测定某种微生物的数量知识点题库

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。

[生物一选修]：生物技术实践] ．

请回答从土壤中分离分解尿素的细菌的有关问题：

（1）为达到分离的目的，培养基中氮源是，这种培养基在功能上属于培养基，目的是只允许能合成酶的微生物生长，其他微生物均不能生长．
（2）为证明分离得到的细菌是否可以分解尿素，可在培养基中加入指示剂，若该指示剂，则可初步鉴定该细菌可以分解尿素．
（3）某同学计划统计分解尿素的细菌总数，他选用10⁶倍稀释液进行平板划线，并设置了3个培养皿．从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是，此对照实验的目的是证明的过程中是否被杂菌污染．
（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是．

微生物在生产中有重要应用，回答下列有关微生物的问题：

（1）家庭酿制葡糖酒所用的微生物主要是；家庭腌制泡菜的过程中，用水封坛的作用是．
（2）实验室中配置的培养基在使用前需用法进行灭菌；在配置筛选耐盐细菌的选择培养基时，除加入基本营养物质外还需加入．
（3）某兴趣小组调查某品牌1g牛奶中细菌数量时，若统计出在稀释倍数为10³的实验组的平板上平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2ml，则每克牛奶样品中的菌落数为．若空白对照组的一个平板上出现了7个菌落，这种结果说明在此实验中出现了现象；为获取可靠实验数据，需．

在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数．请回答下列与微生物的培养和利用有关的问题。

（1）如图是利用法将微生物接种到固定培养基上，把混合的菌种逐步分散获得单个菌落．接种后培养基应放在37℃恒温培养箱中进行培养。
（2）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O．若此培养基用于培养筛选尿素分解菌，则应除去上述培养基成分中的，并加入物质，以补充源。
（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量．在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，取0.2mL稀释液涂布，得到以下几种统计结果。
甲同学涂布了一个平板，统计的菌落数是260。
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210和240和246，取平均值232。
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163。
在三位同学的统计中，同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量，原因是。

淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。回答下列问题：

（1）从土壤中筛选产淀粉酶菌株的培养基的碳源是。待培养基冷却凝固后，将平板(填“正”或“倒”)放置。培养基接种之前首先要进行灭菌和倒平板处理，并检测培养基平板的灭菌是否合格，检测培养基平板灭菌是否合格常用的方法是。
（2）在稀释倍数为10⁵倍下涂布了三个平板（每次取0.1mL)，统计高产淀粉酶的菌落数分别为140、150、160，则稀释前1mL菌液中所含细菌为个。
（3）若要保存高产淀粉酶的菌种，使用(填“平面”或“斜面”）培养基，在℃温度下保藏。
（4）若把菌种接种到液体培养基上，持续振荡培养菌种比静置培养时的淀粉酶产量高，其原因是。

测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。大肠杆菌在含有伊红美蓝的固体培养基（EMB培养基）上长出的菌落呈黑色。如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要经过灭菌处理的是。与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行。
（2）待测水样过滤完之后，还有部分纟田菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为。
（3）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的操作。从功能上看，EMB培养基属于培养基。
（4）无菌操作下将90mL无菌水加入到10mL待测水样中，这样就将待测水样稀释了倍，将稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数为45，黑色菌落为5，则1升待测水样中的大肠杆菌数目为个。
（5）若要测定待测水样中酵母菌的数目，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径（填“更大”或“更小”）的滤膜。

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题：

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了和，除此之外，培养基还必须含有的基本成分是。
（2）对培养基和培养皿进行灭菌，常采用的方法分别是。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有，如果其总数越多，则说明。
（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐细菌，这种培养基被称为。

对下列生物学实验进行操作、分析与讨论：

（1）探究培养液中酵母菌种群数量动态变化的实验中，用（用具）进行酵母菌细胞计数，用（用具）测定各试管的浑浊度。某同学细胞计数时，见到压在方格线上的细胞如何计数？
（2）甲状腺分泌的甲状腺素不仅能促进动物的个体发育，还能提高神经系统的兴奋性，使实验动物反应敏锐。研究发现，低浓度的MIT（一种防腐剂）对蝌蚪的神经系统有负面影响。为了研究这两种物质对蝌蚪神经系统的影响及其相互作用，某研究小组进行了如下实验，请完成实验设计方案：
材料：甲状腺素片，MIT制剂，直径20cm的玻璃培养缸4个，研钵，清水等。

