第1节 重组DNA技术的基本工具 知识点题库

下图表示用化学方法合成目的基因Ⅰ的过程。据图分析下列叙述正确的是(    )

A . 过程①需要DNA连接酶 B . 过程②需要DNA限制性核酸内切酶 C . 目的基因Ⅰ的碱基序列是已知的 D . 若某质粒能与目的基因Ⅰ重组,则该质粒和Ⅰ的碱基序列相同

研究人员发现无籽西瓜在培育过程中会出现空心果现象,且空心果的出现与P基因有关(P+表示正常基因,P-表示空心果基因,如果从三倍体西瓜中分离出含有P基因的DNA区段,用限制酶切后得到的290、170、220、460对碱基的四种片段,下列关于其基因型的判断中,正确的(   )

A . P+P-P- B . P+ P+ P+ C . P-P-P- D . P+ P-P-和P+ P+ P-
下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是(    )
A . 表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B . 表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点 C . 借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D . 启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
下列关于生物工程中酶的作用的叙述,不正确的是(    )

A . 纤维素酶可用于植物体细胞杂交 B . 胰蛋白酶可用于动物细胞培养 C . 限制性内切酶可用于提取目的基因,主要存在于微生物体内 D . DNA连接酶的本质是一种分泌蛋白,可用于目的基因与运载体的结合
如图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、Bam HⅠ的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tetR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、Bam HⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答:

  1. (1) 将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有三种。

  2. (2) 用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是

回答有关基因工程的问题:

(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生 末端.若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生 (相同,不同)粘性末端的限制酶.

(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是 .在用表达载体转化大肠杆菌时,常用 处理大肠杆菌,以利于表达载体进入:为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为 .为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成 ,常用抗原﹣抗体杂交技术.

如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞,先要将目睹基因插入农杆菌Ti质粒的 中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上.

草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡.但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长.目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦.

取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是否成功还未知.图1为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点.据图回答下列问题:

限制酶

MspⅠ

BamHⅠ

MboⅠ

SmpⅠ

酶切位点

C↓CGG

GGC↑C

G↓GATCC

CCTAG↑G

↓GATC

CTAG↑

CCC↓GGG

GGG↑CCC

(1)若A﹣C浇清水,D﹣F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是 

(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入 

(3)一个完整的基因表达载体除了具备复制原点、启动子和终止子外,还应包括 和 

(4)若需利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是 和 

(5)通常用 法将EPSPS基因导入植物体内.假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因 

“限制性核酸内切酶”作用的部位是(    )
A . 核苷和磷酸之间的键 B . 碱基之间的氢键 C . 两个核苷酸之间的键 D . 脱氧核糖和碱基之间的键
20世纪90年代,Cuenoud等发现DNA也有催化活性.他们根据共有序列设计并合成了由47个核苷酸组成的单链DNAE47,它可以催化两个DNA片段之间的连接.下列有关叙述正确的是(    )
A .  在DNAE47中,嘌呤数与嘧啶数一定相等 B . 在DNAE47中,每个脱氧核糖上均只连有一个磷酸和一个含N碱基 C . DNA也具有酶类似的催化活性 D . DNAE47作用的底物和DNA聚合酶作用的底物一定是相同的
下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件(  )
A . 具有某些标记基因 B . 决定宿主细胞的生存 C . 能够在宿主细胞中复制 D . 有一个或多个限制酶切点
如图为DNA粗提取过程中的一些重要操作,请据图回答下列问题.

  1. (1) 正确的操作顺序是
  2. (2) C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是
  3. (3) A步骤中所用酒精必须经过才能使用,该步骤的目的是
在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是(   )
A . 限制酶和DNA连接酶 B . 限制酶和水解酶 C . 限制酶和载体 D . DNA连接酶和载体
下列关于染色体和质粒的叙述,正确的是(      )
A . 染色体和质粒的化学本质都是DNA B . 染色体和质粒都只存在于真核细胞中 C . 染色体和质粒都与生物的遗传有关 D . 染色体和质粒都可以作为基因工程的载体
下列关于基因工程的叙述,正确的是(      )
A . 通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理质粒的DNA B . DNA连接酶和运载体是构建重组质粒必需的工具酶 C . 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D . 质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器
下列关于酶的说法,正确的是(  )
A . 限制酶广泛存在于各种生物中,其化学本质是蛋白质 B . 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C . 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D . DNA连接酶可将单个核苷酸加到某个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键
下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述,错误的是(  )
A . 去除植物细胞壁时所用的纤维素酶溶液的渗透压不宜过低 B . 用限制酶从质粒上切下一个目的基因需脱去4个水分子 C . 用胰蛋白酶处理植物愈伤组织可得到单个的愈伤组织细胞 D . PCR仪扩增目的基因时加入解旋酶有利于提高解旋的效果
下表为几种限制酶的切割位点,相关叙述错误的是(   )

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A . 限制酶能够水解DNA上特定的磷酸二酯键 B . BamHⅠ切割的序列能被BclⅠ切割 C . BclⅠ切割的序列能被Sau3AⅠ切割 D . 以上信息说明限制酶具有特异性和专一性
基因工程操作所使用的工具中,被称为基因“剪刀”的是(   )
A . DNA连接酶 B . DNA聚合酶 C . RNA聚合酶 D . 限制性核酸内切酶
M是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路,利用小鼠制备一种膀胱生物反应器来获得M,基本过程如图所示。回答下列问题:

  1. (1) 基因表达载体导入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程叫小鼠常用的受体细胞是,原因是
  2. (2) 如果将外源基因导入受体细胞,则外源基因会随机插入到受体细胞的 DNA中,该受体细胞培养的胚胎有的可以发育成转基因动物,有的却死亡,请分析因外源基因插入导致胚胎死亡最可能的原因是
  3. (3) 转基因小鼠的早期胚胎培养过程中,培养液成分除一些无机盐和有机盐外,还需添加物质。
下图所示三个DNA片段依次表示EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制酶的识别序列与切割位点。下列有关叙述正确的是(   )

A . 限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的 B . 这三种限制酶的识别序列都是由6个核苷酸组成的 C . 用这三种限制酶切割DNA片段会形成三种相同的黏性末端 D . 图中的DNA片段被EcoRⅠ切割后,会增加两个游离的磷酸基团
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