培养基对微生物的选择作用 知识点题库

（1） 与酵母菌相比，乳酸菌在结构上的主要区别是 ， （有、无）染色体．

（2） 本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙，乳酸菌在 （生理过程）中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈．从物理形态分析，本研究使用的培养基属于（类型）．

（3） 在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，把锅内水加热煮沸，必须 后，将锅密闭，继续加热以保证锅内气压上升，达到121℃．灭菌后的培养基应适当冷却后，在 附近倒平板．

（4） 请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤：

步骤1：分别取 加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到50℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板．

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种．

步骤3：将接种后的三组培养基和一个 都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况．

（1） 富集培养时，为达到筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时不应添加．培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，其目的是．

（2） 进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板．此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，其中添加了一定量的 ． 倒平板时，要待高压灭菌后的培养基 ， 再在附近操作．平板冷凝后，需置于恒温箱中1﹣2天后再用于接种，目的是 ．

（3） 分离纯化培养后，得到8种形态特征有所不同的单菌落．经染色鉴定，其中3种能产生PHB．那么如何进一步筛选出高产PHB的菌种呢？请说出你的实验思路．

（1） 在培养霉菌时需要将培养基的pH调至，培养细菌时需要将pH调至。

（2） 维生素是培养许多微生物需要添加的特殊营养物质，维生素对细菌的繁殖速度具有明显的促进作用。请利用以下使用材料和用具设计一个实验，探究维生素对醋酸杆菌繁殖速度是否具有促进作用。请完成下列实验思路、预期结果和结论。

材料用具：未添加维生素的完全培养基A，添加了适量维生素的完全培养基B，醋酸杆菌菌液，其他用具齐全。

实验思路：。

预期结果与结论：。

（1） 木霉可用加入作为唯一碳源的（按用途分）培养基加以分离。

（2） 配制培养基还需满足木霉对pH的需求，应在灭菌（填“前”或“后”）调节pH。探究木霉降解杀虫剂S的适宜pH，可向含有等量木霉、不同pH的培养基中分别加入等量杀虫剂S，几天后检测。

（3） 配制好的培养基应在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上，以判别培养基是否被污染。欲测定木霉的数目，可用计数板直接计数。若将100 mL含木霉的土壤样液稀释10⁵倍，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为121个（空白对照组无污染），则原来的100 mL样液中含有木霉个，而原土壤样液中的实际值与计算值相比会。（偏大、偏小或相等）

（1） 各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，从细胞中元素组成的角度考虑，阐述为什么大多数培养基需要提供氮源。B培养基中氮源是；A培养基只有能合成的细菌才能在该培养基上生长，因此该培养基属于选择培养基；从同化作用类型看，用A培养基培养的细菌属于。

（2） B培养基可以培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑、和滲透压等条件。在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行(消毒、灭菌）。

（3） 培养大肠杄菌时，在接种前需要检測培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。

（4） 若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。

（1） 经检测发现，生物滞留池内PAHs中的芘含量相对较高，研究者尝试筛选能降解芘的菌种：

①筛选菌种的基本操作步骤如下，请将下列方框内字母后面内容补充完整：a；b；c。

②在对培养基进行高压蒸汽灭菌时，发现灭菌锅内压力达到100kPa而温度未达到121℃，为同时达到设定的温度和压力要求，此时应该（填操作过程）。

（2） 科研人员筛选出在生物滞留池中占比较高且对芘具有较高耐受性的菌株作为受体菌，运用转基因技术获得高效降解芘的工程菌，回答下列相关问题：

①研究者先用PCR技术扩增能高效降解芘的外源基因，但外源基因序列两端无限制酶酶切位点，根据图1和表信息推测，扩增外源基因时应在所用的一对引物一端分别加上的限制酶识别序列是。

限制酶识别序列

限制酶	识别序列
BamHⅠ
HindⅢ
EcoRⅠ
XbaⅠ

②将基因表达载体与经Ca²⁺处理的处于的受体菌细胞于缓冲液中混合，完成转化过程。

③将完成转化的受体菌接种在加有的培养基上初步筛选后，再进一步检测、鉴定。

（1） 纤维素分解菌的筛选

①从庄稼地、烂稻草堆中分离得到纤维素分解菌。由此说明寻找目的菌株的思路之一是。

②初步筛选的过程：在不含糖类的固体培养基上铺一张去除了淀粉的滤纸，再在滤纸上等距离地放9个小土粒，然后置于底部盛水的培养箱中培养几天。滤纸发生液化。滤纸去除淀粉的目的是，以滤纸的液化程度作为的标志。

