研究人员发现无籽西瓜在培育过程中会出现空心果现象,且空心果的出现与P基因有关(P+表示正常基因,P-表示空心果基因,如果从三倍体西瓜中分离出含有P基因的DNA区段,用限制酶切后得到的290、170、220、460对碱基的四种片段,下列关于其基因型的判断中,正确的( )

(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生 末端.若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生 (相同,不同)粘性末端的限制酶.
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是 .在用表达载体转化大肠杆菌时,常用 处理大肠杆菌,以利于表达载体进入:为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为 .为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成 ,常用抗原﹣抗体杂交技术.
如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞,先要将目睹基因插入农杆菌Ti质粒的 中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上.
草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡.但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长.目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦.
取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是否成功还未知.图1为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点.据图回答下列问题:
限制酶 | MspⅠ | BamHⅠ | MboⅠ | SmpⅠ |
酶切位点 | C↓CGG GGC↑C | G↓GATCC CCTAG↑G | ↓GATC CTAG↑ | CCC↓GGG GGG↑CCC |
(1)若A﹣C浇清水,D﹣F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是
(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入
(3)一个完整的基因表达载体除了具备复制原点、启动子和终止子外,还应包括 和
(4)若需利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是 和
(5)通常用 法将EPSPS基因导入植物体内.假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因

