培养基概述及其分类知识点题库

现有一种能生产甲硫氨酸的M菌，但产量很低，而且当培养液中甲硫氨酸的含量达到最大值后，继续培养，甲硫氨酸含量会迅速下降。这是由于甲硫氨酸的积累反过来抑制了其合成。用紫外线照射可选育得到能抗甲硫氨酸抑制的高产新菌株。下列有关选育过程的表述，不正确的是

A . 这种新菌株的选育方法属于用物理因素诱导的诱变育种 B . M菌培养液中甲硫氨酸的含量达到最大值后又不断减少是反馈调节的结果 C . 用紫外线照射M菌的同时，还应在其培养基中添加甲硫氨酸 D . 该选育过程中采用的培养基是液体培养基

将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。

回答下列问题：

（1） M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素抑制的生长，加入了链霉素的培养基属于培养基。该培养基允许生长，其他种类微生物生长
（2） M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有（答出两点即可）。
（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是。
（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：。

下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是（）

A . 培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌 B . 接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧 C . 接种后的培养皿要倒置，以防培养污染 D . 菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基

科学研究发现，某种细菌能降解石油、增大石油乳化度、降低石油黏度。通过向油井中注入含有该种细菌的水可提高采油率，为了获得高纯度的该种细菌，科研人员做了相关实验，请分析回答下列问题：

（1）虽然不同微生物对营养物质的需求不同，但培养基中一般都含有；为了防止杂菌污染，应对培养基进行处理，常采用的处理方法是。
（2）当以菌落数统计目的菌株数时，至少应选择3个菌落数在(范围)的平板进行计数，并以菌落数的作为统计结果，一般情况下该统计结果会(填写“低于”“高于”或“等于”)实际值。
（3）因分离获得的目的菌降解石油的效果不甚理想，科研人员对其进行了诱变处理(实验组)。与对照组相比，最可能的结果为：①实验组中大多数菌落周围的透明圈(石油被目的菌分解后褪色形成的圆形圈)大小（填写“有显著差异”或“无显著差异”）；②实验组中少数菌落周围的透明圈（填写“变大”、“变小”或“变大或变小”）。

我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲所示，据此配置伊红美蓝培养基配方如图乙所示。回答下列相关问题：

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（1）图甲中滤膜的孔径应(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌：。
（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入(一种营养成分)，以及；伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于培养基。
（3）该小组通过统计计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值要比实际(“偏高”或“偏低”)，理由是。

下列有关微生物培养和菌种鉴定的叙述，正确的是（）

A . 增加微生物的浓度常用的是固体培养基 B . 在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 C . 在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌 D . 酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有一定的抑制作用

尿素是一种重要的农业氮肥，但农作物并不能直接吸收，需要土壤中的一些细菌分解成无机物后，才能被利用。

（1）在分离土壤中分解尿素的细菌时，人为提供的条件，同时抑制或阻止。

（2）在分离上述细菌时，常用到的培养基配方如下：

KH₂PO₄	1.4g
Na₂HPO₄	2.1g
MgSO₄•7H₂O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
琼脂	15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

其中，KH₂PO₄和Na₂HPO₄的作用是（答出两点）葡高糖可为该菌的生长提供和，尿素[CO（NH₂）₂]（可以不可以）作为碳源，原因是。

下表是培养炭疽杆菌的血琼脂培养基成分，据表分析“血琼脂培养基”属于(　　)

蛋白胨	10 g
牛肉粉	3 g
氧化钠	5 g
脱纤维羊血 (含多种生长因子)	50 mL
琼脂	15 g
去离子水	1 000 mL

A . 鉴别培养基 B . 选择培养基 C . 固体培养基 D . 液体培养基

据报道，在某餐馆就餐的多位客人均在餐后半小时出现恶心、呕吐、腹泻等症状。食品卫生监督管理局的工作人员接到群众举报后立即出动，在该餐馆采集样本，并进行培养，检测鉴定，最终发现该餐馆使用的筷子未经严格消毒，大肠杆菌等多种细菌数量严重超标。据此判断，工作人员选用的培养基按功能分，应属于（　　）

