组织培养基的成分及作用 知识点题库

（1） MS培养基的主要成分包括、和有机物，该培养基含有20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存的配制好的来制备．

（2） 培养基中添加不同浓度的激素，可影响植物细胞的发育方向．若诱导菊花外植体形成愈伤组织，应选择配方的培养基；若要诱导形成丛芽，应选择配方的培养基．

（3） 植物组织培养对无菌条件的要求非常严格，甚至超过微生物的培养要求，这是因为MS培养基 ， 易引起杂菌污染．对MS培养基进行灭菌，通常选用法．

（4） 接种若干天后，发现外植体周围出现杂菌污染，培养基其它部位没有杂菌，最可能的原因是 ．

（1） 过程①是把幼小的花药分离出来，在无菌条件下放在MS培养基上进行培养，配制该培养基时，需要的物质应该有．（至少答三种）

（2） 过程②是花药在MS培养基所提供的特定条件下脱分化，发生多次细胞分裂，形成，此过程进行细胞分裂的方式是．

（3） 过程③是诱导再分化出芽和根，最后长成植株，长成的植株（不考虑核与核之间融合）是植株，其特点是植株弱小，高度不育，生产上无推广应用的价值．若要使其结子结果，可在移栽后在幼苗茎尖滴加适宜浓度的B物质，通常用到的B物质是．

（1） 在此过程中能实现脱分化的花芽是，从实验结果可以看出，能诱导新花芽形成的条件是．在生产实践中，欲快速、大量获得此植物的花芽，可选用组．

（2） 若上述过程为花药离体培养，选择花药时，一般要通过来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期．确定花粉发育时期的方法有醋酸洋红法和．

（1） 此生产过程所用的核心技术是，此技术依据的原理是．接种前，要对人参根用进行消毒．

（2） 超净工作台是植物组织培养重要的设备，在使用前可以用进行消毒，接种前还要用擦拭工作台．培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于污染．

（3） 离体的组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基．常用的一种培养基是，其主要成分包括：．还常常需要添加．上述生产过程的培养基特点是，配制的培养基在之前要调节pH．

（4） 用少量酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量．

（5） 人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用方法，操作时应采用加热．

（1） 通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径：一种是花粉通过阶段发育为植株，另一种是在诱导培养基上先形成，再将其诱导分化成植株．这两种途径主要取决于培养基中的种类及浓度配比．

（2） 花粉植株的培养（如月季花药培养）包括材料的选取、材料的消毒、接种和培养等过程．材料的选取可先对花粉粒运用进行染色，然后通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期．

（3） 花粉的形成经历了四分体时期、、等阶段．该“四分体”与减数分裂过程中的四分体不同，是指由一个花粉母细胞经过减数分裂产生的连在一起的4个细胞．月季花药培养时的花粉粒最好是．

（4） 材料消毒主要有以下几步：

①将花蕾在酒精中浸泡约30s

②放入氯化汞液中2～4min

③无菌水清洗，然后用吸水纸吸干花蕾表面的水分

④用无菌水冲洗3～5次

正确的顺序是．

（5） 某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是．

（1） 辣椒中产生辣味的物质是辣椒素，不溶于水，易溶于有机溶剂，可以用的方法提取，其效率主要取决于，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量等条件的影响．

（2） 在对具有优良性状的辣椒进行组织培养，对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是，外植体的消毒所需酒精的体积分数是，用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是和纤维素酶，若愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是．

（3） 若组织培养过程中感染了某种霉菌，可采用法接种进行分离并计数．与这种方法相比，显微镜直接计数的不足是．

（1） 图中所示植物的基因型为AaBb（两对基因遵循自由组合定律），则①的基因型为，②的基因型为，④和⑤的基因型（填“相同”或“不相同”）。

（2） 在进行月季花药离体培养使，选择（用图中数字作答）细胞所示时期的花粉，培养成功率最高。选择花粉时，一般要通过来确定花粉是否处于合适的发育期，对于某些不易着色的花粉细胞核，需要使用法将花粉细胞核染成蓝黑色。

（3） 诱导花粉植株是否成功及诱导成功率的高低受多种因素影响，其中和是主要的影响因素。

（4） 若是菊花的组织培养过程，则一般选取未开花植株的来进行组织培养，对于菊花茎段的组织培养通常（填“需要”或“不需要”）添加生长素和细胞分裂素等植物激素。

（1） 用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜（填“受伤的” 或 “完好的”）叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是。

（2） 若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1：1，则说明甜蛋白基因已经整合到（填 “核基因组”“线粒体基因组” 或 “叶绿体基因组”）中。

（3） 假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用作为外植体进行组织培养。

（4） 通常，基因工程操作主要有 4 个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为。

（1） Ⅰ阶段时通常选择茎尖、幼叶等作为外植体，原因是。

（2） 在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是阶段。

（3） 为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比（m₁>2.0），以0.5 μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，细胞分裂素最高浓度应设为μmol/L。

（4） Ⅲ阶段时，科研人员分别选用浓度低于或高于n₃ μmol/L的生长素处理品种A幼芽都能达到最佳生根效果，原因是处理幼芽时，选用低浓度生长素时的处理方法为，选用高浓度生长素时的处理方法为。

（5） 在阶段用秋水仙素对材料进行处理，最易获得由单个细胞形成的多倍体。

（1） 核酸检测方法：目前，新冠病毒的实验室检测主要依赖核酸检测，包括以下两种方法：

①全基因组测序：病原体宏基因组测序(mNGS)是目前临床实践中最常用的病原体基因测序方法。mNGS技术首先需要将病毒RNA制备成测序仪可以识别和分析的DNA文库，需要将RNA产生的多种互补DNA片段，与连接后储存在中。然后使用测序仪对核酸序列进行检测。检测结果经生物信息学软件处理，最终展现出与病毒序列相关的信息。

②荧光PCR法：在常规PCR检测的基础上加入了荧光物质，通过监测发光信号来进行分析的一种方法。PCR利用的原理，实现目的基因的扩增，该过程首先需要设计引物，国家微生物科学数据中心公布了新冠病毒S蛋白的引物序列，已知其中一段引物的序列为CCCAACTTCTCCTCCTAGAAT，能否根据该引物序列设计出另一段引物的序列？（填“能”或“不能”），原因是。目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是。TaqMan是最为常用的一种具有荧光标记的核酸探针，能与目标基因特异性结合，利用原理是。

（2） 免疫学检测法：该技术基于血清中抗原和抗体的特异性结合进行检测。

①制备抗体：可以用到单克隆抗体的相关技术，其过程是取产生免疫反应的细胞与骨髄瘤细胞混合培养，使其融合，最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞可以在体外进行大规模培养或注射到，杂交瘤细胞的培养液中需要特殊的成分，通常需要加入等一些天然成分。

②制备抗原：对新冠病毒的主要结构蛋白基因进行扩增与克隆，构建基因的，导入大肠杆菌得到大量相关蛋白，纯化后就可以作为抗原进行检测。