测定某种微生物的数量知识点题库

下列是以酵母菌为材料进行的实验，有关叙述错误的是( )

A . 探究酵母菌的呼吸方式，可用溴麝香草酚蓝检测产生的CO₂ B . 用酵母菌发酵酿制果酒，选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精 C . 探究酵母菌种群数量变化，应设空白对照排除无关变量干扰 D . 用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板

在人工培养根瘤菌时，当向无菌培养箱中充入N₂时，其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时（　　）

A . 多和大 B . 多和小 C . 少和大 D . 少和小

过量紫外光是一种严重危害生态环境和动植物健康的光污染物，某研究小组对“紫外光辐射量对酵母菌生长的影响”这一课题进行了初步的探究，结果如表：

培养皿编号	紫外光辐射剂量（J/m²）	实验后酵母菌数量（个/ml）
A₁	0.2	27×10⁴
A₂	0.8	26×10⁴
A₃	X	14×10⁴
A₄	2.0	10×10⁴
A₅	2.6	6×10⁴

（1）表中X的值应为，原因是．
（2）该实验还需增设一个辐射剂量为 J/m²的培养皿．
（3）在实验过程中需要严格控制的无关变量有（至少写出两个）．
（4）若将酵母菌置于培养条件适宜、容积恒定的某种培养液中培养一段时间后，酵母菌种群密度稳定在16×10⁴个左右，则该酵母菌种群增长速率最快时，种群密度约为．
（5）该实验可以得出的结论是：．

下列有关实验的描述中，正确的是（）

A . 平板划线法容易获得单菌落和计数活菌数目 B . 土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上可筛选出能分解尿素的细菌 C . 在植物组织培养生芽时，培养基通常应含较多的α﹣萘乙酸等生长素类调节剂 D . 在探究生物体维持pH稳定的机制实验中，用缓冲液和自来水作为对照，盐酸的浓度属于无关变量

1克土样被稀释倍数为10⁶ ，平板上生长的平均菌落数为80，涂布平板时所用的稀释液体积为0.1mL，则每千克样品中的活菌数约为（）

A . 8×10⁸ B . 8×10⁹ C . 8×10¹⁰ D . 8×10¹¹

下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）

A . 土壤中各类微生物数量不同，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离 B . 每隔24h统计一次菌落数目，应该选取菌落数目稳定时的记录作为结果 C . 将实验组和对照组的平板倒置，放置在37℃恒温培养5～6天 D . 确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数

存在于土壤中的脂环酸芽孢杆菌需氧，耐热，生长温度35-70℃。橙汁生产过程中若感染脂环酸芽孢杆菌，会影响橙汁的品质，导致巨大的经济损失。为优化橙汁生产的质量监控工艺，进行下述研究。

（1）实验一：脂环酸芽孢杆菌的筛选和鉴定
实验步骤：①配制K氏培养基;

②取果园土壤，制备土壤稀释液；

③将土壤稀释液接种在K氏培养基平板上，培养后获得单菌落。

④对获得的菌落进行筛选和鉴定。

Ⅰ.K氏培养基的主要成分有酵母膏、蛋白胨和葡萄糖等，其中能提供生长因子的成分是。

Ⅱ.将分离得到的可疑菌株制成菌悬液，于80℃水浴中热处理10min，再取0.1mL热处理后的菌液涂布接种到K氏培养基平板上，45℃培养48h。此操作过程的目的是。

A．用80℃水浴杀死杂菌和芽孢 B．分离纯化目标菌株

C．用80℃水浴筛选出耐热菌株 D．给细菌补充新的营养物质

Ⅲ.用接种环将筛得的菌株插入到半固体培养基（琼脂含量3.5g/L）中（如图），45℃培养4-5天后进行观察，能够判断是脂环酸芽孢杆菌生长的试管是。
（2）实验二：脂环酸芽孢杆菌控制方法的研究
实验步骤：

①称取一定量的抑菌剂，配制成不同浓度的抑菌液。

②将实验一得到的菌株原液稀释成一定浓度。

③分别取不同浓度的抑菌液和菌株稀释液，加入到K氏培养液中形成菌悬液（三种液体均为等量）。培养一段时间后，将上述菌悬液分别接种到K氏培养基平板上。

Ⅰ.实验二中，对照组的设置应该是。

Ⅱ.为便于检测抑菌剂的抑菌效果，宜采用哪种接种方法？为什么？。

某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂，下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：

