基因工程的应用 知识点题库

（1） 早熟基因和抗除草剂基因位于 （填“同源”、“非同源”）染色体上．植株M的一个细胞中最多含有 个抗除草剂基因．

（2） 抗除草剂基因在表达时，　 与DNA分子的某一启动部位相结合，以其中的一条链为模板并通过 聚合成与该片段DNA相对应的RNA分子．

（3） 亲本中不抗除草剂早熟森林草莓的基因型有 种，抗除草剂晚熟森林草莓的基因型是 ．F₂抗除草剂晚熟中纯合子的概率为　 　．

（4） 让植株M与不抗除草剂晚熟森林草莓进行一次杂交，请预测杂交结果，并用遗传图解说明． 

（1） 实验步骤①所代表的反应过程是．

（2） 步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制鞋内切酶和酶，后者的作用出是将限制性内切酶切割的和连接起来．

（3） 如果省略步骤③而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能，也不．

（4） 为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可与进行抗原一抗体特异性反应实验，从而得出结论．

（5） 步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基序列（相同、不同），根本原因是．

（1） 一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有和个游离的磷酸基团。

（2） 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越。

（3） 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是。

（4） 与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。

（5） 为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入酶。

（6） 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。

（7） 为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

（1） 基因工程的核心步骤是，此步骤的目的是使目的基因。

（2） 上图中的抗盐基因可以作为基因工程的    基因，其作用是。

（3） 在构建重组质粒时，应选用（填限制酶的名称）对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以防止目的基因和质粒自身环化。

（4） 基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖所必需的成分外，培养基A和培养基B分别含有、。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是菌落中的细菌。

（5） 为了检测抗盐基因是否培育成功，既要用放射性同位素标记的    作为探针进行肝DNA杂交检测，又要用方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

（1） 苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白，能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列，科研人员通过法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是。

（2） 重组质粒1和Bar基因（草丁膦抗性基因）各自用XbaⅠ酶处理，得到酶切片段。重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，目的是防止。

（3） 将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。

（4） 提取上述重组白僵菌全部mRNA，加入酶，获得cDNA，再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应，用以检测毒蛋白基因是否完成了。在PCR反应体系中除引物、模板外还需加入。

（5） 科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的，以判断重组白僵菌的杀虫效果。

（1） 完成过程①需要的酶是；过程①的最后阶段要将反应体系的温度升高到95℃，其目的是使RNA链和链分开。

（2） 过程③中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使键断开，形成目的基因的黏性末端是（选填“TCGA-”或“-TCGA”）。用种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是使目的基因定向连接到载体上（或防止目的基因和质粒自身环化）。

（3） 过程⑥是否成功导入，可将大肠杆菌培养在含有的培养基中进行筛选。

（4） 利用SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，目的是通过荧光显微检测间接判断ET_A基因能否。

（5） 内皮素能刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性，从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ET_A达到美白祛斑效果，这是因为ET_A能与内皮素结合，减少了内皮素与黑色素细胞膜上的结合，抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。

（1） 研究表明，RNA酶广泛存在而稳定，RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA的降解。病毒核酸检测是新冠肺炎诊治的关键一步，常采用核酸检测试剂盒（RT-PCR技术——逆转录荧光PCR技术）进行检测。RT-PCR技术首先经酶的作用，以病毒RNA为模板合成，再以其为模板，扩增合成目的片段。不直接用病毒RNA进行核酸检测，而采用RT-PCR技术的原因是。

（2） 得到足够量的逆转录病毒DNA之后，可用放射性同位素将其标记作为探针，利用技术，按照原理对待测人员进行核酸检测。如果显示出，即为阳性。

（3） PCR技术中使用的Taq酶是来自于温泉的一种嗜热菌，该菌能在高温环境中生长的特殊本领是由细胞内直接决定的。

（1） 途径Ⅰ和Ⅱ都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是。途径Ⅰ与途径Ⅱ相比，生产的疫苗安全性更高的是途径。

（2） 途径Ⅲ中，过程①的操作需要酶。途径Ⅲ中所示技术的核心是（用图中数字作答）。

（3） 途径Ⅳ生产的DNA疫苗在动物细胞中表达引起机体免疫应答。与DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更有优势，这是因为mRNA不需要进入，无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险，且易被水解，不会遗传给子细胞。

（4） 该病毒表面蛋白A为主要抗原，由病毒的A基因控制合成，为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。

（1） 该研究人员在制备³²p标记的DNA片段甲时，所用dATP的α位磷酸基团中的磷必须是³²p，原因是。

（2） 该研究人员以细胞为材料制备了染色体样品，在混合操作之前去除了样品中的RNA分子，去除RNA分子的目的是。

（3） 为了使片段甲能够通过碱基互补配对与染色体样品中的W基因结合，需要通过某种处理使样品中的染色体DNA。

（4） 该研究人员在完成上述实验的基础上，又对动物细胞内某基因的mRNA进行了检测，在实验过程中用某种酶去除了样品中的DNA，这种酶是。

（1） 图中过程a是利用处理动物组织，分散细胞。微载体加入培养罐中后，通过搅动使其保持悬浮状态，便于细胞的，故答案为：用的微载体颗粒直径应尽可能小。

（2） 图中利用培养罐进行动物细胞的体外培养所需的条件是的环境、营养、温度、pH和渗透压、气体环境。

（3） 图中制备单克隆抗体的过程中，应先用筛选出，然后培养。

（4） 利用基因工程可以产生干扰素，可以通过技术，将重组DNA分子导入哺乳动物的中，并送人母体，使其发育成转基因动物。