第二节 获取纯净的微生物培养物 知识点题库

（1） 绿茶是不经发酵制成的茶．在制作绿茶的工艺中，有一道工序是迅速将温度提高到70℃左右，目的是 ，从而保证茶叶鲜绿的颜色．

（2） 红茶菌液是一种传统的活菌饮料，制作流程是制作红茶糖液～接种红茶菌种～发酵卜红茶菌液．红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共同体，可以用 法分离纯化得到不同的菌种．在接种活菌之前，红茶糖液要先煮沸后冷却，这是为了

（3） 科学家利用植物组织培养技术实现优良茶种的大量繁殖，在组织培养过程中，无菌操作是成功的关键，因此用于培养的外植体要先做 处理；外植体要经过 和 过程获得胚 状体；用于植物组织培养的培养基中除植物激素、蔗糖和维生素等有机物外还应有

（4） 实验室分离提取色素的方法为 法．

（1） 研究人员称取普洱茶1g，加入 ， 制备稀释10²倍的茶叶水．再将茶叶水进行梯度稀释，获得A103、10⁴、10⁵倍的稀释茶叶水．取100μL稀释茶叶水，用法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4﹣5天，在培养基中选择菌落周围的较大的菌株作为目的菌株．

（2） 将获得的多个目的菌株接种于液体茶汤培养基中培养．已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量．先用绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值，与标准曲线比较，计算出该茶汤中游离氨基酸的量，氨基酸含量高的，即为的菌株．该实验中应测定的液体茶汤培养基的游离氨基酸含量，作为对照组的数据．

（1） 在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。

（2） 纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。

（3） 为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。

（4） 通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常采用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯（1分）附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

（1） 为了提高处理效率，必须进行微生物的纯化，试举出两种常用的微生物分离技术、。

（2） 在微生物分解有机物的过程中，固体物质变成可溶于水的物质在体外进行，该反应能在微生物体外进行的关键是微生物向环境中。

（3） 固定化微生物技术是将微生物固定在上，这些微生物在适宜条件下可以，在保持生物功能的同时使细胞密度增加。在固定化细胞技术中，包埋法技术成本低，操作更容易，但存在的缺点。包埋法常用的包埋材料有（写出两种即可）。

（1） 土壤中的尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成后，才能被植物利用。

（2） 为筛选出分解尿素的细菌，应配制的培养基以达到选择的作用。分解尿素的细菌不能以CO₂作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是 （填“自养”或“异养”）型生物。配制好的培养基需经过高压蒸汽灭菌，在装入待灭菌物品时，不要摆得太挤，以免。

（3） 对不同深度土壤取样统计菌落数目时，一般采用方法接种，接种后需每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止。对分离得到的分解尿素的菌种作进一步的鉴定，需加入，如果pH，指示剂将变红，可以初步鉴定该细菌能够分解尿素。

（1） 在接种土壤样品之前，需要对①中的培养基进行高压蒸汽灭菌。灭菌时间到后，要先切断电源，待灭菌锅内温度自然下降至压力表降到零时再打开排气阀。这样做的目的是。

（2） 在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中，用到的器具除了烧杯、酒精灯之外，还有，从功能上看，③中的培养基属于培养基，在④中，可根据对符合要求的目的菌株进行筛选。

（3） 研究者要根据培养基④中的菌落数目来计算出②的培养液中的菌体数目，其依据的原理是：当样品的时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

（4） 上述实验的各个环节都必须做到严格的操作，有些用品还必须进行灭菌处理。灭菌是指。

（1） 筛选淀粉分解菌的培养基应以为唯一碳源，从功能上看，该培养基属于。

（2） 为了从土壤中筛选出分解淀粉能力强的细菌，获得土壤样品培养液后应采用接种，培养一段时间后，用碘液处理培养基，会出现以菌落为中心的透明圈，测量菌落和透明圈的直径，结果如下表所示。结合表中数据分析，分解淀粉能力强的菌种是。

菌种	菌落直径（mm）	透明圈直径（mm）
细菌Ⅰ	5.1	11.2
细菌Ⅱ	8.1	13.0

（3） 若对（⑵）筛选得到的分解淀粉能力较强的菌种进行长期保存，应采用法。

（4） 实验后，对使用过的培养基要进行处理后再倒掉。

（5） 以淀粉为原料采用固定化酶技术生产葡萄糖，所需的酶更适合采用和法固定化。

（1） 配制酵母菌培养液时，需控制培养液的浓度，浓度过高则会导致另需加入一定剂量的青霉素等抗生素，其目的是，对培养液进行灭菌时，切断高压蒸汽灭菌锅热源后，须待观察到时，才能打开放气阀以释放锅内余气，最后开启锅盖取出培养液。

（2） 该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，用等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150r/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图1所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是。

（3） 图2是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线，下列判断依据中正确的有。

①稀释涂布平板法只计数活的酵母细胞，死细胞无法形成菌落

②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与活细胞一起计数

③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起长成一个菌落

④采用稀释涂布平板法计数时，因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目

（4） 通过如图3所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的4个平板上菌落数分别为69个、52个、44个、26个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为个。

（1） 咔唑可以为降解咔唑的微生物的生长提供。实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用（填方法）进行灭菌。

（2） 在过程④前，需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是。过程④后，平板培养基需要倒置，其目的是。

（3） 实验中初步估测咔唑浓度为0.5g·L^-1的摇瓶中，细菌细胞数为1.5×10⁷个·mL^-l ， 若每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证各个平板上长出的菌落数的平均值不超过150个，则至少应将摇瓶中的菌液稀释倍。

（4） 在相同且适宜条件下进行上述“多瓶培养”操作，一段时间后检测各培养瓶中咔唑的浓度，可以初步确定的培养瓶中含有高效降解咔唑的微生物。