①将体长2cm～3cm的40尾健康蝌蚪随机均分在4个玻璃培养缸中，缸内放入3L的。

②A缸不加任何药物作为对照；B缸加入120mg的甲状腺素片；C缸加入30mg的MIT制剂；D缸加入。

③每两天换水一次，连续饲养一段时间后，从下向水缸的底部一半照射一定强度的光束，蝌蚪会出现避光行为，观察、记录，记为a、b、c、d，进行比较分析得出实验结论.
（3）某研究小组对学校附近的太浦河水域进行了水质调查，请根据进行淡水水域调查的相关操作方法，回答以下问题：
①采集水样时，尽可能多地选择不同类型的水样，观察水样采集地附近的和周边环境。

②将所采集的水样取1mL在全营养琼脂培养基中培养，于37℃经24小时-48小时培养后，统计培养基上的总数，即可用来衡量水体中细菌的含量。

③若对水中的浮游动物种类、数量进行检测，可用适宜规格的对水样进行定性采集。

小麦、水稻等作物增产是长期使用化肥、农药、植物生长调节剂等的结果，而使用氮肥增多，不仅导致作物品质下降，还会污染环境。把固氮微生物的固氮基因导入小麦、水稻等农作物细胞内，让其自行固氮可解决此问题。回答下列问题：

（1）固氮菌有自生固氮菌（可自行固氮）和共生固氮菌（如和豆科植物形成根瘤后才能固氮的根瘤菌）。对土壤中的固氮微生物进行选择通常用的是（填“有机氮”“无机氮”或“不加氮”）源培养基，培养基中培养的是（填“自生固氮菌”或“共生固氮菌”）。
（2）为筛选出自生固氮菌，需要在制备的培养基中添加的基本营养物质包括水、碳源和，该培养基能筛选出目的菌株的原因是。
（3）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是。
（4）现将10mL的固氮菌培养液进行梯度稀释，通常是梯度稀释10倍，即取1mL接种到mL的培养液中。分别取0.1mL稀释倍数为10⁵的样液接种到5个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、41、42、43、45，则1mL悬液中活菌数量为个，上述过程采用的接种方法是。

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是。这种培养基从功能上看属于（(填“选择”或“鉴别”)培养基。
（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为。这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小，原因可能有。
（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使，提高营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是。

将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。

回答下列问题：

（1） M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制的生长，加入了链霉素的培养基属于培养基。
（2） M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有（答出两点即可）。
（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是，该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理。
（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：。

在进行细菌计数时，平板上统计的菌落数目往往比实际细菌数目低，原因不包括（）

A . 培养过程中少部分细菌死亡 B . 培养基营养成分不齐全 C . 培养基可能被杂菌污染 D . 有的菌落由两个或多个细菌形成

研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量,每一个浓度涂布四个平板,并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述,正确的是(　　)

A . 涂布前,将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,燃尽后还要冷却8~10 s B . 涂布完成后,在培养皿的皿盖上做标记,以避免混淆,并将培养皿倒置培养 C . 计算平板上的菌落数时,四个培养皿上的菌落数无论多少,都要全部平均 D . 若空白对照组上有7个菌落,则在实验组数据基础上减去7,以获得最准确数据

Ⅰ.为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A 所示的实验。

（1）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是，出现图B结果可能的失误操作是。纯化菌株时，还可釆用平板划线法。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有。
（2）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3 个平板上分别接入0.1mL稀释液；培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为个。
Ⅱ.贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造，其中风味豆豉深受大众喜爱，远销国内外。风味豆豉的主要工艺流程是：黄豆→洗净浸泡→煮熟→加适量盐→发酵→加入配料→装坛密封→成品。请回答下列问题：
（3）制作豆豉前期发酵的目的是让霉菌产生相应的酶，如蛋白质转变为小分子肽和氨基酸，脂肪转变为，使豆豉营养更加丰富，有利于健康。发酵过程中需采用人工培养纯净菌种，接种前随机选取若干灭菌后的平板，先培养一段时间目的是。
（4）豆豉制成成品后，需测定其亚硝酸盐含量，原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成色染料。

下列关于实验的描述错误的是（）

A . 调查土壤小动物类群丰富度常用取样器取样的方法 B . 进行酵母菌计数时应先盖盖玻片，然后滴加培养液 C . 为保证严谨性，在探究酵母菌种群数量变化时需要重复实验 D . 生态缸稳定后，生态缸内的生物种类和数量将保持不变

