第1章发酵工程知识点题库

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下．将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用．

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄•7H₂O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4 g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？（填“能”或“不能”），原因是．

（2）培养基用方法灭菌，培养皿用方法灭菌，待培养基冷却到 ℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止，以免造成污染．

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的就能大约推测出样品中活菌数．

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散．

将大肠杆菌菌种从菌种试管接种到另一支试管的操作下列说法有误的一项是（）

A . 整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近进行 B . 接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后即可伸入菌种试管挑取少许菌种 C . 菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次 D . 带菌的接种环应在培养基斜面上由底部向上轻轻划“S”型曲线

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答问题：

（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选，这种培养基属于选择培养基．
（2）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力．
（3）实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉．

回答下列有关泡菜和腐乳制作的相关问题：

（1）制作泡菜时为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是．
（2）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有等（至少答2点）．
（3）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是：．
（4）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品，发酵完成后，需装瓶加盐腌制，瓶子一般采用的消毒方法是，加盐的目的是．
（5）封瓶的时候，需要把瓶口在酒精灯火焰上过一下，原因是．
（6）含水量高的豆腐不适合用来做腐乳，原因是．

泡菜是四川人非常喜爱的家常小菜，新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌．回答下列问题：

（1）泡菜腌制一段时间后，泡菜坛中的盐水和蔬菜逐渐变酸，原因是．腌制过程中，要注意控制腌制的等条件，以防止亚硝酸盐的含量过高．
（2）分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，这样做的目的是．稀释后的泡菜滤液可用法使菌液均匀接种在培养基表面，接种的全过程都应在附近进行．
（3）固体培养基会因加入适量碳酸钙后而不透明，但乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．纯化乳酸菌时应该挑取生长在平板（选填“表面”或“中下层”）且周围出现的菌落进一步分离．

回答下列有关生物工程的问题

纤维素分子不能进入酵母细胞，为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒．请据图分析回答问题：

（1）由图可知，目的基因有（）（多选）．

A . 质粒 B . 纤维素酶基因 C . 信号肽基因 D . A基因
（2）获取目的基因的方法一般包括和．
（3）本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如图．为防止酶切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是（）（多选）．

A . ①② B . ①③ C . ②④ D . ③④
（4）纤维素酶基因与质粒拼接起来需要酶．
（5）在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，不能存活的是菌株．
（6）利用纤维素生产酒精，菌株更具有优势，其优势在于．

关于下图所示的发酵装置，操作正确的是( )

A . 果酒发酵时，需将果汁装满瓶，并关闭充气口 B . 果醋发酵时，需持续通入氧气，促进醋酸生成 C . 该装置必须先进行果酒发酵，再进行果醋发酵 D . 制作果酒、果醋时均需要将排气口的弯管水封

为获得高效降低胆固醇的乳酸菌，科研人员作了如下实验。

（1）取适量发酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入制成1：10稀释液，再梯度稀释到10^-6的稀释液，涂布于添加了CaCO₃的乳酸幼苗培养基（MRS培养基）平板上，在条件下恒温静置培养48小时。挑取具有的菌落纯化培养，通常使用的划线工具是。示意图A和B中表示的是该方法接种培养后得到的结果。可通过观察菌落的判断是否达到了纯化。
（2）纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定（填“上清液或沉淀细胞”）中胆固醇的含量，以作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出具有目的菌株。

在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出（）

A . 固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌 B . 固氮细菌、大肠杆菌、放线菌 C . 乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌 D . 固氮细菌、霉菌、放线菌

分解尿素的微生物广泛存在于农田等土壤中，某生物实验小组尝试对分解尿素的微生物进行分离与计数，请回答下列问题：

（1）分解尿素的微生物含有的酶是，为筛选出能分解尿素的微生物，配制培养基时应以作为唯一氮源，因此该培养基属于培养基。
（2）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是。常用来统计样品中活菌数目的方法是。
（3）该小组对分解尿素的微生物进行计数时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是，然后将1mL样液稀释10000倍，在3个平板上用涂布法分别涂布0.1mL稀释液；经适当培养后，统计活菌数目，每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目，最后选取作为结果；3个平板的菌落数分别为39、42和45。据此可得出每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数为个。

乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类革兰氏阳性细菌的总称，经革兰氏染色后呈紫色。分离乳酸菌常用MRS固体培养基：蛋白胨5g、牛肉膏5g、酵母提取物2.5g、柠檬酸二铵1g、水500mL、乙酸钠2.5g、K₂HPO₄1g、MNSO₄·4H₂O 0.125g、琼脂12.5g、MgSO₄·H₂O 0.29g、CaCO₃ 5g、葡萄糖10g。请回答：

（1） MRS培养基中琼脂的作用是。MRS培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，灭菌时设置的压力和时间分别为、。灭菌后制作平板用于实验，对平板进行无菌检测的方法是。使用涂布法分离乳酸菌，培养后发现平板上形成的单菌落周围会产生CaCO3溶解圈，溶解圈大小能够反映。
（2）若用革兰氏染色法对大肠杆菌进行染色，结果(填“是”或“否”)呈紫色。
（3）用乳酸菌制作酸乳时，可对乳酸菌进行固定化处理，方法为：称取适量海藻酸钠配成水溶液，加入乳酸菌并搅拌均匀，以一定速度滴入CaCl₂溶液中形成凝胶，使其凝固成珠状。上述采用的固定方法是，凝珠捞出后要用无菌水冲洗，目的是洗。
（4）乳酸菌可用于泡菜制作。在对泡菜作亚硝酸盐定量检测时，若样液测定时的比色杯光程小于制作标准曲线时的比色杯光程，则测得的样液中亚硝酸盐含量(填“偏大”“偏小”或“不影响”)；若泡菜样液测得的OD值过大，超出标准曲线，则最适宜的做法是。