(NH₄)₂SO₄	NaCl	MgSO₄_·7H₂O	K₂HPO₄	1%橄榄油	蒸馏水	pH
0.1g	0.05g	0.01g	10g	4ml	定容至100ml	7.0g

（1）在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是。
（2）用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色)。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈，原理是。筛选时常选择菌落大黄色圈直径大的菌落，这说明此菌落。
（3）菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为(填“细菌”或“霉菌”)。有的菌落连成一片，形成原因最可能是。
（4）研究发现在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，操作流程如下：采集样品→富集培养→分离、纯化培养→筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌→保存备用。

（1）从用途上来说，富集培养基属于培养基；进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板。此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，其中添加了一定量的。之后用法接种，若该过程所得平板上的平均菌落数为50个，稀释倍数为10⁵时，则每毫升样品中的细菌数为个。
（2）培养基配置和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是；实验室中常使用（设备）对培养基灭菌。
（3）若菌落的大小大致相同，菌落发生的时间也相同，（填“能”或“不能”）仅根据菌落周围透明圈的大小来判断该菌落所产生的淀粉酶单位酶量酶活力的高低，理由是。

以下有关生物技术实践的叙述中，错误的是（）

A . 显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法 B . 稀释涂布平板法不能用来测定土壤溶液中某活菌数目 C . 培养能合成脲酶的细菌时可在培养基中添加尿素作为唯一氮源 D . 挑选菌种时可在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌

微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：

（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自的土壤。
（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用培养基。常用的接种方法和。
（3）接种后，应密封培养的原因是，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取就可获得高效菌株。
（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为个/mL。该统计结果(低于、高于)实际值。

用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为10⁶培养基中得到以下几种统计结果，正确的是（）

A . 涂布1个平板，统计菌落数是230 B . 涂布2个平板，统计的菌落数是303和287，取平均值295 C . 涂布3个平板，统计的菌落数分别是21、212、256，取平均值163 D . 涂布3个平板，统计的菌落数分别为210、240、250，取平均值233

随着生产生活和科技的发展，广泛应用很多微生物知识，请分析回答下列问题：

（1）利用蓝莓酿制的蓝莓酒，被称为“液体黄金”。如果酒的生产流程，压榨前需除去果柄，此操作要在冲洗（填“之前”或“之后”）进行。若从混杂的微生物中分离酿制蓝莓酒的菌种应使用培养基。喝剩的蓝莓酒开盖放置一段时间后会变酸，原因是。

（2）测定大肠杆菌数时，在稀释10⁵倍的培养基内，得到下表统计结果中准确可信的是组。对该菌种数目统计时，常用的方法是和显微镜直接计数法。但是，统计的菌落数也往往比实际活菌的数目低，是因为。

组别	平板数	统计的菌落数	取平均值
甲组	两个	250和220	235
乙组	三个	160、240和110	170
丙组	四个	280、200、340和160	245
丁组	五个	120、60、270、220和130	160

（3）将某杆菌的淀粉酶基因转入到利用淀粉能力较弱的酵母菌中，经筛选得到高效工程菌菌种，此过程依据的生物学原理是。以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种菌的发酵罐需要先排气。
（4）相关实验结束后，使用过的微生物培养基应进行后才能倒掉。

下列依次表示倒平板、接种的位置以及平板划线法接种的路径的示意图,其中错误的是(　　)

A .

B .

C .

D .

若某一稀释度下,平板上生长的平均菌落数为90个,涂布平板时所用的稀释液体积为0.1 mL,稀释液的稀释倍数为10⁵,则每克样品中的活菌数约为(　　)

A . 9×10⁸个 B . 9×10⁷个 C . 9×10⁵个 D . 9×10⁶个

显微镜是生物学实验常用的一种仪器，下列相关叙述正确的是（）

A . 观察植物细胞的质壁分离与复原时，需先在低倍镜下找到物像再换成高倍镜观察 B . 低温诱导染色体数目变化实验中，在低倍镜下可判断细胞染色体数目是否发生变化 C . 用显微镜对酵母菌进行计数时，应先将酵母菌菌液滴加到计数室再盖上盖玻片观察 D . 研究土壤小动物丰富度时，需使用高倍镜观察小动物的特征以统计小动物的种类

固氮微生物A能将大气中的氮气转化为氨，需通过彻底氧化分解土壤中的有机质获取固定大气中的氮气所需的能量。某研究小组对土壤中的固氮微生物A进行分离计数。结合上述材料，回答下列相关问题：