下列关于原生质体和细胞计数的叙述，错误的是（）

A . 测定植物原生质体的密度时，可用血细胞计数板 B . 红墨水不能进入活细胞，可用于检测细胞的存活状态并计数 C . 涂布分离法和划线分离法均能得到单菌落，都可用于细菌计数 D . 血细胞计数板可以统计酵母菌活菌数和死菌数之和

曾经有报道称，小型饮水机中的水易受到病原微生物的污染。为验证这一报道的真实性，某校科研小组随机选取学校内正在使用的小型饮水机展开研究。

（1）水样采集：先用75%的酒精对饮水机的冷热出水口及采样人员手部进行擦拭处理，这一做法称为。处理后将出水口打开各流出约50mL水后，用经处理的锥形瓶分别从出水口取样100mL。
（2）水样稀释：科研小组认为所取水样可直接培养，无需进行梯度稀释，原因是。
（3）制作平板：用移液枪吸取0.1mL水样，滴加到培养基表面。用涂布器将水样均匀涂抹在培养基表面，每个水样制作3个平板。将上述各组平板及1个空白平板倒置放于恒温箱中进行培养，放置空白平板的目的是。待后，对涂抹水样的平板中的菌落计数，取三个平板菌落数的平均值。

（4）该科研小组分别从水样温度、饮水机水位、饮水机位置三个条件开展了对比研究，下表为他们的实验结果。

水样温度	菌落数	饮水机水位	菌落数	饮水机位置	菌落数
开水98℃	0	100%水位	65	靠窗阳台处饮水机	8
热水60℃	35	50%水位	165	室内中间饮水机	32
温水25℃	189	10%水位	328	门口角落饮水机	289

①在实验设计时，控制无关变量非常关键。在研究某一条件对水样污染情况影响时，饮水机的其他条件应该。

②请据该科研小组的实验结果，对学校饮水机的使用及饮水习惯提出两条合理建议：。

多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物，呈油状液体，污染土壤后，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用。为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品，接种到以为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属。
（2）微生物的纯培养操作方法有两种，如图是法。该操作方法在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线。
（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。若用法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是。
（4）将1mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为个/L。

大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，主要生活在大肠内。下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请回答下列问题：

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K₂	HPO₄	显色剂	琼脂
含量	10.0g	5.0g	5.0g	2.0g	2.0g	0.2g	12.0g

（1）将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，根据用途划分该培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基。该培养基中的碳源是。
（2）培养基灭菌常采用的方法是。玻璃和金属材质的实验器具（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（3）下图是采用两种方法纯化培养微生物的效果：
某同学利用显微镜直接计数法统计了培养基中大肠杆菌的数量，该方法统计出的结果比实际数值扁（填“大”或“小”），理由是。获得图B效果的接种方法是，该方法在第二次划线及其后划线总是从上次划线的末端开始的原因是。

葡萄酒作为葡萄的主要深加工产品之一，在生产过程中会产生大量的酿酒残渣，每年我国的酿酒残渣量大概有50万吨左右，仅有少量被回收利用，绝大部分用做肥料、饲料甚至被当作垃圾扔掉，造成了资源的极大浪费，也给环境带来了巨大的压力。因此，如何合理利用酿酒葡萄残渣成为葡萄产业发展中亟待解决的问题。请回答下列问题：

（1）制作葡萄酒需要酵母菌，其代谢类型为，家中制作葡萄酒时可以不添加酵母菌，原因是。酿酒时先通气，其中O₂的作用是，之后需要密封，若密封不严混入空气，发酵液会变酸，其可能原因为。
（2）可以利用萃取法从葡萄残渣中提取植物油，萃取前将原料干燥和粉碎的目的是。萃取效率主要取决于。植物油溶解于有机溶剂后，只需，就可以获得纯净的植物芳香油。
（3）为了解残渣中微生物的数量，取10g残渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上。10⁴倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为88、92和99，则每克残渣中微生物数量为个。
（4）酿酒葡萄残渣中膳食纤维含量较高，约占干物质的75%，其中的纤维素可以被纤维素酶水解，纤维素酶是一种复合酶包括C₁酶、和，前两种酶使纤维素分解为。在筛选纤维素分解菌的过程中，发明了染色法，其原理为。
（5）有科学家利用黑曲霉菌株发酵酿酒葡萄残渣生产出了果胶酶，果胶酶在果汁生产中有着重要的应用，其作用有 (写出一条）。

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