变酸的酒表面长的一层膜和泡菜坛内长的一层白膜分别是由哪种菌的繁殖造成的（）

A . 酵母菌、醋酸菌 B . 酵母菌、毛霉 C . 醋酸菌、乳酸菌 D . 醋酸菌、酵母菌

用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（）

A . 未接种的选择培养基 B . 接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 C . 未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 D . 接种了的选择培养基

香辣农家坛装腐乳是湖南新化特产，据腐乳制作流程回答下列问题：

（1）腐乳制作流程一般是。
（2）腐乳发酵时菌种的接种方法是，向长满毛霉的豆腐块上加盐的作用是。
（3）制作卤汤时，一般将酒精含量控制在12%左右，过高过低都不行，原因是。
（4）卤汤中的香辛料的作用有。

某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题。

（1）牛肉膏蛋白胨固体培养基的配方如下。

成分

牛肉膏

蛋白胨

NaCl

琼脂

蒸馏水

含量

5.0 g

10.0 g

5.0 g

20.0 g

定容至

1 000 mL

其中提供氮源的是,提供碳源的主要物质是。

（2）微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的。
（3）将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧后放入中灭菌,压力为100 kPa,温度为,时间为。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基,此试管应。
（4）使用高压蒸汽灭菌锅时应注意,要先向锅内倒入,并加热煮沸,将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。

下列有关平板划线法的操作，正确的是(　　)

A . 使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B . 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 C . 不能将最后一次的划线与第一次的划线相连 D . 最后将平板倒置，放入恒温培养箱中培养

某同学在线提交了在家用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋的实验报告，他的做法错误的是（）

A . 选择新鲜的葡萄略加冲洗，除去枝梗后榨汁 B . 将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁 C . 酒精发酵期间，根据发酵进程适时拧松瓶盖放气 D . 酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进行醋酸发酵

【选修1：生物技术实践】

乳酸菌中的谷氨酸脱羧酶（GAD）能消耗H⁺将谷氨酸转化为γ-氨基丁酸（GABA），GABA在制药、食品等方面具有较大应用。研究人员从泡菜样品中筛选高产GABA的乳酸菌株，并优化其发酵条件。回答下列问题：

（1）已知MRS固体培养基因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌所产的酸可与碳酸钙发生反应，从而在培养基上形成。从功能上判断，MRS培养基可作为乳酸菌的培养基。
（2）利用MRS培养基分离纯化乳酸菌时，首先需用对泡菜滤液进行梯度稀释，然后再结合其他方法筛选出具高产GABA特性的乳酸菌。进行梯度稀释的目的是。
（3）研究人员对高产菌株产GABA的发酵时间和温度分别进行了研究，结果显示，发酵时间在48～60h范围内，GABA的相对产量较高；发酵温度在35～39℃范围内，GABA的相对产量较高。研究人员认为，要进一步提高GABA相对产量，以达到最佳生产效果，还需同时对发酵时间和发酵温度进行优化。请为该优化实验设计一个实验结果记录表。

谷氨酸是生物体内一种重要的有机小分子，谷氨酸钠是它的钠盐，是味精等调味品的主要成分。目前利用微生物发酵生产的氨基酸中，谷氨酸是产量最大的种类之一。

（1）谷氨酸的R基为 $\text{[math]}$ ，其结构简式为；如果在蛋白质合成过程中，携带谷氨酸的转运RNA如图1所示，可知谷氨酸的密码子为。
（2）我国微生物发酵工程生产谷氨酸常用的菌种有谷氨酸棒状杆菌和黄色短杆菌，下列生物中与这些菌种在结构上存在明显区别的是（）

A . 噬菌体 B . 人类免疫缺陷病毒（HIV） C . 衣原体 D . 肺炎链球菌 E . 酵母菌 F . 硝化细菌
（3）谷氨酸发酵的培养基成分，主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图2所示。可以判断谷氨酸棒状杆菌的新陈代谢类型是。某厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸，结果代谢物中出现了大量的乳酸，从发酵条件看，其原因很可能是。
（4）谷氨酸发酵生产过程中，需要添加氨水，它不仅是细菌生长所需的，而且还有调节培养液的作用，所以应该分次加入。

红梨醋饮属于绿色健康饮品，其制作流程如下图，下列分析不正确的是（）

A . 可在酸性条件下用重铬酸钾与发酵产物反应，检测①过程是否成功 B . 在①过程进行旺盛时，②过程往往不能进行，原因是果酒发酵是在无氧环境下进行的，而醋酸菌属于好氧菌，无法生存 C . ①过程发酵温度控制在18~30℃为宜，②过程发酵的最适温度是30~35℃ D . 果醋制作过程中打开发酵瓶主要是因为果酒产生果醋时会生成二氧化碳

第1章 发酵工程 知识点题库

第1章发酵工程知识点题库