第3章 基因工程 知识点题库

（1） 荧光素酶基因可以从基因文库中获取，也可以通过方法得到，再利用PCR技术扩增即可，扩增荧光素酶基因利用的原理是。

（2） 限制酶是切割DNA的工具酶，主要从中分离纯化出来。DNA连接酶可以分为两类，一类是从中分离得到的，称为E·coliDNA连接酶；另一类是从中分离得到的。

（3） 将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是农杆菌的Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的上，然后再转移至受体细胞中。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是。

（1） 若要使乳铁蛋白基因在转基因山羊的乳腺细胞中表达，应将乳铁蛋白基因与山羊基因的启动子等调控组件重组，在构建表达载体时需要用到的工具酶有。

（2） 将重组表达载体导入受精卵常用的方法是，受精卵在体外培养时，培养液中除了加水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸等必需的营养成分外，往往需要特别加入等天然成分。

（3） 在胚胎移植前，通过技术可获得较多的胚胎；在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后要用激素进行处理，使供体、受体的生理状态相同。

（4） 若要检测羊奶中是否含有乳铁蛋白，可采用技术。

（1） 植物叶片光合作用的产物，通常以蔗糖的形式运输到叶片以外的其他部位，因此如果需要用叶片干重变化反映（净）光合作用强度需要选取 （离体/不离体）叶片。如果植物光合作用产物不能正常运出叶片，产物在细胞中积累将直接抑制光合作用的 阶段。一些器官接受蔗糖前先要蔗糖酶将蔗糖水解为 才能吸收。

（2） 番茄中INVIN基因编码一种与蔗糖代谢有关的蛋白质，该基因在果实中表达。利用RNA沉默技术构建INVIN蛋白产生受抑制的转基因植株INVINsi，测量获得的番茄果实中含糖量如图一所示，与野生型植株相比转基因植株果实含糖量较，说明INVIN蛋白可以糖在番茄果实中的积累。

（3） 为探究INVIN基因作用机理，将细胞分裂素响应启动子Lin6与INVIN基因连接， 利用 法转入烟草，构建Lin6：INVIN转基因植株，用细胞分裂素处理可以诱导INVIN基表达。将细胞分裂素水液涂抹在叶片某一位，另一位涂抹，测定野生植株和转基因植株不同部位的含糖量如图二示通过该图可以判断INVIN可以 蔗糖酶的活性。根据以上实验结果和相关信息解释转基因植株INVINsi果实含糖量提高的原因  。

（4） 如果要证实上述说法，则实验组应选择的材料、检测指标。

A.INVINsi    B.Lin6：INVIN    C.野生型植株            D.叶片中糖含量    E.果实中糖含量    F.叶片中蔗糖酶的活性    H.果实蔗糖酶活性

该实验的预期结果为 。

（1） 基因工程操作的核心步骤是，其目的是使目的基因在受体细胞中，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。

（2） 组成基因表达载体的单体是，基因表达载体上的启动子的作用是。

（3） 在生物体外常用PCR技术来扩增目的基因。PCR的原理是。在PCR体系中需要加入dNTP（dATP、dTTP、dGTP、dCTP），dNTP脱去两个磷酸后形成的物质能作为DNA合成的原料，则dATP和ATP在组成成分上的差别是，在PCR体系中（填“需要”或“不需要”）加入ATP。

（1） 耐除草剂玉米T25植株的培育用到了基因工程技术，该过程以耐除草剂基因作为（填目的基因或标记基因），一般用同一种切割含该基因的DNA和运载体DNA。 

（2） 构建基因表达载体时，需用到酶将耐除草剂基因插入到Ti质粒的 T-DNA 上。

（3） 在基因表达载体中位于耐除草剂基因的首端和尾端分别具有和（填结构名称），以启动和停止基因的转录。

（4） （填能或不能）用动物病毒作为耐除草剂基因导入玉米细胞的载体。

（5） 常用法使目的基因转移进入玉米细胞，进一步插入到玉米细胞中染色体的DNA上。

（1） 图中的TRPV1属于通道蛋白，其与细胞膜上的载体蛋白合称为，载体蛋白在参与物质跨膜运输时不同于通道蛋白的特点是和。

（2） 在反射弧中，感受器一般是指和与之相连的各种特化结构。TRPV1受到热（>43℃）和（需一定浓度）的刺激时引起等物质内流，此时神经细胞膜外电位变化是，从而产生动作电位。物质内流的运输方式属于。

（3） 人体的很多地方都会用到压力敏感的离子通道。当找到这一类通道后，就可以以此为靶点来干预呼吸道、心血管、甚至听力等生理过程。利用这项研究，中晚期肿瘤带来的疼痛持续的慢性疼痛，焦虑、抑郁表现的痛觉敏感等，都可以得到有效的控制，请试着说明研发药物的作用机制。

（4） Julius和他的同事创建了一个包含数百万个DNA片段的库，对应于在感觉神经元中表达的基因，该基因库称为。这些基因可以回应疼痛、热和触摸。说明该DNA片段库包含可编码能够与辣椒素反应的蛋白质的DNA片段。通过和过程，实现编码蛋白质合成过程。

（1） 研究人员采用PCR技术可以获得大量t－PA基因，PCR的原理是。此外，大量获得t－PA基因的方法还有（答出两种）。

（2） 高质量的DNA模板是成功扩增目的基因的前提条件之一，在制备DNA模板时，可以用高温处理的方法去除蛋白质，原因是。

（3） 研究表明，为心梗患者注射大量t－PA会诱发颅内出血，其原因在于t－PA与纤维蛋白结合的特异性不高，若将t－PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。（注：如图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒，新霉素为抗生素。）请回答下列问题：

①改造t－PA蛋白你认为应该直接对蛋白质进行改造，还是对天然的t－PA基因进行序列改造，原因是？。

②如图所示，需选用限制酶XmaⅠ和切开质粒pCLY11，才能与t－PA改良基因高效连接。在基因工程的基本操作过程中，最核心的步骤是基因表达载体的构建，其目的是。

③应该选择不含的大肠杆菌作为受体细胞，以便在加入新霉素的选择培养基中筛选出导入质粒的大肠杆菌。筛选出的大肠杆菌菌落并非都是目的菌株，这时选择色的菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育出能生产改良t－PA蛋白的工程菌株。