纤维素分解菌的分离 知识点题库

（1） 纤维素酶是一种 酶，包括C₁酶、Cx酶和葡萄糖昔酶三种，其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是 ．

（2） 自然界中不少微生物都具有分解纤维素的能力．要从土壤中筛选含有纤维素酶的微生物即纤维素分解菌，应在含有纤维素丰富的 土中采样．取回的土样中含有多种微生物，兴趣小组可在培养基中加入 来帮助筛选纤维素分解菌，目标菌落的特征是　 ．为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多纤维素酶的菌株，把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养，观察两组菌株菌落周围的情况，选出 （填“透明圈大的”“透明圈小的”或“无透明固的”）菌株即为所需菌株．

（3） 马、牛、羊等食草动物也具有消化纤维素的能力．若从马的胃中分离出纤维素分解菌，与从土壤中分离出的纤维素分解菌相比较，除了要调整培养基的pH外，还必须控制的条件是  ． 配制好的培养基还应进行灭菌处理，一般采用的方法是 ．从功能上看，该培养基是 　培养基．

（4） 对筛选得到的微生物还需进一步纯化培养以增加菌种的数量，为方便后续的计数，宜采用的纯化方法是 ．

（5） 用物理和化学的方法使筛选出的纤维素分解菌破裂后，用 的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开．分离出的纤维素酶还需进一步鉴定．纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可加入 试剂并水浴加热，判断提取物是否起到了降解纤维素的作用．

（1） 分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分形成的复合酶，其中的C₁酶和C_X酶使分解成．

（2） 实验室使用刚果红（CR）染色法可以实现对纤维素分解菌的鉴别，常用的刚果红染色法有两种，一种是先，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在时就加入刚果红．

（3） 为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落并加以鉴定，某同学设计了甲、乙两种培养基：

	酵母膏	无机盐	淀粉	纤维素粉	琼脂	CR溶液	水
培养基甲	+	+	﹣	+	+	+	+
培养基乙	+	+	+	﹣	+	+	+

（注：“+”表示“有”，“﹣”表示“无”）

据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）选择出纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于鉴定纤维素分解菌，原因是．

（1） 初次对土壤样品做实验，应该将土壤稀释的范围放一些。某同学进行严格的无菌操作，在三个培养基平板上，均滴加一定稀释倍数的土壤溶液0.1mL，若最终统计结果平均值为560，结果是否合理，最可能原因是。

（2） 图中选择培养时，一般采用培养基，好处是。培养基中加入酵母菌的作用是。鉴别培养基还需要添加作为指示剂，以确定选出分解纤维素的细菌。

（3） 纤维素酶是一种复合酶，在三种酶的作用下，将纤维素分解成葡萄糖。

（1） 从土壤中筛选纤维素分解菌时，所用培养基在成分上的特殊之处在于。

（2） 为分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

	酵母膏	无机盐	淀粉	纤维素粉	琼脂	CR溶液	水
培养基甲	+	+	+	+	-	+	+
培养基乙	+	+	+	-	+	+	+

注：“+”表示有，“－”表示无。

据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是。

（3） 采用压榨法提取橘皮精油时，为了提高出油率，需要将新鲜的柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。其中石灰水的作用是。将橘皮压榨后可得到糊状液体，为了获得乳状液，可以先用普通布袋除去固体物和残渣，然后通过进一步除去质量较小的残留固体物。

（1） 纤维素诺卡氏菌能将植物秸秆降解产生葡萄糖，主要依赖产生的纤维素酶，该复合酶至少包括三种组分，即。下图是在实验室中获得的纤维素诺卡氏菌接种量与降解纤维素所产生葡萄糖浓度的关系示意图。当菌接种量大于30/mL时，葡萄糖浓度下降，可能的原因是。

（2） 从细菌体内提取出来的纤维素酶首先要检测，以便更好地将酶用于生产。在降解秸秆产生葡萄糖的过程中，为了使酶能反复利用，可采用技术。

（3） 用获得的糖液发酵产生乙醇的过程中，发酵罐不应该完全密封，主要的原因是。

（4） 为检测发酵液中酿酒酵母的数量，取1mL发酵液稀释1000倍，分别将0.1mL的发酵液涂布在4个平板上。经培养后4个平板的菌落数分别是58、60、56和28，则发酵液中酿酒酵母的数量为个/mL。该统计结果往往低于实际活菌值，原因是。

（1） 在果酒、果醋和泡菜制作中，所用菌种具有以核膜为界限的细胞核的是

制作的发酵菌，该制作中对气体的控制方法是：关闭，打开。

（2） 腐乳制作中，盐和卤汁的使用十分重要，如果加盐太少，则腐乳容易；卤汁中酒的使用会影响腐乳成熟的时间，如果腐乳成熟的时间延长，则可能的原因是。

（3） 在腐乳制作和纤维素分解菌分离的操作中，都涉及相关酶，例如腐乳制作中，豆腐中的脂肪被分解成甘油和脂肪酸，纤维素分解菌产生的纤维素酶包括，其中的可以把纤维二糖分解成葡萄糖。

（1） 根据配方分析，筛选自生固氮菌应该选择号培养基，理由是。

（2） 筛选和鉴定纤维素分解菌，需选择号培养基并添加。如果实验过程中没有污染和其他失误，经过多次选择培养，平板中都出现多种差异明显的菌落，这样的结果说明。选择某种纤维素分解菌（记为D）测定其降解农作物秸杆的能力，农作物秸秆主要为D提供。

（3） 不同类型微生物混合培养常会出现因相互抑制而在菌落周围出现透明圈的现象，为确定两种微生物是否适合联合施用，在完全培养基上均匀涂布纤维素分解菌，再在其表面接种自生固氮菌，适宜条件下培养一段时间后，观察。

（4） 经检测，实验室条件下降解效率很高的纤维素分解菌在实际环境中降解率却很低，可能的原因是。

（1） 获得能降解原油的目标菌可从取样，样品经（无菌水/蒸馏水）稀释后涂布于以原油为唯一碳源的固体培养基上培养，分离纯化后获得目标菌A。

（2） 目标菌A成膜性差，不能有效控制原油向深层土壤渗透。研究人员将假单胞菌的bdlA基因（约1300bp）导入目标菌A体内，尝试构建成膜性好的工程菌。

①假单胞菌遭受环境压力时，会分泌大量胞外复合物将自身包裹于其中形成细菌聚集膜样物（生物被膜），体现了生物对环境的。

②图1为bdlA基因与pX系列质粒连接构建的重组质粒模式图，为初步检测构建是否成功，可选用限制酶对其切割，并对酶切产物及重组质粒进行凝胶电泳检测，结果如图2。据图可初步判断重组质粒构建成功，依据是。

（3） 上述方法获得的两种工程菌命名为KT2和KT5，在不同时间测定实验组中工程菌及对照组中的生物被膜总量相对值，结果如图3所示。该结果表明。

（4） 若要将以上工程菌用于原油污染土壤的修复，举一例说明下一步还应进行哪些方面的研究?