A . 选择培养基 B . 液体培养基 C . 固体培养基 D . 鉴别培养基

为筛选出能产生果胶酶的微生物，研究人员利用腐烂水果进行了下列操作：回答下列问题：

（1）相比液体培养基，制备固体培养基需要添加的物质是；制备培养基时，加入培养基的无机盐含有KH₂PO₄及Na₂HPO₄ ，其作用是；若用平板划线法接种微生物，在培养基上共画了4个区域，则至少需要次灼烧接种环。
（2）选择培养需制备以为唯一碳源的培养基，此过程可以“浓缩”所需微生物，原因是。
（3）为使果胶酶能反复利用，经常采用方法固定。生产果汁使用果胶酶能提高。

微生物修复目前已成为去除农药残留污染的一种重要方法，而筛选高效农药降解菌是开展农药污染生物修复工作的重要前提。回答筛选降解溴氰菊酯（一种具有高效杀虫性的拟除虫菊酯类农药）的有关问题：

（1）分离纯化溴氰菊酯降解菌株：培养基中加入溴氰菊酯作为唯一碳源，这样的培养基从功能上看称为培养基。
（2）对获取的菌株进一步纯化时，用稀释涂布平板法接种后培养的两个平板中菌落长出后分别如下平板甲和平板乙：

出现平板甲的原因是，出现平板乙的原因是。
（3）菌株降解溴氰菊酯的能力可以用来表示。
（4）请补充完成“探究溴氰菊酯浓度对菌株降解溴氰菊酯能力的影响”的探究实验思路：取相等且适量的菌悬液分别接种到液体培养基中，恒温摇床振荡培养一定时间，检测各组菌株降解溴氰菊酯的能力。
（5）上述降解菌能否运用于生产实际，在外界环境中保持稳定的数量和较高的降解活性是生物修复技术亟待解决的问题。除上述（4）提到的因素外，还应该研究（写出1点，合理即可）等外环境因素对该菌株的影响。

精氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌并进行筛选的过程示意图，过程②将紫外线照射处理的菌液接种在某培养基上，培养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图甲所示。过程③向培养基中添加某种物质，继续培养，得到如图乙所示平板。下列相关叙述正确的是（）

A . 紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生染色体变异 B . 图乙中菌落B为精氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌 C . 过程③向培养基中添加的某种物质是鸟氨酸 D . 过程②所用培养基是一种选择培养基

将甲、乙、丙和丁四种细菌分别接种到A、B、C、D四种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如下表所示：

培养液组别	培养液成分	繁殖一代所需时间（分钟）
培养液组别	培养液成分	甲	乙	丙	丁
A	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄	43	100	—	—
B	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄、8种氨基酸	28	40
C	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄、19种氨基酸	25	25	80	—
D	NaCl、MgSO₄、NO₃^-、PO₄^3-	—	—	—	80

注：—表示细菌没有生长

下列相关分析正确的是（）

A . 甲乙相比，均能生长在A培养基，且乙增长较快 B . 甲、乙、丙和丁四种细菌，丁代谢类型与蓝细菌相似 C . 四种培养基均需要通过121℃高压蒸汽灭菌15min D . 氨基酸是甲、乙、丙、丁四种细菌生长的限制条件

[选修1：生物技术实践]

从自然界分离到的微生物在其发生突变前的原始菌株，称为野生型菌株，而营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种特殊营养物质的能力，只能在完全培养基或补充了相应特殊营养物质的基本培养基中正常生长的变异菌株。精氨酸营养缺陷型谷氨酸棒状杄菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。现通过对野生型谷氨酸棒状杆菌的诱变和筛选过程获得鸟氨酸发酵优良菌种，如图为选育过程，③是向培养基中添加了某种物质后继续培养。回答下列问题：

