微生物的分离和培养知识点题库

请回答下列有关生物技术方面的问题。

（1）果酒是人们喜爱的健康饮品。果酒是酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵而产生的，其反应式为；酒精的产生与否可用来进行检测。
（2）牛肉膏蛋白胨培养基是微生物培养中常用的培养基，其中的蛋白胨为微生物的生长提供了等营养物质。人类饮用水的安全与人体健康关系密切，欲将所取的南河水样品进行大肠杆菌的分离与计数，可用法来完成。在用平板划线法接种时，在第二次及以后的划线操作时，总是从开始划线，原因是。
（3）植物组织培养基同样需要防止杂菌污染，为检验制备的培养基是否感染杂菌，可采取的方法是将的培养基在适宜条件下培养，观察有无菌落生长

分解石油的超级菌是指（）

A . 自然突变产生的一种能分解多种烃类的假单孢杆菌 B . 人工诱变产生的一种能分解多种烃类的假单孢杆菌 C . 科学家采用转基因手段创造出能分解某种烃类的假单孢杆菌 D . 科学家采用转基因手段创造出的同时分解四种烃类的假单孢杆菌

茶饮料主打“健康牌”，极少添加人工合成的色素、香精等添加剂，更多利用从植物中提取的天然成分．请回答：

（1）红茶菌液是一种传统的活菌饮料，由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同发酵产生．纯化菌种时，在固体培养基上常用法接种菌种．在接种活菌前，将红茶糖液煮沸后冷却，煮沸的目的是

（2）茶饮料所用的胡萝卜素，通常采用法从胡萝卜中提取；提取后常用法对提取物中的胡萝卜素进行鉴定．

（3）茶饮料所用的植物芳香油的提取流程如下：茉莉花+水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→加无水硫酸钠→过滤→茉莉油过程A表示，向粗提精油中加入无水硫酸钠的目的是

（4）从茶叶中分离提取某种氧化酶，常采用法，其原理是蛋白质分子的大小、形状和所带的不同，会产生不同的迁移速度．

下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，正确的是（）

A . 操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 B . 将称好的牛肉膏用玻璃棒从称量纸上挑取放入烧杯 C . 待培养基冷却至40℃左右时进行倒平板 D . 培养基倒入培养皿后，立即将平板倒过来放置

在稀释涂布平板法对微生物进行计数时的错误操作是（）

A . 将1mL样品稀释10倍，需加入10mL无菌水 B . 吸取菌液的移液管需要干热灭菌避免杂菌污染 C . 将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃 D . 每一个稀释度涂布多个平板，计算各组平均值

请回答下列关于果酒、果醋制作的系列问题：

（1）家庭制作葡萄酒时，不需要进行灭菌处理的原因是：在的发酵液中，绝大多数的其他微生物都无法正常生活，但酵母菌可以生长、繁殖．也不需要接种的操作，发酵液中的酵母菌来自．
（2）果醋制作时，有氧条件下，醋酸菌可以将或转变成醋酸．
下面是三位同学的土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验．
①甲同学在最大稀释倍数下涂布了一个平板，统计的菌落数为230．
②乙同学在最大稀释倍数下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为21，212，256．
③丙同学在最大稀释倍数下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为231，212，256．
（3）哪位同学的结果更接近真实值？．另外两位同学的实验需要如何改进？，．

如图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题．

（1）图甲是利用法进行微生物接种，图乙是利用法进行微生物接种．这两种方法所用的接种工具分别是和；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是和酒精消毒．
（2）接种操作为什么一定要在火焰附近进行？．
（3）接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？．

如表为两种微生物的培养基配方：

A组

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄•7H₂O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

B组

纤维素粉

NaNO₃

Na₂HPO₄•7H₂O

KH₂PO₄

MgSO₄•7H₂O

KCl

酵母膏

水解

酪素

1.2g

0.9g

0.5g

注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1 000mL．

（1）从功能上来看，上述两种培养基均属于培养基．
（2）如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择培养基（填“A”或“B”），该培养基中的碳源是．另一组培养基能够分离何种微生物．
（3）在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入指示剂，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现．鉴定某种微生物能够分解纤维素，用法．

有关平板划线操作的叙述正确的有（　　）

A . 第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B . 每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种 C . 在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D . 划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者

有机化工原料氯苯不易降解，会污染环境，现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物。回答问题：

（1）为了获得能降解氯苯的微生物菌种，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以为唯一碳源的培养液进行选择培养。除含有碳源外，培养液还应含有、无机盐和蒸馏水等。
（2）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种到1L含20mg氯苯的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时，则应选择微生物乙作为菌种进行后续培养，理由是。
（3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用直接计数，也可选用法统计活菌数目，一般前者得到结果（填">"“=”或”<“）后者。
（4）制备固体培养基的基本步骤是：计算→称量→→灭菌→。
（5）接种时要对接种环进行灼烧，目的是。

漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有若广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（）

A . 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B . 筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C . 在涂布平板上通过划线获得单菌落 D . 斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株