③筛选到纤维素分解菌是混合菌，通过纯化得到的多种菌株单独存在时分解能力都较差，试分析原因：。

（2） 蛋白质分解菌的筛选

①取土样，用进行稀释，放在摇床上振摇一段时间，振摇的目的是使菌体。

②将土壤悬浮液接种在固体培养基上，通过测量判断菌株对蛋白质的分解能力。

③将初步筛选的菌株接种到以酪蛋白为唯一氮源的液体培养基中。控制摇床的转速和，振荡培养24h。

④测定酪蛋白的含量：已知酪蛋白与福林-酚试剂反应产生蓝色，与蛋白质的含量成正比，可用法定量。步骤如下：第一步。标准曲线的制作。用蒸馏水配制。与福林-酚试剂反应后，测定并制作以的标准曲线。第二步，样品的测定与计算。

（1） 用于生产生物柴油的植物油不易挥发，不宜选用（填“蒸馏法” 或“压榨法”或“萃取法”）从油料作物中提取。

（2） 筛选产脂肪酶细菌时，配置的培养基应以为唯一碳源， 从功能上看该培养基为。 对细菌培养基进行灭菌，宜采用法。为确定培养基灭菌是否彻底，需要设置对照组，将未经接种的灭菌培养基与接种后的培养基在相同且适宜的条件下培养一段时间，如果则可说明所用培养基是无菌的。

（3） 图示分离产脂肪酶细菌用的方法是，其中操作正确的是。

 

（4） 从纯化培养得到的细菌中分离提取脂肪酶后，可与混合，通过测定单位时间、单位体积中生物柴油的生成量，来确定该脂肪酶的活性。

（1） 沤麻是获取黄麻纤维的重要步骤，主要是在潮湿环境中利用一些细菌的作用分解黄麻韧皮部的果胶，从而将麻纤维释放出来，以便于后续处理。实验小组尝试从收割后的黄麻地里分离出高效分解果胶的细菌，应选用以为唯一碳源的固体培养基来筛选目的菌。有同学建议先将土壤悬液接种到液体选择培养基中培养一段时间后再接种到固体培养基中进行筛选，这样做的好处是。若要筛选纤维素分解菌，则需要在培养基中添加染液，以方便挑选目的菌株。

（2） 小华同学在使用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。培养基灭菌后，小华用平板划线法分离土壤浸出液中的目的菌，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上均不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落的不当操作可能有（答2点）。

（3） 分离出目的菌后，某同学尝试用海藻酸钠对目的菌固定化，以便于重复使用，结果凝胶珠难以成形，导致实验失败的原因可能是。固定化细胞失败后，该同学又尝试分离目的菌中分解果胶的酶，他可以采用的方法有（答2种）。

（1） 从物理性质上看，伊红美蓝培养基属于培养基，原因是培养基配方中含有。在乳糖蛋白胨培养基中，提供氮源的物质有；NaCl除了提供无机盐外，还具有的作用。

（2） 高压灭菌条件常为121℃、15min，但乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，因为某些成分在121℃会被破坏，而选用了115℃，为了达到相同灭菌效果可以。

（3） 研究小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B，A管中加入1mL待测水样，B管不做处理，然后都放入培养箱中培养24h。若A试管产生气体，还不可以提示水样可能被大肠杆菌污染，这时还需要再观察试管中的颜色变化，若A试管出现时，则提示水样被大肠杆菌污染。

（4） 该小组为计数大肠杆菌的数目，采用法分别将0.1mL菌液接种到三个培养基上进行培养，待菌落数目稳定后，统计三个平板上的黑色菌落数分别为4、3、2，估算出每毫升水样中含30个大肠杆菌。有同学指出，估算的大肠杆菌数目不可信，其原因有、。

（1） 从物理性质上讲，培养液甲与培养基乙的成分的区别是，培养基乙中尿素主要为微生物生长提供。

（2） 若要对培养基乙中的微生物进行鉴定，可在培养基中加入，观察菌落周围是否有色出现。

（3） 称取1.0g某土壤样品转入99mL无菌水中，再经100倍稀释后获得低密度菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在多个固体培养基上，若经培养后平均长出了46个酵母菌菌落，则该样品中每克土壤约含酵母菌个。该方法统计的菌落数往往比实际活菌数（填“偏高”或“偏低”），原因是。