固定化酶及其应用知识点题库

生物技术与我们的生活息息相关．

（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，原因是玫瑰精油具有的性质．

（2）使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是．

（3）固定化酶的优点是既能与反应物接触，又能与．酶的固定化一般适合采用法和法．

（4）PCR技术能把某一DNA分子片段进行扩增，依据的原理是；每次循环需要经过、复性、延伸三步．

（5）DNA指纹图谱可用于亲子鉴定．如图为某孩子已故母亲和四位男性的DNA指纹图谱．F₁～F₄中，该小孩生理学上的父亲最可能是．

下列关于酶的应用的说法中，合理的是（　　）

A . 使用加酶洗衣粉先用热水浸泡洗衣粉和衣物，洗涤效果好 B . 污渍成分比较复杂时应选用复合加酶洗衣粉，以减少用量 C . 加酶洗衣粉中的酶制剂需用特定材料包裹，属于固定化酶 D . 固定化酶可以反复使用，且固定化后不会影响酶的催化活性

下列选项中不属于酶的固定化技术是（）

A . 载体结合法 B . 冷冻干燥法 C . 交联法 D . 包埋法

下列关于固定化酶和一般酶制剂在应用效果上的说法，错误的是（）

A . 固定化酶生物活性强，可长久使用 B . 一般酶制剂应用后和产物混在一起，产物的纯度不高 C . 一般酶制剂参加反应后不能重复利用 D . 固定化酶可以反复利用，降低生产成本，提高产量和质量

下列关于使用固定化酶技术生产高果糖浆的说法，正确的是（）

A . 高果糖浆的生产需要使用果糖异构酶 B . 在反应柱内的顶端装上分布着许多小孔的筛板，防止异物的进入 C . 将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，果糖从反应柱下端流出 D . 固定化酶技术复杂，成本较高

如图表示科研人员利用固定化葡萄糖异构酶来生产高果糖浆的过程，相关叙述正确的是（）

A . 固定葡萄糖异构酶时，采用方法2比方法3对酶的活性影响要小 B . 在生产过程中，须严格控制好pH、温度、溶解氧等环境因素 C . 在生产过程中，通过控制阀调节果糖流出的速率以保证反应充分进行 D . 由于固定化葡萄糖异构酶活性不会降低，此反应柱可持续用于生产

固定化酶技术常采用（）

A . 包埋法 B . 化学结合和物理吸附法固定化 C . 活化法 D . 微囊化法

下列关于酵母细胞固定化和固定化酶技术的叙述，正确的是（）

A . 加酶洗衣粉的酶外层有特殊的化学物质层层包裹，采用了包埋法固定化酶技术 B . 固定化细胞使用的都是活细胞，在应用时要注意为其提供适宜的生存条件 C . 固定后的酶或细胞与反应物更容易接近，可显著提高反应的效率 D . 固定化酶和固定化细胞所固定的酶分别只能在细胞内和细胞外起作用

下列有关酶的应用和固定化细胞技术的叙述，正确的是（　　）

A . 将酶固定在一定的载体上再加入到洗衣粉中可以制备加酶洗衣粉 B . 使用固定化酵母细胞进行发酵时，效率比直接使用酶的效率要高 C . 酸可以使蛋白质水解，所以清除血渍、奶渍等污渍时降低pH值能提高加酶洗衣粉的洗涤效果 D . 固定化酵母细胞时，将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl₂和杂菌

酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛应用于各个领域，下列叙述正确的是( )

A . 用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶，但嚼服后会失去疗效 B . 固定化酵母细胞的常用方法是吸附法，这种方法对酵母细胞活性影响最小 C . 固定化酶的应用中，要控制好pH、温度、溶解氧和营养条件 D . 固定化细胞用于生产胞外酶和分泌到胞外的产物

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐等配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。请分析回答下列问题：

（1）该培养基只允许分解化合物A的细菌生长，这种培养基称为培养基。该培养基在接种前应该用法灭菌。
（2）对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，常采用的接种方法是，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是。
（3）将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49，据此可得出每升水样中的活菌数为，实际上每升溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为。
（4）若用固定化酶技术固定目的菌中催化化合物A降解的酶，和一般酶制剂相比，其优点是，且利于产物的纯化；固定化目的菌细胞常用法固定化。

苹果作为我国常见水果，口感好、营养价值高，广受人们喜爱，但其收获的季节性强，易造成积压滞销，腐烂变质。某市为缓解产销矛盾，提高产品的附加值，利用苹果生产果汁、果酒和果醋，大致工艺流程如下图，请分析回答：

苹果果汁果酒果醋

（1）果酒发酵初期先通入适量空气的目的是，果酒发酵之后进行果醋发酵，需要改变的条件包括(至少写2点)，当氧气和糖分充足时，果醋发酵的反应方程式为。
（2）在苹果汁的生产过程中，需要加入果胶酶，目的是。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括等。
（3）果酒发酵过程中，产物酒精会抑制酵母菌的生命活动，使发酵得到的酒精度数较低，现欲筛选耐高浓度酒精的酵母菌，除了基本的营养成分之外，该培养基中还应加入。
（4）为使酵母菌能反复利用，常用到固定细胞技术，固定酵母细胞的方法常用法，研究表明使用固定化酵母的酒精产量平均值高于游离酵母的对照组，可能的原因是。

江苏镇江香醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。请据图回答问题：

（1）若图中糖化阶段需要反复利用酶制剂，常采用法固定有关酶。
（2）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在此操作过程中，发酵罐需先通气，此时酵母菌主要的繁殖方式是。
（3）在醋酸发酵阶段，醋酸菌在和糖源都充足时，可将糖分解成醋酸。图示发酵过程用到的两种菌种在结构上的本质区别是。
（4）在上述发酵过程中，相关菌种各时期种群数量是判断发酵程度的一项重要指标，常用血球计数板进行计数。
①血球计数板上有个计数室，计数室深度为.