（1）选择的表层土土壤进行取样。将上述土样接种到(填“固体”或“液体”)培养基中进行选择培养，选择培养时需不断通入空气，其目的是为固氮微生物A提供；选择培养的目的。
（2）研究者将菌液进行接种培养的方法是，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低的理由。若实验组每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液进行处理。
（3）研究者在固氮微生物A菌落旁发现了少量其他形状的菌落，这些不能利用空气中氮气的菌体能在无氮培养基上生长，最可能的原因是。
（4）在培养过程中将未接种菌种的空白培养基与正常接种菌种的培养基同时培养，这样做的目的是。

研究结果表明：除草剂2，4-D的使用对土壤生物群落中真菌数量有着明显影响，当浓度为5mg/kg时，土壤中真菌数量没有明显改变；当浓度为25mg/kg时，真菌数有明显下降但能逐渐恢复；当浓度等于或超过50mg/kg时，真菌数位明显下降且无法恢复。请根据以下提供的实验材料对上述结果进行验证。

实验材料：未使用除草剂2，4-D的土壤、浓度为50mg/kg的2，4-D溶液、蒸馏水、培养皿若干个、血细胞计数板、显微镜

（要求与说明：真菌计数的具体操作过程不作要求：实验条件适宜）

（1）请补充完善下列实验思路：
①用蒸馏水和50mg/kg的2，4-D配制浓度为5mg/kg、25mg/kg的2，4-D溶液；

②取一定量的土壤并制成，滴加到血细胞计数板上，在显微镜下计数并记录；

③取4组培养皿，各加上，并分别加入适量且等量的浓度为5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg的2，4-D溶液，另一组；

④；

⑤对实验数据进行分析与处理。
（2）预测实验结果（设计一个坐标，用曲线图表示检测结果）。
（3）分析与讨论：
①在用血细胞计数板计数细胞时，细胞计数时，见到压在方格线上的细胞如何计数？；这样操作的目的是以避免，减少误差。该实验还可以利用（仪器）测定溶液的浑浊度，来估算真菌的数量。

②该实验对指导农业生产具有重要意义。请从生态系统成分的角度分析不能过量施用2，4-D的原因：。

某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂，下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方。请回答下列问题：

(NH₄)₂SO₄	NaCl	MgSO₄·7H₂O	K₂HPO₄	1%橄榄油	蒸馏水	pH
0.1g	0.05 g	0.01g	10g	4ML	定容至100mL	7.0

（1）该培养基中作为碳源的是，按培养基的功能划分属于培养基。
（2）利用该培养基富集培养土壤样本中产脂肪酶菌的具体操作如下图所示：

通过富集培养可以增加，以确保能够从样品中分离到所需微生物。将锥形瓶固定在摇床上振荡培养的目的有。
（3）为进一步分离出产脂肪酶菌并进行计数，可采用法。在配制培养基过程中还应该加入溴甲酚紫（在酸性条件下为黄色，在碱性条件下呈紫色）和。培养一段时间后，平板上产脂肪酶菌落的周围会出现一圈色。筛选时常选择菌落大、颜色圈直径大的菌落，理由是、。
（4）活菌计数时，一般应选菌落数为的平板进行计数。若平板上有的菌落连成一片，可能的原因是。

塑料膜的主要成分聚乙烯是一种碳氢化合物，稳定性好，不易被分解，易造成“白色污染”。研究人员经过分离筛选最终获得一种能降解聚乙烯的真菌-桔青霉，为利用微生物降解农用地膜提供依据。回答下列问题：

（1）在实验过程中，研究人员将获得的聚乙烯粉末均匀洒在培养基甲上，从培养基的碳源及物理性质分析，培养基甲是以培养基，对配制的甲培养基常采用法进行灭菌。一段时间后，从培养基甲上挑选能生长的菌株，采用法接种获得5个真菌的单菌落，储存备用。若要长期保存菌株，常采用的方法是。
（2）为确定分离得到的不同菌株分解地膜能力的强弱，可将分离纯化获得的真菌分别接种到含的液体培养基中，在一定转速下的摇床上进行培养，摇床培养的目的是（答两点），最后观察比较各组培养液中地膜体积（面积）的大小，进而筛选出高效降解地膜的菌株。
（3）为确定某一培养液中桔青霉的数量，从中吸取1mL培养液，稀释100倍，取0.1mL接种到4个培养基平板上，一段时间后获得的菌落数分别为：25、35、40、42个，则统计的平均菌落数是个。
（4）在不同的土壤使用桔青霉分解地膜的效果存在差异的原因是。

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