培养基对微生物的选择作用知识点题库

原油含有大量致癌的“多环芳烃”，分子结构十分稳定，有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。某小组以如何筛选出能降解原油的菌株并投入除污为课题设计了有关实验。有关说法正确的是（）

A . 用于筛选目的菌株的培养基其主要特点是以原油（多环芳烃）为唯一碳源 B . 培养基配制完成之后需进行消毒处理 C . 在选择培养基上形成的菌落，不是能分解多环芳烃的目的菌种 D . 筛选出目的菌种，可用平板划线法在培养基上进行接种和计数

培养流感病毒时应选择的培养基是（）

A . 固体培养基 B . 牛肉膏蛋白冻培养基 C . 活的鸡胚 D . A，B，C都可以

有关培养基配制原则表述正确的是（）

A . 每种微生物的培养基中都需要添加碳源、氮源、无机盐和水 B . 为微生物生长提供氮源的物质一定不能为微生物提供碳源 C . 配制培养基时，需要先调节pH，后进行高压蒸汽灭菌处理 D . 增加培养基中各种营养物质浓度能够提高微生物菌落数量

在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度一定，该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行处理．
（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：固体培养基且．若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装（填“前”或“后”）进行．
（3）在划线前，接种环应该在酒精灯火焰上．培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是或有氧条件抑制了这些细菌的生长．
（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是，有透明带菌落利用的氮源主要是，据此可筛选出目的菌．
（5） A细菌和B细菌都能降解该除草剂，研究发现以每克菌体计算，A细菌降解该除草剂的能力比B细菌要强，对此现象合理的假设是．

如图表示研究者进行尿素分解菌筛选的相关实验，请回答下列问题：

（1）酵母菌和尿素分解菌的遗传物质彻底水解的产物（填“相同”或“不相同”）。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成。
（2）进行过程①和②的目的分别是和；图中弧线上的“？”的具体操作是。I、Ⅱ号培养基常用的灭菌方法是。
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂。培养后，若指示剂变就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。

从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有（）

①尿素②有机氮化物③无机盐④有机碳化物⑤水⑥无机碳化物．

A . ①③④⑤ B . ②③④⑤ C . ①③⑤⑥ D . ②③⑤⑥

以下分离方法正确的是（）

A . 无氮培养基可以用于分离根瘤菌和硝化细菌 B . 单细胞蛋白可以采用蒸馏、萃取、离子交换等方法进行分离提纯 C . 用不含精氨酸的培养液可分离出能合成精氨酸的突变菌株 D . 用2mol/L的NaCl溶液将DNA提取分离出来

（1）泡菜是人们喜爱的食品，但在腌制的过程中会产生一定量的亚硝酸盐，危害人们的健康。研究人员检测了不同浓度的食盐、不同发酵阶段的泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如下图所示。
请回答：
①制作泡菜时如希望发酵快一些，可将蔬菜放在中浸泡1分钟后入坛。发酵坛中还可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香感和。
②据图分析，下列叙述错误的是（）
A．腌制泡菜的最佳食盐用量约为5%
B．过多的食盐可能会抑制发酵作用
C．腌制初期泡菜的亚硝酸盐含量上升
D．食用泡菜最安全的是腌制后3〜9天
③在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，在样品溶液中加入显色剂会生成色产物。绘制标准曲线时，可以亚硝酸钠的质量为横坐标，以为纵坐标。对样品和标准溶液的测定中，要用光程相同的。
（2）为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变，有如下实验方案。其中，平板影印指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种。请回答：

Ⅰ.图中扩大培养的过程中应选用培养基。利用分离法可获得A1培养皿上菌落。
Ⅱ.图中②过程培养基的配方如下：
成分
无机盐
蔗糖
葡萄糖
尿素
牛肉膏
水
琼脂
酚红
培养基
+
—
+
+
—
+
+
—
结合图形分析（“能”或“不能”）得出结论：该细菌可利用尿素作为氮源。理由是：。
Ⅲ.B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素，结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择，则应选取（A．a1 B．a2 C．b1或b2或b3 D．任意一个菌落）菌落继续培养在空白的A2培养皿中，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。
Ⅳ.预测上述A2和C培养皿中菌落的生长情况为（“相同”或“不同”），由此证明青霉素所起的作用是选择。
Ⅴ.下列关于微生物培养的叙述，正确的是（）
A．实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌
B．实验操作过程中必须打开超净台上的紫外灯和过滤风
C．涂布分离法，单菌落更易分开，但操作更复杂
D．采用划线分离时，在每次划线前都需蘸取菌液一次

已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。

Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5 g/L）。

Ⅱ号培养基：氯化钠（5 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量），X（15 g/L）。

Ⅲ号培养基：氯化钠（5 g/L），硝酸铵（3 g/L），其他无机盐（适量）。X（45 g/L）。

回答下列问题。

（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是。
（2）若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会，其原因是。
（3） Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是。
（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供和。

