微生物的分离和培养知识点题库

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )

A . 计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B . 计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C . 计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D . 计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理（）
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④培养皿 ⑤接种环 ⑥培养基 ⑦果汁 ⑧酱油 ⑨手术刀

A . ①②③⑦⑧ B . ①②③⑦⑧⑨ C . ①②③④⑤⑥⑧ D . 以上全部

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是

A . 图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源 B . 如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法 C . 若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源 D . 使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落

关于接种时应注意的事项全部正确的为（）

①接种室要消毒 ②无菌操作 ③接种时可以谈话

④外植体如茎段、茎尖可随机放人培养基 ⑤接种时要防止交叉污染 ⑥接种完立刻盖好瓶口．

A . ①②③④ B . ①②③④⑤⑥ C . ③④⑤⑥ D . ①②⑤⑥

高温淀粉酶被大规模用于工业生产．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．

（1）与大肠杆菌相比，嗜热菌（）

A . 对青霉素敏感，但对四环素不敏感 B . 与真核生物的亲缘关系更远 C . 细胞的DNA中，碱基G和C含量较高，较稳定 D . 没有菌毛和质粒
（2）进行过程①的目的是；过程②所使用的方法是法．图1中弧线箭头上“？”的操作是．
（3） Ⅰ号培养基应以作为唯一碳源．
（4） Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是；一般对配制的培养液采用法灭菌．
（5）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放分解培养基中的碳源，在菌落周围形成透明圈；应挑选出透明圈（大/小）的菌落，接种到Ⅱ号培养基．
（6）若现在发现了一种新的单细胞生物，并欲对其进行分类，下列选项不能作为分类依据的是（）（多选）

A . 核膜的有无 B . 核糖体的有无 C . 细胞壁的有无 D . 膜上磷脂的有无

下列有关细菌培养的叙述，正确的是（）

A . 在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B . 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C . 向液体培养基中通入氧气能促进乳酸菌的生长 D . 培养液中溶氧量的变化，会影响酵母菌的生长繁殖和代谢途径

有关稀释涂布平板法的叙述错误的是（　　）

A . 首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B . 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C . 结果都可在培养基表面形成单个的菌落 D . 涂布时需在酒精灯火焰旁进行

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等．某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如图．（注：培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供适合的和条件；另一方面需要确保无处不在的其它微生物无法混入，如培养皿和培养基都可以用法进行灭菌．
（2）据图，研究小组采用的是法分离和计数金黄色葡萄球菌．由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管，并编号1﹣4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是．
（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%﹣15%NaCL的肉汤中生长；本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长
（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确．据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为．

长时间使用的木质筷子或竹质筷子，将其切片在电子显微镜下观察，会发现细小的小室，里面的食物残渣成为幽门螺旋菌、黄曲霉菌等微生物生长的温床．请回答：

（1）在电子显微镜下观察到的细小的小室是植物细胞死亡后留下的，能分解此结构的酶包括：C1酶、Cx酶和．
（2）黄曲霉菌产生的属于化学致痛因子．若在实验室中培养黄曲霉菌应将培养基的pH值调至（填“酸性或碱性或中性”）．
（3）在日常生活中，经常用法对筷子进行消毒．
（4）在实验室中，获得纯净培养物的关键是．
（5）实验室中培养幽门螺旋菌或黄曲霉菌后的培养基，在丢弃前一定要处理，以免．

请根据所学知识，回答下列问题：

（1）在筛选硝化细菌的选择培养基上，碳源是，硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的，若实验组每个平板中的菌落数都超过300，应对样本菌液进行处理。
（2）在胡萝卜素的提取过程中，首先要对粉碎的胡萝卜进行,但要注意控制温度和。根据胡萝卜素的特点，可以考虑使用法提取。
（3）将提取的胡萝卜素粗品通过法进行签定，观察结果时会发现标准样品位于展开剂前沿，萃取样品往往比标准样品多出现一条层析带，其原因是。

均三氮笨类除草剂适用范围广，但残留的除草剂会污染土壤、地下水，以至于危害人类健康，研究表明均三氮笨的自然降解非常缓慢，微生物降解是去除均三氮笨的主要途径。下图是科研小组从被污染的土壤中筛选得到能高效降解均三氮苯的细菌的流程图，分析并回答下列问题：

