蛋白质的提取和分离 知识点题库

（1） 为了从土壤中筛选能有效降解一种有害的、难于降解的有机化合物A的细菌。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌），该培养基为培养基，其中化合物A为目的菌提供等营养要素，在分离、纯化、计数过程中，则常采用法接种，实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是，如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中所形成的菌落如右图所示，造成这种结果的原因可能是。

（2） 用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用洗涤红细胞，用破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会，降低分离效果。

（1） 榨取果汁的过程中，发现榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是 用果胶酶处理，该物质包括等（写三种）；用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋，用反应式表示；果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在℃的冷冻箱中保存，此方法叫做．

（2） 对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入．培养后如果pH升高，指示剂将变红，因为细菌合成的将尿素分解成氨，使培养基碱性增强．

（3） 已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示．

①将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子也保留在袋内．

②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子移动速度最快．

③若将样品以2 000r/min 的速度离心10min，分子戊存在于沉淀中，则分子

可能不存在于沉淀中．

（1） 根据图甲可知，这是采用法对血红蛋白进行分离的过程，此方法是根据蛋白质的不同来分离蛋白质的。在对甲图所示的凝胶柱进行装填时，一定要装填均匀，不能有气泡存在，因为气泡会。

（2） 图乙表示对分离出的血红蛋白进行的过程，此操作的目的是。

（3） 图丙为向色谱柱中加样的过程。操作先后顺序应为（用图中数字和“→”表示）。

（4） 经过丙图所示的操作，连接好缓冲液洗脱瓶，并以较为恒定的流速缓慢加入缓冲液。如果能看到凝胶色谱柱中的红色区带，说明色谱柱制作成功。在对蛋白质进行分离纯化后，还需要对得到的蛋白质进行分子量的测定，我们通常使用的是的方法，这种方法中，蛋白质的迁移率完全取决于。

（1） 样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是。

（2） 血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是，若要尽快达到理想的透析效果，可以（写出一种方法）。

（3） 电泳利用了待分离样品中各种分子的等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。

（4） 一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是。