荡培养，原因是．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，可采用或在含尿素的培养基上接种，获得单菌落后继续筛选．初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成色，则可准确说明该菌种能够分解尿素．
（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是，需要消毒的是（填序号）．
①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手
（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有（填序号）．
①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉．

分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（）

选项	尿素	琼脂	葡萄糖	硝酸盐
A	+	+	+	+
B	+	+	+	-
C	+	-	-	-
D	+	-	-	+

[注]“+”表示加入，“-”表示不加。

A . A B . B C . C D . D

如图示从土壤中筛选出能产生脲酶的微生物并予以纯化的基本操作流程。如果在平板中加入酚红指示剂，那么目的菌落周围将出现（）

图片_x0020_100009

A . 红圈 B . 紫圈 C . 蓝圈 D . 透明圈

小明欲从土壤中分离尿素分解菌，请回答下列问题：

（1）土壤中的有些细菌能分解尿素，是因为其能合成。
（2）选取土样后进行一系列稀释，吸取0.1 mL的10⁶倍稀释的菌液在灭菌板上进行接种，采用该种接种方法的目的是。该实验过程中，还设置了一个空白平板，空白平板可起作用。实验结果显示：平板上的菌落数为123、119、130，则每毫升土样溶液中的活菌数为个。
（3）其他同学认为小明的实验结果偏大，可能原因是操作出现错误。为了排除其他同学的质疑，你给小明的建议是。
（4）为了鉴定分离出来的菌种是否为尿素分解菌，需要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，根据颜色是否变来鉴定。

下列有关微生物培养的叙述，错误的是（）

A . 稀释涂布平板法能获得单菌落，可以用于计数活菌数目 B . 在对微生物进行培养前，需要对接种工具和培养物进行灭菌 C . 酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有一定的抑制作用 D . 分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的碳源

【生物技术实践】

现有两份培养基的营养构成如下表:

编号	成分
A	KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水
B	牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水

回答下列相关问题

（1）各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，从细胞中元素组成的角度考虑，阐述为什么大多数培养基需要提供氮源。B培养基中氮源是；A培养基只有能合成的细菌才能在该培养基上生长，因此该培养基属于选择培养基；从同化作用类型看，用A培养基培养的细菌属于。
（2） B培养基可以培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑、和滲透压等条件。在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行(消毒、灭菌）。
（3）培养大肠杄菌时，在接种前需要检測培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。
（4）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。

下表为两种微生物的培养基配方

A组

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄·7H₂O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4 g	2.1 g	0.2 g	10.0 g	1.0 g	15.0 g

B组

纤维

素粉

NaNO₃

Na₂HPO₄·7H₂O

KH₂PO₄

MgSO₄·7H₂O

KCl

酵母膏

水解

酪素

5 g

1 g

1.2 g

0.9 g

0.5 g

上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000 mL

（1）如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择上述哪种培养基?，该培养基中的碳源主要是，能分离尿素分解菌的原因是配置培养基配方的特点是。
（2）在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现。
（3）从功能上来看，上述两种培养基均属于培养基；从物理性质来看，A属于培养基。

某些土壤细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃ ，供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌分离和计数的相关叙述，正确的是（）

A . 分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO₂作为碳源的 B . 倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C . 培养基中KH₂PO₄等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定 D . 若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板

脲酶其活性位点上含有两个镍离子。在大豆、刀豆种子中脲酶含量较高，土壤中的某些细菌也能够分泌脲酶。实验室从土壤中分离得到了能够分解尿素的细菌M，并分别研究了培养液中的Ni²⁺、Mn²⁺和尿素浓度对细菌M脲酶产量的影响（说明：研究某一项时其他条件相同且适宜），结果如下表。下列说法正确的是（）

第一组	Ni²⁺浓度（%）	0	0.0005	0.001	0.005	0.01	0.05
第一组	脲酶产量μ/moL	0.02	0.056	0.067	0.28	0.36	0.08
第二组	Mn²⁺浓度（%）	0	0.0005	0.001	0.005	0.01	0.05
第二组	脲酶产量μ/moL	0.031	0.21	0.28	0.31	0.37	0.085
第三组	尿素浓度（%）	0	0.2	0.4	0.6	0.8	1.0
第三组	脲酶产量μ/moL	0	1.15	1.60	1.73	1.45	0.28

A . 细菌M合成脲酶需要尿素，且尿素的最适浓度为0.6% B . 实验不能体现培养液中Ni²⁺和Mn²⁺对脲酶的影响具有两重性 C . 所有脲酶都在核糖体上合成且在内质网上加工使其与镍结合才具有活性 D . 本实验遵循了对照性原则，但没有遵循单一变量原则

下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（）

A . 分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氮气 B . 将实验组和对照组平板倒置，25℃恒温培养24～48小时 C . 统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在300以上的平板进行计数 D . 用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K₂HPO₄	指示剂	琼脂
含量（g）	10.0	5.0	5.0	2.0	0.2	12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL

（1）若根据用途划分，该培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？，并用作为指示剂。
（2）在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行；操作者的双手需要进行清洗和。
（3）图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是：和，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的。
（4）以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有____。（多选）

A . 由果酒制作果醋 B . 制作果酒 C . 制作泡菜 D . 制作腐乳

如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（）

A . 3号试管的稀释倍数为10³倍 B . 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁹个 C . 4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数约为5号试管的10倍 D . 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低

稀释倍数	10³	10⁴	10⁵	10⁶	10⁷
平均菌落数（个）	＞500	367	248	26	15

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