人们将蔗糖、奶粉和经蛋白酶水解后的玉米胚芽液按适当比例混合后，经乳酸菌发酵可生产新型酸奶。下列相关叙述错误的是（）

A . 蔗糖消耗量与乳酸生成量呈正相关 B . 乳酸菌是一种异养厌氧型的细菌 C . 酸奶出现明显气泡说明有杂菌污染 D . 只有奶粉为乳酸菌发酵提供氮源

下列有关菌种保藏的叙述中，错误的是（）

A . 频繁使用的菌种，可用斜面基保藏在4℃的冰箱中 B . 临时保藏菌种的培养基不需要定期更换 C . 长期保藏的菌种，需要降低代谢和变异发生概率 D . 长期保藏菌种时，各取1mL灭菌甘油和培养菌液混匀后保存在-20℃冷冻箱中

细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列与此有关的说法正确的是( )

A . 乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的 B . 无机氮源不可能作为细菌的能源物质 C . 琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质 D . 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌

关于MS培养基与微生物培养基的配方相比不同之处，说法错误的是（）

A . MS培养基中常常添加植物激素，微生物培养基中不需要 B . MS培养基中的碳源和能源是蔗糖，微生物培养基中的碳源和能源主要是葡萄糖 C . MS培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素 D . MS培养基中不需加维生素，微生物培养基中要加维生素作生长因子

药物敏感试验简称药敏试验，旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感程度，以指导临床合理选用抗生素。纸片扩散法（Kirby-Bauer test）是药敏试验一种常用的方法，它将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。

（平板的制备）

（1）关于药敏试验所用的琼脂平板制备过程，正确的顺序是_______

A . 称量、溶解、定容、调pH、倒平板、灭菌 B . 称量、溶解、调pH、定容、倒平板、灭菌 C . 称量、溶解、定容、调pH、灭菌、倒平板 D . 称量、溶解、调pH、定容、灭菌、倒平板
（2）培养基的灭菌条件应该设定为__________

A . 0.05kg/cm² ， 62℃，15~30min B . 0.05kg/cm² ， 121℃，15~30min C . 1.05kg/cm² ， 62℃，15~30min D . 1.05kg/cm² ， 121℃，15~30min （测试菌接种）
（3）若使用纸片扩散法进行药敏试验，在平板制备及测试菌接种环节，无需使用的工具是

（抑菌圈观察）

某研究小组将含有相同浓度抗生素I~IV的四个纸片分别贴放在生长有测试菌的琼脂平板上，在合适的温度条件下孵育16h，结果如图所示：
（4） MIC是药敏试验中评价抗生素药效的常用指标，其定义为某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。根据上图的试验结果可知，对于该试验所用测试菌而言，抗生素I的MIC（选填“大于”“小于”或“等于”）抗生素III的MIC。
（5）在相关试验操作均严谨规范的情况下，在含有抗生素IV的纸片周围出现了较大的抑菌圈，抑菌圈中存在有若干个测试菌的菌落。试对上述现象的成因作出分析：

将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。有人认为盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组针对上述说法进行探究，他们将盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是（）

A . 培养基可不加碳源是因为接种的浸出液中含糖 B . 可采用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种 C . 只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照 D . 培养一段时间后应统计培养基上的菌落的种类和数量

下列关于微生物培养和利用的叙述，正确的是（　　）

A . 获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌的入侵 B . 临时保藏菌种可以将菌种接到固体斜面培养基上，一般在 4℃的冰箱中保藏 C . 消毒和灭菌都是为了给微生物的培养提供无菌条件，所以二者没有差别 D . 细菌数目可以通过稀释涂布平板法和滤膜法来测定，通过培养基上的菌落来计数

“白色污染”对环境的危害非常大，找到能降解白色垃圾——塑料（主要是聚乙烯、聚丙烯）的微生物，将有助于解决这一问题。回答下列问题∶

（1）科研人员从废弃塑料比较多的垃圾填埋场的土壤中分离微生物，这样做的理由是。取10g土样，加入90mL无菌水稀释，涂布到以塑料为唯一碳源的培养基上，适宜条件下的无菌环境中培养，结果发现培养基上布满菌落，无法得到单一的菌落，再次培养时应采取的措施是。改进措施后，获得了两种微生物———绿脓杆菌和甲氰菊酯降解菌，在培养基上是通过来区分两种微生物的。
（2）科研人员欲研究绿脓杆菌和甲氰菊酯降解菌在降解塑料时的效果，对照组应设置为，实验组应设置为，分解效果可以通过测定来表示。

银杏是我国特有珍贵的古老树种，被称为“活化石”。秋天金黄色的银杏叶既是一道美丽的风景，也有极高的药用价值。其中的黄酮类化合物具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。回答下列问题：

（1）利用萃取法对银杏叶中的黄酮类活性成分进行提取，在萃取之前需要对银杏叶进行粉碎和干燥处理，原因是。
（2）通常可用对提取物进行纯度鉴定。
（3）研究发现，95%乙醇提取物对黑曲霉、黄曲霉、杜青霉、草酸青霉和灰绿曲霉的生长有抑制作用。为了检测这些霉菌对提取物的敏感性，将菌种充分稀释后采用（接种方法）接种到平板上培养时一般（填“需要”或“不需要”）将平板倒置，请说明理由。

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