题目

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的切位点。请回答下列问题： （1） 一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有和个游离的磷酸基团。 （2） 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越。 （3） 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是。 （4） 与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。 （5） 为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入酶。 （6） 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。 （7） 为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 答案： 【1】0【2】2 【1】高 【1】Sma Ⅰ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 【1】质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 【1】DNA连接 【1】鉴别和筛选含有目的基因的细胞 【1】蔗糖为唯一含碳营养物质

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