酶的应用 知识点题库

（1） 制备固定化酵母细胞之前，需要将干酵母加入中进行活化，目的是。

（2） 制备固定化酵母细胞时，先将海藻酸钠溶液灭菌冷却后。加入混合均匀，然后转移到注射器中以恒定的速度缓慢地滴加到适宜浓度的中。形成凝胶珠。待固定化结束后，将凝胶珠用无菌水洗涤2～3次，目的是。

（3） 将含固定化酵母细胞的凝胶珠转移到适宜浓度的中，在25℃下振荡培养24h，得到固定化增殖酵母。若要测定培养后凝胶珠中酵母菌的数量，实验思路是：。

（1） 回答与柑橘加工与再利用有关的问题：

Ⅰ.柑橘果实经挤压获得果汁后，需用果胶酶处理，主要目的是提高果汁的。为确定果胶酶的处理效果，对分别加入不同浓度果胶酶的果汁样品，可采用3种方法进行实验：①取各处理样品，添加相同体积的，沉淀生成量较少的处理效果好。②对不同处理进行离心，用比色计对上清液进行测定，OD值的处理效果好。③对不同处理进行，记录相同体积果汁通过的时间，时间较短的处理效果好。

Ⅱ.加工后的柑橘残渣含有抑菌作用的香精油及较多的果胶等。为筛选生长不被香精油抑制且能高效利用果胶的细菌，从腐烂残渣中分离得到若干菌株，分别用无菌水配制成，再均匀涂布在LB固体培养基上。配制适宜浓度的香精油，浸润大小适宜并已的圆形滤纸片若干，再贴在上述培养基上。培养一段时间后，测量滤纸片周围抑制菌体生长形成的透明圈的直径大小。从直径的菌株中取菌接种到含有适量果胶的液体培养基试管中培养，若有果胶酶产生，摇晃试管并观察，与接种前相比，液体培养基的下降。

（2） 回答与基因工程和植物克隆有关的问题：

Ⅰ.天然农杆菌的Ti质粒上存在着一段DNA片段（T-DNA），该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的。

Ⅱ.结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用的转基因方法。

Ⅲ.利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前者总培养时间，且不经历过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。

Ⅳ.与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加，促进丛状苗基部细胞分裂形成愈伤组织并进一步分化形成，最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如（A.提高蔗糖浓度B.降低培养基浓度C.提高大量元素浓度D.不添加琼脂）。

（1） 制作橙汁时常加入果胶酶，果胶酶能分解果胶来提高橙汁的（答出两点）。为回收溶液中的果胶酶一般采用法将酶固定（答出两种方法）。

（2） 果园土壤中的脂环酸芽孢杆菌，需氧，耐热，生长温度35-80℃。橙汁生产过程中若感染此菌，会影响橙汁品质。为优化橙汁生产工艺，进行了下述研究。

[实验一：脂环酸芽孢杆菌的筛选和鉴定]

实验步骤：

a配制K氏培养基：

b取果园土壤，制备土壤稀释液：

c将土壤稀释液接种在K氏培养基平板上，培养后获得单菌落。

d对获得的目的菌落进行筛选和鉴定。

①K氏培养基的主要成分有酵母膏、蛋白胨和葡萄糖等，其中能提供生长因子的是。

②将上述步骤c初步分离得到的目的菌株制成菌悬液，于80℃水浴中热处理10min后，取0.1mL涂布接种到K氏培养基平板上，45℃培养48h。此操作的目的是。

A.用80℃水浴杀死杂菌和芽孢

B.用80℃水浴进一步筛选出耐热目的菌株

C.分离纯化目的菌株

D.给细菌补充新的营养物质

③用接种环将筛得的目的菌株插入到半固体K氏培养基中，如下左图。接种时为什么要靠近酒精灯火焰：。45℃培养4-5天后进行观察，能够判断是脂环酸芽孢杆菌生长的试管是。

[实验二：脂环酸芽孢杆菌控制方法的研究]

实验步骤：

a称取一定量的抑菌剂，配制成不同浓度的抑菌液。

b将实验一得到的菌株原液适当稀释得到菌株稀释液。

c分别取不同浓度的抑菌液加入到K氏培养液中，再分别加入菌株稀释液形成菌悬液

（各试管中加入的同一种液体均为等量）。培养一段时间后，将上述菌悬液分别接种到K氏平板培养基上。

①实验二中，对照组的设置应该是：。

②为便于检测抑菌剂的抑菌效果，宜采用哪种接种方法?_ ，为什么? 。