题目
某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、 BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示,请回答下列问题。
(1)
基因工程的核心步骤是,此步骤的目的是使目的基因。
(2)
上图中的抗盐基因可以作为基因工程的 基因,其作用是。
(3)
在构建重组质粒时,应选用(填限制酶的名称)对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割,以防止目的基因和质粒自身环化。
(4)
基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖所必需的成分外,培养基A和培养基B分别含有、。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是菌落中的细菌。
(5)
为了检测抗盐基因是否培育成功,既要用放射性同位素标记的 作为探针进行肝DNA杂交检测,又要用方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。
答案: 【1】基因表达载体的构建【2】在受体细胞稳定存在和遗传,且可以表达和发挥作用
【1】标记【2】鉴定和筛选出含有目的基因的受体细胞
【1】SalⅠ和HindⅢ
【1】氨苄青霉素【2】四环素(或氨苄青霉素和四环素)【3】4和6
【1】抗盐基因【2】一定浓度的盐水浇灌烟草植株(或将烟草植株移栽到盐碱地中)