蛋白质的提取和分离 知识点题库

（1） 凝胶色谱法，是根据分离蛋白质的有效方法．所用的凝胶实际上是一些．

（2） 实验前取新鲜的血液，切记要预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是．蛋白质的提取和分离实验中，首先要用（填写溶液名称）洗涤红细胞，其目的是去除．

（3） 在的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白．用法可分离出血红蛋白．

（4） 取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入pH为7.0的中，透析12h透析的目的是，透析的原理是： 。

（5） 人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白，其原因是．

（1） 在提取胡萝ト素的实验中，需要浓缩编，浓缩的原理是。

（2） 在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是；纯化之后的菌株需要用（选填“液体”或“固体”）培养基进行大量繁殖。

（3） 某小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是。

（4） 在凝胶色谱法制作过程中，装填凝胶柱时，不得有气泡存在，原因是。

（5） 发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，原因是。

（1） 该小组欲了解固定化酶与固定化细胞的技术。

①制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是。

②制备固定化酵母细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和溶液中形成凝胶珠。部分同学实验制得的凝胶珠不是圆形或椭圆形，其主要原因是。

（2） 该小组欲用甲、乙装置进行血红蛋白的提取和分离：

①为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是。

②甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是；乙装置中，C溶液的作用是。

③自己制作凝胶色谱柱时，在装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是

。

（1） 红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成。我们可以选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：

①实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入以防止血液凝固，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。此过程是样品处理，在获取红细胞内的血红蛋白时，较简便的办法是，然后再分离血红蛋白溶液。

②收集到的血红蛋白溶液在透析袋中透析，透析的目的是。

③透析结束后，需将得到的样品通过 法进一步的纯化，最后可经 凝胶电泳法进行纯度鉴定。

（2） 在固定化酵母细胞时，通常采用 法，加热溶解海藻酸钠时需注意加热，溶化好的海藻酸钠溶液应冷却至室温后再与已活化的酵母细胞充分混合。

（1） 筛选产乳糖酶的微生物L时，培养基中的唯一碳源应该是，在实验室培养微生物L时，一方面需要为L提供合适的营养和环境条件，另一方面需要，以获得纯净的培养物。

（2） 将微生物L研磨破碎得到提取液后，可采用凝胶色谱法分离纯化其中的乳糖酶分离过程中，比乳糖酶相对分子质量小的蛋白质，在凝胶中的移动速度比乳糖酶（填“快”或“慢”），原因是。

（3） 工业生产中，若要将乳糖酶固定化，一般（填“适宜”或“不适宜”）采用包埋法原因是，与使用游离酶相比，工业生产中使用固定化酶的优点是。

（1） 将实验流程补充完整：A为，B为。凝胶色谱法是根据而达到蛋白质分离的有效方法。

（2） 洗涤红细胞的目的是去除；离心速度过高和时间过长会使一同沉淀，达不到分离的效果。释放血红蛋白的过程中起作用的是。

（3） 在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是。

（4） 如果红色区带，说明色谱柱制作成功。

（1） 对石榴籽榨汁的过程中，为了提高出汁率并使果汁澄清，需要加入果胶酶将果胶水解成。为了节约成本，生产石榴汁时需要控制好果胶酶的用量，探究果胶酶的最适用量的实验思路是。

（2） 对石榴籽油进行萃取时，为不影响油脂品质和提取效果，应选用（填“自然晾干”、“高温烘干”或“新鲜”）的石榴籽。萃取前需粉碎石榴籽，目的是。

（3） 石榴籽中含有多种蛋白质，检测发现样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质情况如图所示，若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子移动速度最快；若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质，则分子距离点样点最远。