第1节 重组DNA技术的基本工具 知识点题库

下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体 (  )

A . 细菌质粒 B . 噬菌体 C . 动植物病毒 D . 细菌核区的DNA
在基因工程中选用的质粒往往带有抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是(   )

A . 提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B . 便于与目的基因连接 C . 加强质粒的感染性 D . 检测目的基因是否导入受体细胞
下图表示一项重要的生物技术,对图中物质a、b、c、d的描述,正确的是

A . 通常情况下,a与d需要用同一种限制酶进行切割 B . b能识别特定的核苷酸序列,并将A与T之间的氢键切开 C . c连接双链间的A和T,使黏性末端处碱基互补配对 D . b代表的是限制性核酸内切酶,c代表的是DNA聚合酶
与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是 (    )

A . 反转录酶 B . RNA聚合酶 C . DNA连接酶 D . 解旋酶

(1)目的基因最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做 .

(2)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造.如图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析:

①人工改造质粒时,要使抗虫基因能成功表达,还应插入 .

②人工改造质粒时,用限制酶Ⅰ处理,其目的是:

第一,去除和破坏质粒上的 (基因),保证T﹣DNA进入水稻细胞后不会促

进细胞的分裂和生长;

第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于 .

第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等.

③若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒.分别在含四环素或卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长情况是 

限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列.如图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列.箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列是什么(  )

A . BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列为﹣AATT﹣ B . BamHⅠ和HindⅢ;末端互补序列为﹣GATC﹣ C . EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列为﹣AATT﹣ D . BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列为﹣GATC﹣
既可用于基因重组技术又可用于细胞融合技术的是(    )
A . 病毒 B . 纤维素酶 C . 聚乙二醇 D . 质粒
土壤农杆菌侵染植物细胞时,Ti质粒上的T﹣DNA片段转入植物的基因组.利用农杆菌以Ti质粒作为运载体进行转基因,下列相关叙述正确的是(    )
A . 目的基因应插入T﹣DNA片段外,以防止破坏T﹣DNA B . 用Ca2+处理农杆菌,以利于其侵染植物细胞 C . Ti质粒是一种环状DNA分子,属于细菌的拟核DNA D . T﹣DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体
对如图所示粘性末端的说法错误的是(    )

A . 甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的 B . 甲、乙具相同的粘性末端可形成重组DNA分子,但甲、丙之间不能 C . DNA连接酶作用位点在b处,催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键 D . 切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
下图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位, 则相应的酶依次是(   )

A . DNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶 B . 限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶 C . 解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶 D . 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶
生物工程是一门生物科学与工程技术有机结合而兴起的一门综合性的科学技术,近些年来发展迅猛,硕果累累,下列关于生物工程的说法,不正确的是(     )
A . 植物体细胞杂交和动物细胞融合技术的原理是一样的,植物组织培养和动物细胞培养技术的原理是不同的 B . 从理论上讲,基因工程和细胞工程都可以定向改造生物的遗传性状和克服远缘杂交不亲和的障碍 C . 基因工程的工具酶有限制酶、DNA 连接酶等,细胞工程的工具酶有纤维素酶、胰蛋白酶等 D . 通过基因工程和发酵工程可以生产出乙肝疫苗、胰岛素、某些种类的单克隆抗体
下列关于生物实验的叙述,不正确的是(    )
A . 脂肪的鉴定实验中50%酒精的作用是杀死细胞,便于苏丹III染色 B . 在苹果的组织样液中加入斐林试剂,水浴加热后液体由蓝色变成砖红色 C . 分离叶绿体中的色素时,不同色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同 D . 猪的红细胞没有细胞核,故猪血不宜做DNA粗提取和鉴定的实验材料
某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内,来表达这产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:A是抗链霉素基因,B是抗青霉素基因,且目的基因要插入到基因B中,而大肠杆菌不带有任何抗性基因,下列叙述错误的是(    )
A . 大肠杆菌可能未导入质粒 B . 导入大肠杆菌的可能是重组质粒,也可能是质粒 C . 可用含青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D . 在含青霉素培养基中不能生长,但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
下图表示EcoRI限制酶的作用示意图。图中切点处发生断裂的化学键是(   )

图片_x0020_100006

A . 磷酸二酯键 B . 肽键 C . 氢键 D . 高能磷酸键
为增加蓖麻种子的含油量,研究人员尝试将酶 D 基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入蓖麻细胞并获得了转基因蓖麻品种。酶 D 基因和转运肽基因所含的三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如下图所示。

