固定化细胞及其应用 知识点题库

（1） 在 状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复 状态．活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时 ．

（2） 固定化细胞技术一般采用包埋法，而固定化酶常用 和 ．

（3） 影响实验成败的关键步骤是 ．

（4） 海藻酸钠溶化过程的注意事项是 ．

（5） 如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目 ．如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明 ．

（6） 该实验中CaCl₂溶液的作用是 ．

（1） 图1制备凝胶珠的过程中，加热溶解海藻酸钠时需注意用加热，然后将融化好的海藻酸钠溶液后，加入酵母菌充分搅拌混合均匀。

（2） 图1中X溶液为，其作用是使。

（3） 图1中制备的凝运珠用洗涤后再转移到图2装置中。图2发酵过程中搅拌的目的是使。

（4） 某同学在图1步骤结束后得到图3所示的实验结果，出现此结果的可能原因有海藻酸钠浓度过（填“高”或“低”）、注射器中的混合液推进速度过（填“快”或“慢”）或注射器距离CaCl₂溶液液面太近。

（1） 某大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠来包埋小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果 (注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶的活性和酶的数量)。

Ⅰ.从如图可以看出：固定化小麦酯酶比游离的小麦酯酶对温度变化的适应性更。

Ⅱ.从如图可以看出：海藻酸钠浓度为3%时的小麦酯酶活力最强。当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是。

（2） 制备固定化酵母细胞的过程如下：

Ⅰ.活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复状态。

Ⅱ.影响此实验成败的关键步骤是配制海藻酸钠溶液，此步的操作应采用,以防止发生焦糊现象。

Ⅲ.海藻酸钠溶液必须冷却至室温后才能和酵母混合，原因是。

Ⅳ.刚形成的凝胶珠要在CaCl₂溶液中浸泡30 min左右，目的是。

Ⅴ.如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度(过低/过高)。

Ⅵ.此固定酵母细胞的方法是法,固定化酵母细胞的优点是。

Ⅶ.制备固定化酶则不宜用此方法，原因是。

（1） 酶在化学反应中的作用机制是，细胞内的多数酶是在上合成的。技术适应于工业化生产的需要，便于在反应结束后对酶进行回收。

（2） 将酶固定化常采用的方法是和。采用固定化细胞时无须将酶从细胞内提取出来，这样可以减少酶活性的损失。常用的固定化细胞方法是。

（3） 实验操作中，固定化微生物细胞常用的载体有（答出1点即可），这些载体具有（答出1点即可）的特性。

（1） 某环保公司从淤泥中分离到一种高效降解富营养化污水污染物的细菌菌株，制备了固定化菌株。

Ⅰ.从淤泥中分离细菌时常用划线分离法或法，两种方法均能在固体培养基上形成。对分离的菌株进行诱变、和鉴定，从而获得能高效降解富营养化污水污染物的菌株。该菌株只能在添加了特定成分X的培养基上繁殖。

Ⅱ.固定化菌株的制备流程如下；①将菌株与该公司研制的特定介质结合；②用蒸馏水去除；③检验固定化菌株的。菌株与特定介质的结合不宜直接采用交联法和共价偶联法，可以采用的2种方法是。

Ⅲ.对外，只提供固定化菌株有利于保护该公司的知识产权，推测其原因是。

（2） 三叶青为蔓生的藤本植物，以根入药。由于野生三叶青对生长环境要求非常苛刻，以及生态环境的破坏和过度的采挖，目前我国野生三叶青已十分珍稀。

Ⅰ.为保护三叶青的多样性和保证药材的品质，科技工作者依据生态工程原理，利用技术，实现了三叶青的林下种植。

Ⅱ.依据基因工程原理，利用发根农杆菌侵染三叶青带伤口的叶片，叶片产生酚类化合物，诱导发根农杆菌质粒上vir系列基因表达形成和限制性核酸内切酶等，进而从质粒上复制并切割出一段可转移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA进入叶片细胞并整合到染色体上，T-DNA上rol系列基因表达，产生相应的植物激素，促使叶片细胞持续不断地分裂形成，再分化形成毛状根。

Ⅲ.剪取毛状根，转入含头孢类抗生素的固体培养基上进行多次培养，培养基中添加抗生素的主要目的是。最后取毛状根转入液体培养基、置于摇床上进行悬浮培养，通过控制摇床的和温度，调节培养基成分中的，获得大量毛状根，用于提取药用成分。

（1） 制作苹果酒的条件是先通气后密封。先通入无菌空气的目的是，最初的苹果酒中含有少量尿素，脲酶可以将尿素降解为，脲酶不宜直接投入酒中，除可能会影响酶活性外，还可能的原因是。

（2） 在工业生产上，固定化醋酸菌的优点是。固定化菌种通常采用（方法），这是因为。

（1） 葡萄榨汁后加入酵母菌可酿制果酒，在此过程中不必对葡萄进行严格的消毒处理，也可以减少杂菌污染，原因是。

（2） 对酵母菌细胞进行固定化，通常采用的方法，固定化酶技术不用该方法的原因是。用固定化酵母菌进行酒精发酵实验时，发现气泡很少，且基本没有闻到酒味，推测其可能的原因是。

（3） 甲、乙、丙三位同学尝试从面包酵母菌细胞中提取出海藻糖并对之进行鉴定，采用一定的方法处理后，结果如图所示，此鉴定方法叫做法。老师指出同学甲的样品提取总体效果最好，丙同学最差，由此可知甲同学的点样处为。

（1） 沤麻是获取黄麻纤维的重要步骤，主要是在潮湿环境中利用一些细菌的作用分解黄麻韧皮部的果胶，从而将麻纤维释放出来，以便于后续处理。实验小组尝试从收割后的黄麻地里分离出高效分解果胶的细菌，应选用以为唯一碳源的固体培养基来筛选目的菌。有同学建议先将土壤悬液接种到液体选择培养基中培养一段时间后再接种到固体培养基中进行筛选，这样做的好处是。若要筛选纤维素分解菌，则需要在培养基中添加染液，以方便挑选目的菌株。

（2） 小华同学在使用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。培养基灭菌后，小华用平板划线法分离土壤浸出液中的目的菌，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上均不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落的不当操作可能有（答2点）。

（3） 分离出目的菌后，某同学尝试用海藻酸钠对目的菌固定化，以便于重复使用，结果凝胶珠难以成形，导致实验失败的原因可能是。固定化细胞失败后，该同学又尝试分离目的菌中分解果胶的酶，他可以采用的方法有（答2种）。

（1） 果酒酿造过程中，起主要作用的微生物是酵母菌，酵母菌的异化作用类型是，发酵产生的果酒在醋酸菌的作用下会进一步转变为醋酸，与酒精发酵的条件相比，醋酸发酵需要(答出2点)

（2） 工业上生产酒精可采用法固定酵母细胞，细胞固定化技术的优点是(答出2点)。

（3） 若要测定果酒发酵液中的酵母菌密度，进行下图所示操作。

将发酵液用法接种到培养基，一段时间后，培养基A、B、C中菌落数分别为36、40、35，表明IL发酵液中的酵母菌数量约为个，统计结果比酵母菌的实际数目偏(大或小)。