第4节 蛋白质工程的原理和应用 知识点题库

（1） 图甲中①﹣⑤所示的工程流程主要属于 工程，此工程通过 ，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求，由此可见，此项工程崛起的原因之一是基因工程在原则上只能 ．

（2） 从雌性动物卵巢内获取的卵母细胞需要培养到 期才能完成受精作用，此时细胞中的染色体组数是 （图甲中雌性、雄性动物均为二倍体）．为了获得更多的卵母细胞，往往需要向雌性动物体内注入激素．

（3） 若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体 （填“X”或“Y”）的精子．

（1） 从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的进行改造．

（2） 以P基因序列为基础，获得P₁基因的途径有修饰基因或合成基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：．

（1） 过程①注射的A物质是，目的是使供体母鼠．

（2） 过程③把目的基因和运载体连接需要在 的催化下完成，过程④常用的方法是．

（3） 取自公鼠附睾中的精子需放入人工配置的 中培养一段时间后，才可进行体外受精．

（4） 图中过程⑥称为，为使代孕母鼠与供体母鼠生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕母鼠作 处理．

（5） 蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是．采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的转基因小鼠，操作时需选择发育到

或囊胚期的胚胎进行．若选用囊胚期的胚胎，操作过程需要特别注意是．

（6） 若通过上述操作获得的蛋白质，不完全符合人类的需要，则需要通过或基因合成，对现有蛋白质进行改造．

（1） 在上图所示的蛋白质工程流程中，A、B分别是、。

（2） 对获得的目的基因可采用技术以扩增其数量，依据的原理是。在该过程中所用酶的最大理化特点是。

（3） ⑤过程中将构建的基因表达载体导入受精卵常用的方法是；配制受精卵培养液时，通入一定浓度二氧化碳的目的是。

（1） 图甲中①〜⑤所示的生物工程为。

（2） 图甲中序号④所示过程叫做。

（3） 如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]；图中[3]的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（4） 若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体的精子。

（5） 为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做处理；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对动物做处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到期方能受精。

（6） 用技术处理发育到期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，要注意将均等分割。

（1） 从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的进行改造。 

（2） 以P基因序列为基础,获得P₁基因的途径有修饰基因或合成基因。所获得的基因在表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括(以图表示)。 

（3） 蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过和,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得目的基因,再经表达、纯化获得目标蛋白质,之后还需要对该蛋白质的生物进行鉴定。 

（1） 利用PCR技术扩增目的基因时知道基因的全部序列。在PCR体系中除了模板、原料外，还应加入。

（2） 蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过和，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。

（3） “CRISPR/Cas9”技术是目前常用改造DNA序列的一种方法，下图为向导RNA引导Cas9蛋白切割目标DNA示意图。其中Cas9蛋白是一种酶。Cas9蛋白和特定的向导引导序列可利用法导入到动物受精卵或干细胞中发挥基因编辑作用。

（4） 经改造后的细胞，若想工业化大量制备蛋白质P₁ ， 可利用和技术将改造细胞转化为即可产生P₁又能无限增殖的细胞，最后自培养液中可得到目的蛋白质。

（1） PCR技术扩增目的基因的前提是，以便根据此前提合成引物，引物的作用是。

（2） RT-PCR是以 mRNA为模板进行的特殊 PCR 技术，过程如图 1，该过程所需要的酶有和。

（3） 一定浓度范围内，模板浓度与 PCR 产物的浓度呈正比。在 RT-PCR过程中加入 TaugMan探针，原理如图 2 所示，Tag Man探针序列对应待扩增的目的基因的序列，在其5'端连接一个报告荧光基团（R），在其3'端连接一个淬灭荧光基因（Q）），探针完整时，报告荧光基团与淬灭荧光基团位置接近，发射的荧光被淬灭剂吸收，荧光强度很低。PCR 过程中 Tag 酶从5'端切断 Tag Man探针，释放荧光基团。根据荧光强度可对PCR 产物进行定量分析，原理是。根据 PCR 产物的浓度又可以估算的浓度，以此代表目的基因在特定组织中的表达量。

（4） 利用 PCR 技术，在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基，就可以在目的基因中带来定点突变，据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质，该过程属于（填工程技术）的范畴。