为了减轻废弃农作物秸秆对农村环境污染，某科研小组使用下图所示接种方法分离纯化分解纤维素的微生物用于生产。请据图回答下列问题：

（1）图中接种工具的名称是，制备培养微生物的培养基时，灭菌与调pH的先后顺序是。
（2）步骤②中，将接种工具冷却的原因是。
（3）图示接种方法是。
（4）为从富含纤维素的土壤中分离获得分解纤维素的微生物单个菌落，某同学配制了一个培养基（成分见下表）：

酵母膏

无机盐

淀粉

纤维素粉

琼脂

水

培养基

+

+

+

+

+

+

注：“+”表示有

据表分析，该培养基含有微生物所需的、氮源、水、无机盐四大类营养物质。该培养基（填“能”或“不能”）用于分离纤维素分解菌，原因是。
（5）对该微生物的优良菌种进行长期保存，可以采用的方法。

用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析正确的是（）

图片_x0020_119022414

A . 在图示固体培养基上可用平板划线法或涂布法接种病原菌 B . 未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异 C . 形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感 D . 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响

下图为筛选产脲酶细菌的过程，下列说法错误的是（）

图片_x0020_100001

A . 选择培养基中应以尿素为唯一碳源 B . 挑取单菌落后可用划线法进行接种 C . 鉴别培养基中可加入酚红作指示剂 D . 培养皿在接种微生物后需倒置培养

幽门螺杆菌是栖息在胃黏膜的螺旋形的革兰氏阴性菌(革兰氏阴性菌对万古霉素、两性霉素B等抗生素不敏感)，能产生有较强活性的脲酶，该酶能催化热稳定性低的尿素分解为氨和二氧化碳。因为胃液的强酸性，早期人们都认为没有细菌能在极酸的胃液中生存，1983年，澳大利亚科学家马歇尔“以身试菌”，提出幽门螺杆菌是胃炎、十二指肠溃疡或胃溃疡的主要致病菌，这-发现使这些疾病的诊断和根治迎来了曙光。请根据上述资料回答下列问题：

（1）下图中最可能代表幽门螺杆菌的结构模式图的是(填写字母)。
（2）提取胃炎患者的稀释液，分离得到幽门螺杆菌并统计其数量，分离时可将稀释液样品接种在以为唯一氮源的固体培养基上。欲得到预期的实验结果，接种过程用到的实验器材有 (填写字母)
（3）为研究培养幽门螺杆菌所需的气体条件，某研究小组利用半固体培养基(琼脂含量3.5g/L)对幽门螺杆菌进行培养。下图代表微生物可能出现的四种生长状态。

若培养微生物是酵母菌，则号试管代表其生长状态，若②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，则培养幽门螺杆菌的气体最适条件应为下列选项中的。

A．纯氧B.90%N₂. 10%CO₂C．无菌空气D.5%O₂、85%N₂、 10%CO₂
（4）将上述实验分离纯化得到的幽门螺杆菌进行扩大培养，采用布氏肉汤基础培养液进行培养，培养液中需加入混合抗生素(包括万古霉素、两性霉素B等)，其目的是。
（5）目前¹³C呼气检测是诊断幽门螺杆菌感染的方法之一。其做法是：让病人口服一定量的¹³C-尿素，约30分钟后检测待检者呼出的气体中是否含有¹³CO₂.¹³C-尿素呼吸检测的原理是患者消化道细胞内 (填“有"或“无")脲酶活性，若呼出的气体中含有¹³CO₂ ，则为的代谢产物。
（6）幽门螺杆菌导致的胃溃疡等疾病可通过同时服用多种抗生素根除。研究小组将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于幽门螺杆菌培养基表面，37⁰C培养4周，实验结果如下图所示。其中圆纸片A、B分别浸过抗生素A和抗生素B，圆纸片C浸过抗生素A、B的混合物。实验中圆纸片D用作实验对照，实验表明

随着生产生活和科技的发展，广泛应用很多微生物知识，请分析回答下列问题：

（1）利用蓝莓酿制的蓝莓酒，被称为“液体黄金”。如果酒的生产流程，压榨前需除去果柄，此操作要在冲洗（填“之前”或“之后”）进行。若从混杂的微生物中分离酿制蓝莓酒的菌种应使用培养基。喝剩的蓝莓酒开盖放置一段时间后会变酸，原因是。

（2）测定大肠杆菌数时，在稀释10⁵倍的培养基内，得到下表统计结果中准确可信的是组。对该菌种数目统计时，常用的方法是和显微镜直接计数法。但是，统计的菌落数也往往比实际活菌的数目低，是因为。

组别	平板数	统计的菌落数	取平均值
甲组	两个	250和220	235
乙组	三个	160、240和110	170
丙组	四个	280、200、340和160	245
丁组	五个	120、60、270、220和130	160

（3）将某杆菌的淀粉酶基因转入到利用淀粉能力较弱的酵母菌中，经筛选得到高效工程菌菌种，此过程依据的生物学原理是。以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种菌的发酵罐需要先排气。
（4）相关实验结束后，使用过的微生物培养基应进行后才能倒掉。

