第二节 获取纯净的微生物培养物 知识点题库

（1） 该培养基中提供碳源的物质有 ，提供氮源的物质有 ．

（2） 该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是 ．

（3） 该细菌在同化作用上的代谢类型是 型．

（4） 该培养基可用来鉴别哪种细菌　（      ）　．

（1） 微生物的培养基的营养成分包括和特殊营养物质五大类，制作苹果酒时，酵母菌的培养基是 ．

（2） 在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是；在微生物培养过程中，灭菌和消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外所有的微生物的 ， 包括玻璃器皿常采用的灭菌方法为 ．

（3） 为了让培养的微生物保持旺盛生长状态，常用连续培养法，如图所示，通过连续培养，微生物能持续地以比较恒定的生长速率生长，因为 ． 在保存菌种时常选择方法进行长期保存．

（1） 该培养基中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有和维生素．从物理性质来看，该培养基属于培养基．

（2） 对该培养基进行灭菌时，可采用法．在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是 ．

（3） 为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为的菌落进行计数．该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是 ．

（1） 检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为．如图所示的四种菌落分布图中，图不是由该方法得到的是，而是利用方法得到的．

（2） 现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至10³稀释度．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为．

（3） 有三种材料或用具需要清毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手．其中需要消毒的是，需要灭菌的是．

（4） 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方．

成分	含量
蛋白胨	10.0g
乳糖	5.0g
蔗糖	5.0g
K2HPO4	2.0g
显色剂	0.2g
琼脂	12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

根据用途划分该培养基属于培养基（选择、鉴别）．该培养基中的碳源是．利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养．与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入．

（5） 以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是．

A．制作果酒    B．由果酒制作果醋     C．制作泡菜    D．制作腐乳．

（1） 该培养基为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型包括（答出两点即可）。能筛选出目的菌的原因是。

（2） 图中将细菌转到固体培养基上接种时，采用的方法是。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成色，则可说明该菌种能够分解尿素。

（3） 在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是（填序号），需要消毒的是（填序号）。

①培养细菌的培养基与培养皿  

②玻棒、试管、锥形瓶和吸管  

③实验操作者的双手

（4） 在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有（填序号）。

①所取土样不同      ②培养基被污染   ③接种操作错误      ④没有设置对照实验

（5） 实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉。

（1） 非洲猪瘟病毒是一种DNA病毒。请在答题纸的图中用方框标出DNA的基本单位。若以图中的甲链为模板转录RNA，其碱基序列是。（写在答题纸图空格中）

（2） 下表为某培养基配方，该培养基可用于培养微生物。试分析该培养基是否可用于猪瘟病毒培养？（是/否），为什么？。

KH2PO4	NaHPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	琼脂	营养成分溶解后， 自来水定容至1000mL
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	15g

抗原抗体检测目前普遍用于评价人和动物的免疫功能。现常见的检测样品种类包括检测抗原和抗体两种。

（3） 对送检样品进行抗原、抗体检测依赖于（抗原与抗原/抗原与抗体/抗体与抗体）发生的特异性结合。检测时用的抗体可以利用的方法来制备。

（4） 某同学体检时检测出乙肝病毒抗体，经了解，该同学之前并未接种过相应的疫苗，他获得的免疫来自于_________。

（5） DNA疫苗是直接将编码保护性抗原的基因，通过体外重组与质粒结合，直接注射，从而使动物体获得免疫力。若将来研发出猪瘟病毒的DNA疫苗，接种疫苗的猪是否可以称为转基因猪？（是/否），为什么？。

（1） 培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤：计算→称量→→→倒平板。

（2） 称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用挑取，放在上称量。由于牛肉膏和蛋白胨，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。

（3） 在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有等大肠杆菌生长所需的营养要素。

（4） 微生物纯化培养可以通过多种接种方法如和等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个，从而获得纯菌株。

（1） 采集样品与选择培养：从中采集样品；然后将样品适当稀释后接种于液体培养基中富集，从培养基的成分来看，应以 为碳源，从培养基的理化性质来看，应使用水来配制该培养基。进行选择培养的目的是。

（2） 鉴别培养与筛选：将选择培养后的样品涂布培养于起选择或鉴别作用的培养基上，培养得到单菌落，有些单菌落周围出现较大的分解圈，有些单菌落虽然长势良好，但周围不出现分解圈。后者菌落出现的原因是

（3） 微生物长势的测定：微生物数目的测定可以使用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法，两种测定方法各有特点。与显微镜直接计数法相比，下列选项中属于稀释涂布平板法的特点是 （填序号）。

①操作简便快捷   ②操作复杂耗时长  ③测量活菌数准确度高  ④测量总菌数准确度较高

（1） 检测培养基是否被污染，应采用的方法是。

（2） 本实验所用的接种方法为。接种时需要在酒精灯火焰附近，原因是。

（3） 伤寒是由伤寒沙门菌引起的，它可以导致胃肠炎和败血症，据表可知，能较为有效治疗该病的中药为  ，判断依据是。

（4） 若要设计实验探究黄莲对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度，可将lg/mL的中药煎剂进行梯度稀释，并以为对照，各取200μl加入细菌中央的牛津杯中，培养一段时间，抑菌圈直径为对应的中药煎剂浓度为最低抑菌浓度。