②下图示酵母菌培养液某时期稀释100倍后的镜检结果，如果中方格内（图2）的酵母菌数刚好是五点取样平均数，则1mL该培养液中酵母菌的数量约为.
（5）除了用血球计数板进行计数外，科学家还经常用法来估算酵母菌的数量。用这种方法进行操作前后，需要灭菌的材料和用具有。

苯氧基苯甲酸（3-PBA）是大多数拟除虫菊酯类农药降解的中间产物，毒性很大，科研人员研究了固定化3-PBA降解酶的固定条件，旨在为其工业应用提供参考。在本实验条件下，1min内使3-PBA减少1.0nmol所需酶量为1个酶活力单位（U）。

（1）实验中科研人员选择海藻酸钠做为固定化酶，经过多次实验最终选择质量分数为2%的海藻酸钠溶液固定化酶，不选择浓度过低的海藻酸钠溶液的原因是，在实验中还发现：如果海藻酸钠的浓度将很难形成凝胶珠。
（2）用注射器吸取海藻酸钠和酶的混合液以恒定的速度滴加到溶液中；根据下图结果显示固定化酶凝胶珠直径与针头型号成相关；凝胶珠直径过大酶活力下降的原因可能是。

针头型号
（3）检验凝胶珠的质量是否合格可以采用以下两种方法，一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果，也能表明制备的凝胶珠是成功的。

近年，由于全球气候变暖，南极北极部分冰川融化，一些埋藏在冰层中的远古细菌暴露出来，生物科学家对这些远古细菌展开研究。根据有关知识，分析回答下列问题:

（1）已知冰层中的细菌非常稀少，科学家从冰层中取出冰块并融化成液体后，最好用（方法）来测定细菌的数目。
（2）科学家采用固体培养基培养细菌时要倒置培养的原因是。
（3）科学家在做微生物实验时，不小心把自养型细菌和酵母菌混在一起，请写出用选择培养基分离得到自养型细菌的实验原理。
（4）科学家发现，某远古细菌能产生分解有机磷的酶，可应用于污水的净化处理。获得该酶的粗提取液后，可用缓冲液进行处理，此方法的作用是。依据该酶相对分子量大于其他蛋白质的特点，可采用方法纯化。
（5）分离得到的有机磷分解酶通常采用法固定至净水器滤芯中发挥作用。如果某种有机磷是一种大分子化合物，（能/不能）用固定化细胞的方法来分解有机磷。

科研人员研究了不同载体（硅胶、活性炭和大孔树脂）和不同pH对固定化蛋白酶分解污水里蛋白质（用氨基酸产生速率来衡量）的影响，其结果如图所示。下列相关叙述错误的是（）

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A . 与水溶性酶相比，固定化蛋白酶处理污水具有可反复利用的优点 B . 污水中的蛋白质可为固定化蛋白酶提供营养，保持酶的活性 C . 三种载体固定化蛋白酶的最适pH均为5.5左右 D . 进行污水净化时应选择活性炭载体的固定化酶

随着生物技术的发展，酶在生活和生产中的应用越来越广泛。下列相关叙述正确的是(　　)

A . 加酶洗衣粉中酶制剂可以被重复利用，提高了酶的利用率 B . 固定化细胞相比固定化酶，对反应底物的分子大小有限制 C . 固定化酵母细胞常用海藻酸钠作为包埋剂，溶解海藻酸钠时需持续加热 D . 固定化酶应用时，要控制好pH、温度和溶解氧

某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，分组见下表，下列有关说法错误的是（　　）

组别	固定化酶柱长度/cm	淀粉溶液的流速/（mL·min^-1）
甲	10	0.3
乙	10	0.5
丙	15	0.3
丁	15	0.5

A . 固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量 B . 淀粉溶液流速过快会导致反应不充分流出液中含有淀粉 C . 各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同 D . 淀粉溶液的pH设置对实验结果有影响

某研究小组为了从土壤中筛选出淀粉分解菌，进行了如下实验操作，请回答下列相关问题：

（1）筛选淀粉分解菌的培养基应以为唯一碳源，从功能上看，该培养基属于。
（2）为了从土壤中筛选出分解淀粉能力强的细菌，获得土壤样品培养液后应采用接种，培养一段时间后，用碘液处理培养基，会出现以菌落为中心的透明圈，测量菌落和透明圈的直径，结果如下表所示。结合表中数据分析，分解淀粉能力强的菌种是。

菌种

菌落直径（mm）

透明圈直径（mm）

细菌Ⅰ

5.1

11.2

细菌Ⅱ

8.1

13.0
（3）若对（⑵）筛选得到的分解淀粉能力较强的菌种进行长期保存，应采用法。
（4）实验后，对使用过的培养基要进行处理后再倒掉。
（5）以淀粉为原料采用固定化酶技术生产葡萄糖，所需的酶更适合采用和法固定化。

工业化生产时，往往将酶或细胞固定化处理。下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述正确的是（　　）

A . 固定化细胞技术在催化多步连续反应方面优势明显 B . 固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧 C . 利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件 D . 利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类浓度越大，发酵效果越好

菌种	菌落直径（mm）	透明圈直径（mm）
细菌Ⅰ	5.1	11.2
细菌Ⅱ	8.1	13.0

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