紫外线

（1）图中三个培养皿的培养基中都必须包括等营养要素，图中紫外线的作用是，①过程中将野生型菌液接种到了液体培养基中，这种培养基与甲、乙中的培养基最大的差异是。
（2）从营养组成的角度分析，甲中的培养基类型是（填“基本培养基”或“完全培养基”），③添加的物质为。A、B菌落中菌落可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。
（3）谷氨酸棒状杆菌是好氧型细菌，在用筛选出的细菌获得鸟氨酸时，要注意进行搅拌，其目的是。

结核杆菌是一种专性需氧菌，是引起肺结核的罪魁祸首。由于多种因素的影响，近年来肺结核病日趋严重。在2018年的调查中发现全球51％的结核病患者细菌利福平（一种抗生素）耐药检测为阳性，为了筛选新的抗结核药物，进行了下述研究。

实验一：结核杆菌的筛选和鉴定。步骤如图。

（1）罗氏培养基的主要成分为蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿（可抑制杂菌生长）。实验中步骤②的目的是。
（2）获取单菌落时，使用（工具）采用法将菌液接种在罗氏固体培养基上。
（3）以下关于结核杆菌及其筛选和鉴定中的说法，正确的有。

A . 结核杆菌细胞内只有一种核酸 B . 完成步骤①后，应对牛肉膏蛋白胨液体培养基进行振荡培养 C . 可根据在固体培养基上形成菌落的形状、颜色、边缘及表面来鉴别结核杆菌 D . 罗氏培养基中的蛋黄可为结核杆菌提供生长因子
（4）实验二：特效药物筛选
近年来，德拉马尼、贝达喹啉和普利土曼3个药物已经获得监管部门的上市批准。通过药敏试验研究这三种药物对肺结核的疗效，结果如图。A、B、C、D分别为浸过无菌水、相同浓度的德拉马尼、贝达喹啉和普利土曼的滤纸片。

MIC是药敏试验中评价药物药效的常用指标，其定义为某种药物对测试菌的最低抑制浓度。据图判断，三种药物中MIC最小的是。
（5）贝达喹啉是结核杆菌腺苷三磷酸合成酶抑制剂。试述其抑菌机理：。

某些土壤细菌可将尿索分解成CO2和NH，供植物吸收和利用。科研人员分离、培养尿素分解菌的流程如图所示。回答下列问题：

（1）实验时，培养基通常采用_的方法进行灭菌。A培养体系内的培养基中提供氮源的物质是_。
（2）尿素分解菌可以葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是和用移液管吸取1 ml样液后，注入①号试管中，使样本与稀释液充分混匀，依次操作后.④号试管中的细胞浓度是样本中的_倍。
（3）在培养过程中，空白对照组一个平板上出现个别菌落，说明在此次培养过程中出现了现象。单个细菌在平板上会形成菌落.研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是_。

“珠三角是中国酿造酱油的大本营”，酱油作为一种深受人民大众欢迎的传统饮食调味品，工艺流程为：原料→制曲→发酵（添加高浓度食盐）→生酱油→配制→澄清→包装→成品，发酵过程的生理指标变化如表所示：

发酵天数（d）	氨基酸等含氮物质（g/100mL）	酸类物质（g/100mL）	糖类物质（g/100mL）	还原糖（g/100mL）	色度	pH
1	1.25	2.16	6.16	5.09	0.99	5.70
5	1.28	2.27	7.53	6.85	1.22	5.36
8	1.47	2.31	6.81	6.53	1.35	5.37
10	1.65	2.34	7.96	6.94	1.53	5.39
13	1.73	2.48	7.90	7.24	1.78	5.28
15	1.84	2.56	7.85	7.74	2.05	5.12

（1）制作酱油的原料大豆富含的淀粉、脂肪和蛋白质相当于微生物培养基成分中的。制曲是酱油生产过程中的关键阶段之一，制曲阶段的变化主要是依靠微生物米曲霉分泌大量的酶，如（至少答2种）等，并利用这些酶分解原料。
（2）据表分析，多种微生物及其酶系相互作用有利于，使酱油具有独特的风味和营养价值。
（3）结合工艺流程及表中数据分析，酱油发酵过程中不易受到杂菌污染，原因是；成品包装前常使用巴氏消毒法消毒，原因是。
（4）黄曲霉毒素是由黄曲霉菌产生的具有强烈致癌作用的物质，酿制酱油的整个生产过程都有污染的可能，请结合你所学知识，提出两条控制酿造酱油被黄曲霉毒素污染的措施：。

