测定某种微生物的数量 知识点题库

（1） 甲同学，原因是。

（2） 乙同学，原因是。

（3） 正确做法是。

（4） 稀释涂布平板法所用培养基按物理性质划分属于培养基；

（5） 倒平板前保证培养基无菌的常用方法是。

（1） 为了从土壤中筛选能有效降解一种有害的、难于降解的有机化合物A的细菌。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌），该培养基为培养基，其中化合物A为目的菌提供等营养要素，在分离、纯化、计数过程中，则常采用法接种，实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是，如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中所形成的菌落如右图所示，造成这种结果的原因可能是。

（2） 用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用洗涤红细胞，用破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会，降低分离效果。

（1） 三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是。过程①的原理是。

（2） 培养基中的葡萄糖含量对菌体生长影响最大，葡萄糖为菌体生长提供，为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加，该培养基按用途分是培养基。

（3） 进行③过程时，应选取色的菌落接种至液体培养基。为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，⑤中采取重复过程（填过程中的数字）。

（4） 某同学进行过程乙的正确操作，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是；只有少数菌能生长形成菌落的原因是。

（5） 稀释涂布平板法计数：若将稀释10⁵倍的某细菌菌液，用稀释涂布平板法进行计数。在五个固体培养基上分别接种0.1mL该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：20、40、152、154、156，则每升菌液中细菌数量为个。

（1） 根据无氮培养基的配方可知，从物理性质上看该培养基属于（填“固体”或“液体”）培养基；从功能上看，该培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基，理由是。

（2） 硅酸盐细菌能在无氮培养基中生长，推测该细菌具有功能。

（3） 为统计硅酸盐细菌的数目，应采用法进行接种，该方法的所有操作都应在附近进行。

（4） 进行上述实验的同时也设置了空白对照，空白对照的培养基中，说明培养基灭菌合格。根据表2中的数据可以得出，用培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好。

（1） 研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装入图甲所示的试管中，再将污水水样滴加进去震荡摇匀，适宜条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为。

（2） 图乙滤膜的孔径应（“大于”、“小于”、“等于”）大肠杆菌。

（3） 制备图乙中牛肉膏蛋白胨固体培养基时，对培养基的灭菌方法是，待培养基冷却至℃左右时进行倒平板。

（4） 为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入染料，该研究机构通过统计色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际值（“偏高”、“偏低”或“相等”），理由是。

（1） 在进行实验前需要配制培养基，通常包括计算、称量、溶解、调pH、分装、灭菌等环节，其中调pH的过程（填“需要”/“不需要”）在酒精灯火焰旁进行。为检验培养基是否灭菌彻底，可。   

（2） 为统计洗手前手部细菌的数量，应选择的接种方法是（填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”）。除该方法外，还可使用血细胞计数板计数，但所得数据往往比前者。   

（3） 根据上图所示的步骤得出的实验结果可信度较低，为了提高实验结果的可信度，请给出两点建议：①，②。   

（4） 培养一段时间后可根据（至少填两项）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。为了计算洗手前手部单位面积的细菌数量，除上图所给的信息外，还需要知道。   

（1） 大麦粉碎后经淀粉酶糖化会产生和葡萄糖等，经过滤后得到糖浆，后加入酒花和板栗花浸提液后进行煮沸的目的是。在主发酵过程中加入的啤酒酵母的代谢类型是。

（2） 酿酒的原理是（用反应式表示）。结合技术可使酵母菌重复利用、提高产物纯度。

（3） 下图1和图2分别表示板栗花浸提液添加量和板栗花浸提液投入阶段对板栗花啤酒的影响，由图1可知，随着板栗花浸提液添加量的增加，酒精度变化较小，感官评分呈现的趋势。由图2可知，在麦汁煮沸阶段过早加入板栗花浸提液和在啤酒后酵阶段加入板栗花浸提液，板栗花啤酒口感和气味的协调性均主发酵前的接种阶段。

注：图2中1~5分别为麦汁煮沸后10min，煮沸后30min、煮沸后50min，接种阶段和后发酵阶段。

（4） 发酵过程中，杂菌可产生微量副产物是啤酒“上头”的原因之一，可采用法获得纯净的酿酒微生物，同时对活菌进行计数。

（1） （一）研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的目标菌研究。回答下列问题：
为筛选胞外淀粉酶分泌型菌种，一般从（A．果园树下   B．肉类加工厂周围   C．米酒厂周围   D．枯树周围）获得土样，用无菌水稀释，接种至以为唯一碳源的固体培养基上进行培养，另外，该培养基还应含有氮源、水、无机盐、生长因子和。

（2） 微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是和。从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B两种菌落（如下图所示）。如果要得到淀粉酶活力较高的菌株，应该选择（填“A”或“B”）菌落进一步纯化。

（3） 如果上图所示的平板培养基上除了上述A、B菌落外，还明显存在着另外一个菌落，但菌落周围并没有出现透明圈，据上述培养条件推测形成该菌落的微生物应属于生物。

（4） （二）枯草芽孢杆菌可分泌纤维素酶。研究者筛选到一株降解纤维素能力较强的枯草芽孢杆菌菌株（B菌），从中克隆得到了一种纤维素酶（C₁酶）基因。将获得的C₁酶基因与高效表达载体（HT质粒）连接，再导入B菌，以期获得降解纤维素能力更强的工程菌。
对克隆到的C₁酶基因测序，与数据库中的C₁酶基因编码序列相比有两个碱基对不同，但两者编码出的蛋白的氨基酸序列相同，这是因为。

（5） C₁酶基因以B链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为。为了使C₁酶基因按照正确的方向与己被酶切的HT质粒连接，克隆C₁酶基因时在其两端添加了SmaⅠ和BamHⅠ的酶切位点。该基因内部没有这两种酶切位点。图1中酶切位点1和2所对应的酶分别是。酶切后的C₁酶基因需要在酶的作用下与HT质粒连接构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、复制原点、、等。

（6） 转化形成工程菌的过程中，应先用处理枯草芽孢杆菌，使其处于容易吸收周围DNA的状态。

（7） 将纤维素含量为20%的培养基分为三组，一组接种工程菌，对照组1不进行处理，对照组2进行相应处理。在相同条件下培养96小时，检测培养基中纤维素的含量。图2结果说明工程菌降解纤维素的能力最强，推测对照组2的处理应为。

（8） 预期该工程菌在处理废弃物以保护环境方面可能的应用。（举一例）