图片_x0020_100006

  1. (1) 研究人员需使用工具酶 ClaI 和处理酶 D 基因和转运肽基因,以得到(填图中字母)端相连的融合基因。
  2. (2) 将上述融合基因插入如图所示 Ti 质粒的 T-DNA 中,构建,并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含的固体培养基上培养得到单菌落,再利用液体培 养基振荡培养,可以得到用于转化的浸染液。
  3. (3) 研究人员通过技术将获得的转基因蓖麻细胞培育成转基因蓖麻植株;使用技术可在分子水平检测转基因蓖麻中的融合基因是否成功表达。
下图是SARS-CoV-2又称新冠病毒(+RNA)的结构模式图。生物学家根据RNA能否直接起mRNA作用而分成正链(+)RNA病毒与负链(-)RNA病毒两种。负链RNA病毒(如毒弹状病毒)的RNA不能作为mRNA,须先合成互补链(正链)作为mRNA,再翻译蛋白质分子。结合图回答下列问题。

  1. (1) SARS-CoV-2合成E蛋白的过程是,SARS-CoV-2与HIV在遗传物质复制过程的不同之处是。 
  2. (2) S蛋白是SARS-CoV-2表面主要抗原,要获取大量S蛋白,首先需要利用SARS-CoV-2获取能产生S蛋白的目的基因。其方法是从培养SARS-CoV-2的细胞中获取mRNA,构建文库,从中获取目的基因,然后加上构建完整的基因表达载体。 
  3. (3) 与新冠肺炎康复者捐献的血浆中的抗体相比,抗S蛋白的单克隆抗体的优点是,其制备的过程中,第二次筛选的目的是。 
  4. (4) 在对新冠疑似患者的检测中,有时会出现假阴性现象,除了核酸检测这种方法外,在分子水平上还可以利用方法进行检测。 
  5. (5) 新冠肺炎重症患者病情恶化的主要原因之一是病毒感染过度激活人体免疫系统,导致肺部出现炎性组织损伤。在修复这些患者的肺损伤方面,干细胞被寄予厚望。因此干细胞治疗成为一种可能,人的ES细胞在培养液中加入,就可诱导分化成不同类型的细胞,达到治疗目的。 
将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞,并培育成富含赖氨酸的玉米植株,如下图,请回答:

图片_x0020_100015

  1. (1) ①过程为构建表达载体,需用切割目的基因。为确保富含赖氨酸的蛋白质编码基因在玉米中表达,在构建基因表达载体时应插入特定的
  2. (2) ②过程把重组质粒导入土壤农杆菌,首先必须用处理土壤农杆菌,使土壤农杆菌转变为感受态,然后将 在缓冲液中混合培养完成转化过程。
  3. (3) 目的基因能否在玉米植株体内维持和表达其遗传特性的关键是。这需要通过检测才能知道,检测采用的方法是
  4. (4) ④过程将玉米细胞培育成植株,其培养基中除添加营养物质外,还需要添加植物激素,其目的是诱导外植体。组织培养过程中需要植物生长和繁殖的最适条件,否则在光学显微镜下可能观察到发生异常,进而使植物出现遗传不稳定甚至不育。
基因工程需要特定的工具,下列叙述错误的是(   )
A . 基因工程所需载体有质粒、细菌拟核DNA等 B . 载体均需有一个或多个限制酶识别位点 C . 限制酶、DNA连接酶和Taq酶作用的化学键都相同 D . 基因工程需要的工具中只有载体具有自我复制的能力
  2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法而获得诺贝尔奖。工业上青蒿素一般从黄花蒿中提取,产量低,价格高。基因工程和细胞工程等技术为培育出含青蒿素高的黄花蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量黄花蒿幼苗后,偶然发现了一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株中与青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。
  1. (1) 提取了高产植株的全部DNA后,要想快速、大量获得该突变基因可以采用PCR技术,该技术的原理是;PCR仪实质上是能够自动调控温度的仪器,因此,在合成子链时,必须加入酶,这种酶在高温下仍能保持活性。
  2. (2) 如果用黄花蒿发育某个时期的mRNA反转录产生的cDNA与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就称为黄花蒿的,获得的cDNA与黄花蒿细胞中该基因的碱基序列(填“相同”或“不同”)。
  3. (3) 将获得的突变基因导入普通黄花蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:

    用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上启动子,启动子是识别和结合的部位。

  4. (4) 检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取技术。
某科研团队运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,蓄意逃避监管,实施了人类胚胎基因编辑活动。该技术的原理是通过设计向导RNA中的识别序列,引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割(如图)。下列有关叙述正确的是(   )

A . 向导RNA可在RNA聚合酶催化下,以核糖核苷酸为原料合成 B . 向导RNA中的识别序列可与目标DNA单链特定区域进行碱基互补配对 C . Cas9蛋白的作用是破坏DNA特定位点脱氧核苷酸之间的氢键 D . 该技术由于存在脱靶等风险,可能会带来一系列安全性及伦理问题
最近更新