（1）通常情况下，配制细菌的培养基需要添加的营养物质有水、无机盐、，且培养基的pH调至。
（2）为了能筛选得到目的菌，培养基中需要加入作为唯一氮源的均三氮苯的原因是。
（3）转为固体培养基时，可采用法进行接种。实验结束后需要对培养基进行处理后才能倒掉，这样操作能防止。
（4）为验证培养基制备过程中无杂菌污染，需要设置的对照实验是。

在接种操作的过程中，不正确的是(　　)

A . 要将接种环灼烧灭菌 B . 取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌 C . 将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位 D . 接种后还要将管口灭菌加塞

杀虫脒，又名氯苯脒，是一种有机氮农药，具有高效广谱杀虫杀螨的作用，但长期使用容易导致土壤污染，为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、、水、无机盐四类，该实验所用的培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源，其原因是，从功能上讲，该培养基属于培养基。
（2）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法在功能上的区别是，此外，也是测定微生物数量的常用方法。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和。培养基一般不使用干热灭菌的原因是。

大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因，某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ基因被破坏，则菌落呈白色。图表示转基因操作过程。下列有关叙述错误的是（）

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A . 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养 B . 若大肠杆菌的菌落为蓝色，则导入的是普通质粒 C . 作为受体的大肠杆菌应含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选 D . 选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素

请回答下列有关微生物培养，应用和保存以及物质提取的问题：

（1）微生物培养过程常用的对涂布器进行灭菌的方法是。培养酵母菌常用到的培养基是（填名称）。
（2）从土壤中分离尿素分解菌的过程中，应向以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂。
（3）对于需要临时保藏的菌种，首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，等菌落长成后，再。对于需要长期保存的菌种，可以采用的方法。
（4）从橘皮中提取橘皮精油常用的方法是法，从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是法。

尿素是一种重要的农业氮肥，但农作物并不能直接吸收，需要土壤中的一些细菌分解成无机物后，才能被利用。

（1）在分离土壤中分解尿素的细菌时，人为提供的条件，同时抑制或阻止。

（2）在分离上述细菌时，常用到的培养基配方如下：

KH₂PO₄	1.4g
Na₂HPO₄	2.1g
MgSO₄•7H₂O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
琼脂	15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

其中，KH₂PO₄和Na₂HPO₄的作用是（答出两点）葡高糖可为该菌的生长提供和，尿素[CO（NH₂）₂]（可以不可以）作为碳源，原因是。

如图是两种不同接种方法所得的结果，下列说法正确的是（）

A . A ，B两种接种方法使用的接种工具在接种前都要在酒精灯火焰上灼烧，且处理方法完全相同 B . 进行接种之前都要对操作者双手和培养基进行灭菌处理

C . A方法划线时，是沿方向①②③进行，且在③区域看到有单个菌落，可直接计数 D . A、B所使用的培养基可以相同，且制作时要先调pH再灭菌最后倒平板

在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图。有关叙述错误的是（）

A . 甲中a区域为划线的起始位置 B . 接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌 C . 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 D . 接种过程中至少需要对接种环灼烧5次

下列关于“探究土壤微生物分解作用”的实验设计，错误的是（）

A . 对照组的土壤不做处理，为自然状态 B . 对照组和实验组应该包埋同种等量落叶 C . 实验组土壤灭菌的方法为100℃恒温加热1h D . 实验时间为几天甚至几周，因此要有计划地观察和记录

定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。滤膜法的大致流程如图所示：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基上培养→统计菌落数目。请据图回答问题：

注：EMB培养基的成分：蛋白胨、NaCl、乳糖、水、X和琼脂

（1） EMB培养基中为细菌提供碳源的是，添加的X是，大肠杆菌在含有X的培养基表面长出的菌落呈黑色，从功能上看，EMB培养基属于培养基。
（2）待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为：在无菌条件下，用冲洗滤杯，并再次过滤水样。
（3）取10mL待测水样加入90mL无菌水稀释，稀释后取10mL菌液通过滤膜法测得三个平板上的黑色菌落数分别为13、15、17，推测1L待测水样中的大肠杆菌数目为个。
（4）在培养过程中，发现空白对照组的平板上检测到少许菌落，请分析最可能的原因是。
（5）如果在实验组的培养基上添加了青霉素再进行相同的操作，预测检测的大肠杆菌菌落数（填“会”或“不会”）变化，原因是。

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