微生物与人类关系密切，虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的，请回答下列有关问题：

（1）下表为两种微生物的培养基配方。

A培养基

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄·7H₂O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4 g	2.1 g	0.2 g	10.0 g	1.0 g	15.0 g

B培养基

纤维素粉	NaNO₃	Na₂HPO₄·7H₂O	KH₂PO₄	MgSO₄·7H₂O	KCl	酵母膏	水解酪素
5 g	1 g	1.2 g	0.9 g	0.5 g	0.5 g	0.5 g	0.5 g

上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容到1 000 mL。

①如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，则需要选择上述哪种培养基？，该培养基能分离尿素分解菌的原因是。

②在该培养基中可加入指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定该种细菌能够分解尿素。

③从功能上来看，上述两种培养基均属于培养基。

（2）把牛肉膏蛋白胨固体培养基倒入平板，等培养基冷凝后，应将平板放置，这样做的目的是可防止造成污染。
（3）微生物接种的方法很多，平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？。
（4）微生物培养过程中还有什么方法或步骤要防止其他微生物污染（两点即可）
。

硒是一种生命活动必需的微量元素。亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。

请回答下列问题：

（1）在接种土壤样品之前，需要对①中的培养基进行高压蒸汽灭菌。灭菌时间到后，要先切断电源，待灭菌锅内温度自然下降至压力表降到零时再打开排气阀。这样做的目的是。
（2）在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中，用到的器具除了烧杯、酒精灯之外，还有，从功能上看，③中的培养基属于培养基，在④中，可根据对符合要求的目的菌株进行筛选。
（3）研究者要根据培养基④中的菌落数目来计算出②的培养液中的菌体数目，其依据的原理是：当样品的时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
（4）上述实验的各个环节都必须做到严格的操作，有些用品还必须进行灭菌处理。灭菌是指。

研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示．

（1）柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质．
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种．对新配制的培养基灭菌时所用的设备是．实验前需对超净工作台进行处理，对实验者的双手进行处理。
（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供．
（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈．可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果．

某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解X。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。下列相关叙述中错误的是（）

A . 甲、乙培养基均属于选择培养基，乙培养基组分中的Y物质是琼脂 B . 若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源 C . a、b、c培养瓶中的X溶液要有一定的浓度梯度 D . 筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，某菌株对X的降解量可能下降

回答下列（一）（二）小题。

（1）
（一）有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。

实验使用的培养基，含有营养物质和。制备培养基时，应将pH调至。图中继续实验中可能包含的实验操作有、、。
（2）通过观察菌落的特征可知，手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两研究性学习小组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同。你认为可能的原因是。
（3）实验中，两研究性学习小组采用的接种方法是。按图示操作取样固定实验员欲测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL细菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为10²的样品液接种到三个培养基上培养一段时间后，统计菌落数分别为38、40、42，则该手机屏幕的细菌数为个/cm²。
（4）（二）回答下列有关基因工程的问题：

I．研究人员将某细菌的抗虫基因C转入棉花细胞内，成功获得了抗虫转基因棉花，在一定程度上减少了杀虫剂的使用，减少了环境污染，提高了作物的产量和质量。
提取某细菌总RNA，经逆转录形成互补的DNA（cDNA），再利用PCR技术选择性扩增C基因的cDNA，PCR过程中DNA先后经历高温变性→复性→延伸过程，故反应体系中需加入酶。
（5）常用农杆菌与经后的外植体共培养一段时间完成转化，需先将C基因的cDNA插入到T质粒的T-DNA上并导入农杆菌，有利于。若要检测目的基因是否反向插入，（填“能”或“不能”）根据带标记的目的基因单链作探针的核酸分子杂交结果判断。
（6）
Ⅱ．基因编辑技术（CRISPR/Cas9技术）是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术，其原理是由一个向导RNA（sgRNA）分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割（如图）。请据图回答：

从CRISPR/Cas9系统作用示意图看，能够行使特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是。一般来说，在使用基因编辑工具对不同DNA进行编辑时，应使用Cas9和（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因的相关编辑。
（7） CCR5基因是人体的正常基因，其编码的细胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵辅助性T淋巴细胞的主要辅助受体之一。科研人员依据的部分序列设计sgRNA序列，导入骨髓造血干细胞中，构建sgRNA-Cas9复合体，以实现对CCR5基因的定向切割，变异的CCR5蛋白无法装配到细胞膜上，即可有效阻止HIV侵染新分化生成的从而有效减缓病症。

培养基可为目标微生物提供适宜的生长环境，下列叙述错误的是（）

A . 在LB培养基中加入甘露醇可为醋化醋杆菌提供碳源 B . 在LB培养基中加入较高浓度氯化钠可筛选嗜盐细菌 C . 将蔗糖豆芽汁培养基的pH调成碱性有利于霉菌生长 D . 尿素固体培养基的尿素可为目标微生物提供氮源

成分	无机盐	蔗糖	葡萄糖	尿素	牛肉膏	水	琼脂	酚红
培养基	+	—	+	+	—	+	+	—

	酵母膏	无机盐	淀粉	纤维素粉	琼脂	水
培养基	+	+	+	+	+	+

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