生物技术在其他方面的应用 知识点题库

（1） 图中①是用切割，②是，④是，⑤是。与④相比，cDNA文库的基因中 (填“有”或“无”）启动子（具有启动作用的DNA片段），基因的数量 (填“多”、“少”或“不变”）。

（2） PCR的原理是，需要用的酶是。PCR —般要经历三十多次循环，每次循环分为三步。利用PCR技术进行扩增目的基因的前提是。使用PCR技术，若巳知对某双链DNA扩增过程中消耗引物分子62个，则DNA扩增了 次。

（3） 在“农杆菌转化法”中，运载体是质粒,但最终的受体细胞却不是大肠杆菌和酵母菌，而是不含质粒的双子叶植物和裸子植物的细胞，请问使用农杆菌的原因是。

（1） 利用PCR技术对目的基因进行扩增时，需加入酶。该技术依据的原理是，在操作步骤中需要加热至90～95℃使，然后降温至55～60℃，使。

（2） 进行①过程时，需用酶切开载体以插入目的基因。若要使目的基因在受体细胞中表达，需要导入基因表达载体，而不是直接导入目的基因，其原因是：（答出两点即可）。

（3） 若图中宿主细胞为大肠杆菌，一般情况下②过程采用处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞 。

（4） 真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验中应选用缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞，并在蛋白质纯化的过程中应添加蛋白酶的抑制剂。

（1） 为了分离捕获到某种生物的微卫星DNA分子标记，可以用生物素标记的特定简单重复序列作为探针，与该生物的（填“基因组”或“cDNA”）文库进行杂交，然后再经多个步骤筛选获取微卫星DNA。

（2） 扩增分离到的微卫星DNA序列的技术方法为，其原理是。其反应体系中含缓冲液、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物、及酶等。

（3） 对微卫星DNA进行体外扩增的基本反应步骤为。

（4） 从图中4种引物中选择正确的引物，并在内用箭头表示子链延伸的方向。

（5） 根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于_____（填字母）。

（1） PCR反应的基本步骤是变性、复性、。

（2） 双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）与脱氧核苷三磷酸（dNTP）的结构如图2所示。已知ddNTP按碱基互补配对的方式加到正在复制的子链中后，子链的延伸立即终止。现主有一些序列为5'—GCCTAAGATCGCA—3'的DNA分子单链片段，通过PCR技术获得以碱基“C”为末端（3'为碱基C）不同长度的子链DNA片段，将以上子链DNA片段进行电泳分离可得到种不同长度的子链DNA片段。为使实验顺利进行，在PCR反应管中除了单链模板、引物、DNA聚合酶和相应的缓冲液等物质外，还需要加入下列哪组原料。

A. dGTP、dATP、dTTP                        B. dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP

C. dGTP、dATP、dTTP、dCTP          D. ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP

（3） 科学家研究发现DNA聚合酶只能催化方向的聚合反应。图1表示细胞内染色体DNA的复制过程，有一条子链是先合成短的DNA片段（称为冈崎片段），再形成较长的分子，可推测参与以上过程的酶有DNA连接酶、。在PCR过程中无冈崎片段形成，原因是细胞内染色体DNA的复制过程特点是，PCR过程的特点是。