培养基对微生物的选择作用 知识点题库

（1） 在培养基配制过程中，加入了青霉素等抗生素，其目的是。纯化酵母菌时，常用的接种方法是。

（2） 该实验小组成功分离出某品种的酵母菌后，用移液器设定1mL的接种量分别接种于三个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，放罝在摇床上培养，分别设定摇床转速为210r/min、230r/min、250r/min，检测结果如图所示。从图中可看出，原因是。

（3） 该小组同学在计数时观察到酵母菌出现抱团现象。抱团现象可能是酵母菌混合不均造成的，因此取样前将锥形瓶中的培养液，取样时用吸管。如果该现象是培养液中酵母菌数目过多而造成的，需对培养液进行一系列的梯度稀释，稀释10倍的操作方法是吸取1mL菌液注入盛有的试管中，并。

（1） 若科学家在平板上，发现以某种菌的菌落为中心的透明圈，则表明此种菌为纤维素分解菌。

（2） 科学家培养过程中应保持恒温箱中的温度约为（填“4℃”“20℃”或“35℃”）。科学家采用稀释涂布平板法分离、纯化纤维素分解菌。在实验前，需要使用法对培养基进行灭菌；在接种前看，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，目的是。

（3） 在接种的过程中，需要使用（填“接种环”或“涂布器”）进行接种。科学家欲将筛选得到的纤维素分解菌进行大量培养，应选用培养基（填“液体”或“固体”），并以为唯一碳源，配置此培养基时，（填“能”或“不能”）使用牛肉膏作为氮源。

（1） 不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从环境采集。

（2） 富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。

（3） 下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，

请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。

（4） 配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行，接种前要进行，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。

（1） 研究未知的微生物时，一定注意进行规范的无菌操作，以防研究者。分离和筛选菌株的培养基为，其原理是。

（2） 分离和筛选出来的菌株，要进行纯化处理，纯化处理的常用方法有。纯化得到的菌株经培养会表现出稳定的菌落特征，菌落特征包括菌落的。

（3） 最后确定的炭疽病生物防治菌为RT-30菌株的理由是。使用后的培养基在丢弃前需进行。

（1） 在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO₃”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是。硝化细菌在没有碳源的培养基上（填“能够”或“不能”）生长，原因是。

（2） 用平板培养细菌时一般需要将平板（填“倒置”或“正置”）。

（3） 单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是。

（4） 有些使用后的培养基在丢弃前需要经过处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。

（1） 获得纯净培养物的关键是。实验室筛选微生物的原理是。制备的酵母菌培养基在进行倒平板操作时，为防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染，应。

（2） 用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，取其液体用涂布器涂布接种于以为唯一碳源的固体培养基上培养获得酵母菌菌落，用平板划线法纯化菌株时，划线的某个平板培养后，第一划线区域的第一条线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他线上有菌落，造成这种现象的原因可能是。

（3） 若要统计土样中的酵母菌数量，应采用法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基培养一段时间，这样做的目的是。

（1） 步骤①→③的培养过程中，培养液中加入多环芳烃菲作为唯一碳源，目的是。

（2） 步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能 。

（3） 步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是 。为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 。

（4） 接种环通过灼烧来灭菌，完成步骤④中划线操作,共需灼烧接种环次。

（1） 试验中所用培养基均含有水、葡萄糖、酵母浸膏和酒精，其中葡萄糖可为醋酸菌的生长提供。配制分离培养基时，除营养物质外，还需要添加2%的碳酸钙和，以便观察醋酸与碳酸钙反应后菌落周围形成的透明圈。

（2） 分离醋酸菌时，需将富集的醋酸菌培养液进行梯度稀释，采用法接种到分离平板上。30℃培养72h后，挑取透明圈的单菌落进行划线分离。分离出的单菌落接种到斜面培养基（含3%酒精）上并于4℃保藏。

（3） 取保藏的三个菌株分别接种于发酵培养液（含5%酒精）中，30℃培养5d后测产酸量， 筛选出高产酸的醋酸杆菌J2菌株。将J2与AS1.41分别接种到含不同浓度酒精的培养液中，30℃培养24h后测定活菌数量，结果如图2。由图 2 可知，酒精可醋酸菌的生长。与 AS1.41 相比，J2 菌株对酒精的耐受性。

