蛋白质的提取和分离 知识点题库

（1） 血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：、、和。

（2） 实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。

①加入柠檬酸钠的目的是。

②以上所述的过程即是，它包括、、分离血红收溶液和透析。

（3） 然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定。样品纯化的目的是。

（4） 电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

（1） 分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法,也叫做,是根据分离蛋白质的有效方法。

（2） 血红蛋白提取和分离的程序可分为、、和纯度鉴定。

（3） 洗涤红细胞的目的是,以利于后续步骤的分离强化。采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用低速短时间,然后用胶头吸管吸出上层透明的,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入洗涤,如此重复,直至上清液中没有黄色。

（4） 将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入和充分搅拌,红细胞破裂,释放出血红蛋白。

（1） 样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心．向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH 7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是 ．

（2） 血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是 ， 若要尽快达到理想的透析效果，可以（写出一种方法）．

（3） 血红蛋白的纯化是通过将相对分子质量大的杂质蛋白除去，

（4） 电泳利用了待分离样品中各种分子的等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离．

（5） 一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示．由图可知携带者有种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是 ．

（1） 植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、和 ． 从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，其作用是 ．

（2） 玫瑰精油称为“液体黄金”，多用于制造高级香水等化妆品．提取出的玫瑰精油不含有任何添加剂或化学原料，主要是通过法提取．

（3） 通常可用作为材料提取橘皮精油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是 ．

（4） 萃取胡萝卜素前，将胡萝卜彻底粉碎的主要目的是 ．

为了提高胡萝卜的出汁率并使胡萝卜汁变得澄清，需要加入酶．从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是 ， 原因是 ．

（5） 欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入制成选择培养基进行分离；若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是 ．

（6） 血红蛋白的提取方法可以采用 ， 该方法主要是利用血红蛋白的哪一特性将它与其他物质分开的？ ．

（1） 将实验流程图补充完整：A为，B为。

（2） 洗涤红细胞的目的是去除，离心速率过快和时间过长会使一同沉淀，达不到分离的效果。红细胞洗涤干净的标志是。

（3） 凝胶色谱柱装填完成后，立即连接缓冲液洗脱瓶，充分洗涤平衡凝胶12小时，其目的是。

（4） 实验中如何判断色谱柱制作是否成功。

（5） 判断纯化的蛋白质是否达到要求，需要进行蛋白质纯度的鉴定，在鉴定的方法中，使用最多的是。

（1） 从酵母菌中分离纯化的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量。

（2） 为了从自然界中获得分解木糖的酵母菌，首先要配制的选择培养基。

（3） 甲同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。

（4） 测定微生物数量常用的方法有稀释涂布平板法计数法和，统计菌落数目时，要选取菌落数目稳定时的记录作为结果，理由是。

（5） 乙同学提取了含酵母菌的木糖培养液80g，加入无菌水稀释至1000mL。3个适宜的培养基中分别接种0.1mL上述稀释液，然后置于适宜的条件下进行培养，最后统计出3个平板上酵母菌菌落数分别为116、118、126，则1g原木糖培养液中酵母菌数量约为个。应用稀释涂布平板法统计样品中活菌数目的原理是。

（1） 研究人员从不同环境地表上采集土壤、腐烂的树枝等接种到液体培养基，在28℃条件下摇床培养。

①液体培养基常采用法进行灭菌，摇床培养的目的是。

②取培养液1mL采用法接种于固体选择培养基上，于28℃恒温箱倒置培养。实验结果见下图。

选择菌落作为高产漆酶菌株，理由是。

（2） 实际生产中，通过培养白腐真菌获取的漆酶蛋白往往与其它物质混合在一起。因此，得到漆酶的粗提取物后，先要通过法进行纯化，再通过技术鉴定漆酶的纯度。

（3） 游离的漆酶稳定性差，在环境中易受温度、pH等因素的影响，且不易分离和回收，这在一定程度上限制了漆酶的工业化应用。请根据所学知识提出一项解决措施：。