酵母菌是一种单细胞真菌，与人类生产、生活具有密切的关系。请回答下列问题。

（1）培养酵母菌的培养基中含有的营养成分包括水、碳源、；通常对培养基采用法进行灭菌，为了判断培养基灭菌是否合格，请写出简要的思路：。
（2）为了纯化酵母菌，常在培养基中加入一定量的青霉素，这种培养基属于培养基；加入青霉素一定程度上能达到纯化酵母菌的目的，理由是。
（3）在生产上，为了使酵母菌能够反复使用，可以对酵母菌进行固定化，首先要对酵母菌进行活化，活化是指；固定化酵母菌一般采用包埋法，该方法中所使用海藻酸钠的作用是。

营养缺陷型突变株在基本培养基(不添加特殊营养物)上不能正常生长，只能在完全培养基(满足微生物的各种营养缺陷型生长的培养基)上才能正常生长。现将诱变处理后的菌液稀释后接种于某培养基上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A、B培养基上，前后位置及号码相对应，培养后菌落生长情况如图，请回答：

（1）在常规微生物实验中，以下操作正确的是____(填字母)。

A . 选择消毒或灭菌要根据无菌操作的对象及目的而定 B . 对玻璃器皿、涂布器、操作者的衣着和双手应进行灭菌处理 C . 接种用的无菌操作台要用紫外线进行消毒 D . 在倒平板时，将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上 E . 涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在培养基上
（2）在该实验中，用紫外线照射进行诱变处理，目的是。
（3）过程①的接种方法为， A、B培养基应分别为培养基、培养基(填“基本”或“完全”)。

（4）为进一步确定缺陷型菌株属于何种氨基酸缺陷型，实验人员进行了如下操作：

①用接种针挑取培养基(填“A”或“B”)中的号菌落分别接种于盛有完全培养液的离心管中，28 ℃振荡培养1～2天后，离心，取沉淀用洗涤菌体3次并制备成菌悬液。

②吸取1 mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注约15 mL融化并冷却至50℃左右的基本琼脂培养基，冷凝后用记号笔在培养皿的皿底划分五个区域，做好标记。

③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸结晶或粉末（五组混合氨基酸如下表所示），制作(填“选择”或“鉴别”)培养基。经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。

组别	所含氨基酸
A	组氨酸	苏氨酸	谷氨酸	天冬酰胺	亮氨酸
B	精氨酸	苏氨酸	赖氨酸	甲硫氨酸	苯丙氨酸
C	酪氨酸	谷氨酸	赖氨酸	色氨酸	丙氨酸
D	甘氨酸	天冬氨酸	甲硫氨酸	组氨酸	丝氨酸
E	胱氨酸	亮氨酸	苯丙氨酸	丙氨酸	丝氨酸

在上述鉴定实验中，发现在培养基的A、D区域出现生长圈，则说明该缺陷型属于。

下列有关实验的描述中，正确的有（）

①腐乳制作过程由多种微生物参与，其中毛霉起主要作用，因为毛霉能直接吸收豆腐中的蛋白质和脂肪

②显微镜直接计数法易计数活菌数目

③一个菌落的产生肯定是在固体培养基表面上单个细胞为中心形成的子细胞团

④纤维素分解菌鉴定时在培养基中加入酚红指示剂，如果指示剂变红则能初步鉴定

⑤用萃取方法提取胡萝卜素的过程使用水浴加热，目的是防止直接加热引起燃烧爆炸

⑥用纸层析法鉴定胡萝卜素的原理是滤纸对各种色素的吸附能力不同

A . 1项 B . 2项 C . 3项 D . 4项

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