（4） 获得 J2 菌株后，还可以采取的育种措施，进一步提高其酒精耐受性。

（5） 筛选出 J2 菌株后，其高产酸特性的遗传是否稳定还需检测，请写出基本过程。

（1） 如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择上述哪种培养基?，该培养基中的碳源主要是，能分离尿素分解菌的原因是配置培养基配方的特点是。

（2） 在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现。

（3） 从功能上来看，上述两种培养基均属于 培养基；从物理性质来看，A属于培养基。

（1） 从细胞结构来看，大肠杆菌属于生物。图中EMB培养基除了加入水、碳源、氮源和无机盐为大肠杆菌生长繁殖提供营养物质外，还需添加和伊红美蓝，大肠杆菌在此培养基上将形成色的菌落。

（2） EMB 培养基属于（   ）（多选）

（3） 将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这相当于微生物培养中的操作，这一操作常用的方法是和。

（4）

为了研究不同浓度的甲抗生素对A、B两种大肠杆菌的抑菌效果，做如下实验：取稀释后的A、B两种大肠杆菌菌液少许，分别与溶化并冷却至45℃左右的培养基混匀后倒平板各5个；待平板凝固后，在每个平板中央的培养基里各打一个直径为3mm的孔，并在孔中分别加入不同浓度的甲抗生素；在适宜条件下培养一段时间，可在孔的周围观察到一圈清晰区，按下图所示测量清晰区的直径，数据如表。

甲抗生素浓度（µg/mL）		5.0	7.5	10.0	15.0	20.0
清晰区直径（mm）	A大肠杆菌	0	5	8	13	17
	B大肠杆菌	5	7	9	14	19

①由表中数据可知，甲抗生素对A、B大肠杆菌的增长都有抑制作用，但大肠杆菌对甲抗生素敏感性较强。判断依据是

②为提高实验结果的可信度，合理的做法是

（1） 纤维素分解菌选择培养的培养基中添加的碳源为；除了碳源外，培养基中还应该含有的营养成分有 。

（2） 图甲所示接种方法主要用于 ，该方法不能用于测定菌体的数目，其原因主要是许多菌落并不是由形成的。

（3） 图乙中的培养对应于流程图中步骤(填写序号)。

（4） 若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为2×10⁷个/mL，若要在鉴别平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将锥形瓶中的菌液稀释倍。在鉴别培养基中含有KH₂ PO₄和Na₂ HPO₄ ， 其作用是①；②。

（5） 图乙中出现的无透明带的菌落，其代谢类型最可能是。

（6） 流程图中步骤⑤的操作中，应挑选产生了的菌落。

（1） 回答与产淀粉酶的枯草杆菌育种有关的问题：

Ⅰ.为快速分离产淀粉酶的枯草杆菌，可将土样用制成悬液，再将含有悬液的三角瓶置于80℃的中保温一段时间，其目的是。

Ⅱ.为提高筛选效率，可将菌种的过程与菌种的产酶性能测定一起进行：将上述悬液稀释后涂布于淀粉为唯一碳源的固体培养基上培养，采用显色方法，根据透明圈与菌落直径比值的大小，可粗略估计出菌株是否产酶及产酶性能。

Ⅲ.为了获得高产淀粉酶的枯草杆菌，可利用现有菌种，通过后再筛选获得，或利用转基因、等技术获得。

（2） 回答与植物转基因和植物克隆有关的问题：

Ⅳ.在用农杆菌侵染的方法进行植物转基因过程中，通常要使用抗生素，其目的一是抑制生长，二是筛选转化细胞。当选择培养基中抗生素浓度时，通常会出现较多假阳性植株，因此在转基因前需要对受体进行抗生素的检测。

Ⅴ.为提高培育转基因植株的成功率，植物转基因受体需具有较强的能力和遗传稳定性。对培养的受体细胞遗传稳定性的早期检测，可通过观察细胞内形态是否改变进行判断，也可通过观察分裂期染色体的，分析染色体组型是否改变进行判断。

Ⅵ.植物转基因受体全能性表达程度的高低主要与受体的基因型、培养环境、继代次数和长短等有关。同时也与受体的取材有关，其中受体为时全能性表达能力最高。