（1） 研究人员应从中采集土样，取土样用的小铁铲和盛土用的信封在使用前都要。

（2） 称取5g土壤样品，加入到装有45mL无菌生理盐水的锥形瓶中，振荡培养制成菌悬液，吸取1mL菌悬液加入到含有9mL无菌生理盐水的试管中，制成稀释倍的菌悬液，按此方法依次系列稀释；取0.1mL各浓度梯度的菌悬液分别接种到固体培养基上，该接种方法为。

（3） 由流程图可推测“目标菌”的呼吸类型为；培养微生物的锥形瓶及保藏菌种的试管均使用到棉塞，推测棉塞的作用为。

（4） 分离纯化后的微生物最初不一定具有降解敌敌畏的能力，所以要对菌株进行驯化，使其具有较高的速率来降解目标农药敌敌畏，从而筛选出耐药菌株。驯化的实质是在特定条件下，将耐药的微生物定向富集的过程。请你结合题意，简述驯化的实施方案： 。

（1） 活性染料废水含盐量高、色度高，对环境污染严重，拟利用微生物进行水体污染治理。回答下列问题：
Ⅰ.为获得治理活性染料废水所需的耐盐微生物，取海滩土样10g于90mL无菌水中制成土壤悬液，在恒温摇床上振荡后，用取0.1mL土壤悬液接种到含高浓度盐的培养基中培养5天，目的是。
Ⅱ.上述培养后的菌液经后涂布到含印染废水的固体培养基中，37℃培养，选择的单菌落若干分别接种在含一定营养物质的印染废水中振荡培养。
Ⅲ.为检验菌种对废水脱色效果，分别以和清水作为对照，选择染料分子吸收率最高的光波长，取培养后的废水上层清液测定吸光度。吸光度与菌株的脱色能力呈相关。影响脱色效果的因素除温度、pH、菌种、接种菌量外，还包括等（答出两点即可）。
Ⅳ.上述对高盐印染废水实施减量、回收、再生、再循环的治理措施属于的生态工程。

（2） 回答下列关于转基因大豆生产白细胞介素－21的问题：
Ⅴ.大豆种子的蛋白质含量高，是天然的蛋白贮存空间，可利用转基因大豆作为生产白细胞介素－21等外源重组蛋白。
Ⅵ.将无菌大豆子叶与已成功导入白细胞介素－21基因的共培养一段时间后，转入添加和适宜配比生长调节剂的MS培养基中培养。为进一步确定目的基因是否成功导入，在试管苗阶段，从组织中提取 DNA，并通过核酸分子杂交或技术进行鉴定。除利用完整大豆植株生产白细胞介素－21外，也可通过培养获得特定细胞系以实现产物的工业化生产。
Ⅶ.除植物外，哺乳动物细胞也常用于生产白细胞介素－21在动物细胞培养过程中，当细胞发生贴壁和现象时，加入胰酶可使其脱壁分散，处理一段时间后添加血清以。

（1） （一）草莓是春节市场上非常受欢迎的一种水果，但却存在易腐烂，难保存的问题。某科研团队为了确定腐烂草莓上的菌种类型和探究草莓的新产业开发模式，进行了以下一系列的研究。请回答：
科研团队用棉签刮取腐烂的草莓表面，然后用冲洗棉签获得菌悬液，然后利用法将其接种至LB固体培养基中，培养基中出现了均匀分布的单菌落。

（2） 腐烂的草莓非常软烂，原因是微生物产生的作用后使草莓组织更加松散。为了获得使草莓变软的微生物，用接种环分别刮取LB培养基上菌落的菌种，接种到培养基上，发现了以下两种情况：

①LB培养基中的菌落数量和种类更多，原因是。

②后者培养基上的菌落与在LB培养基上培养时相比，生长状况不尽相同，可能原因是。

（3） 科研团队为了制成草莓果酒，将草莓放入榨汁机制成黏稠的果酱，然后接种酿酒酵母进行发酵，结果发现酒精含量低，且极易造成污染。可以将果酱进行处理后再用于发酵。

（4）

（二）某种植物的根会产生一种次生代谢产物，该次生代谢产物具有很高的药用价值。在研究这种次生代谢产物合成的分子机制时发现，基因A表达沉默时才能产生，且有物质甲存在时会使基因A表达。物质甲在环境中非常常见，为了实现基因A的沉默，现设计将基因A反向连接到植物基因组中。基因A与Ti质粒结构如下图所示，箭头表示转录方向。

为了使基因A反向连接到Ti质粒上，选用EcoRI和BamHI酶进行切割并分离获得A基因，然后加入形成重组Ti质粒。为了保证重组Ti质粒在农杆菌中的稳定存在，需将工程发根农杆菌进行处理。

（5） 将含有重组T质粒的发根农杆菌与经过创伤处理的外植体共同培养一段时间，然后进行后，在培养基中加入以筛选出成功导入基因A片段的植物细胞。再转移至含有的培养基上培养得到愈伤组织。结果发现未更换培养基的情况下，就长出了较多的根，可能原因是发根农杆菌的T-DNA中含有基因。

（6） 为了检验转基因是否成功，应在（填“含”或“不含”）物质甲的培养液中将获得的根进行水培，发现只有部分能产生目标次生代谢产物。部分根无法产生次生代谢产物的可能原因是。