第1章发酵工程知识点题库

将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是( )

A . 对比观察培养基有没有被微生物利用 B . 对比分析培养基上是否生有杂菌 C . 没必要放入未接种的培养基 D . 为了下次接种时再使用

在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图3。以下判断错误的是

A . a处抑菌效果小于b处 B . b处的滤纸片没有沥干 C . c处抗生素无效 D . d为对照

关于制作果酒和果醋实验的叙述，正确的是（）

A . 在变酸的果酒液面观察到的菌膜，一般是醋酸菌大量繁殖形成的 B . 酵母菌和醋酸菌的发酵过程均需在密闭的容器中进行 C . 在果酒制作过程中无需接种酵母菌，只需控制适宜的温度即可 D . 果酒的酒精度越高，接种醋酸菌后得到的果醋酸度就越高

某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精．如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题：

（1）农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖．人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌．分离纤维素分解菌常用的方法是．其实验流程是；土壤取样→选择培养→ →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生的菌落．

（2）纤维素分解菌能合成纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即．前两种酶使纤维素分解成，第三种酶将它分解成葡萄糖．

（3）图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌，在酒精发酵时一般将温度控制在 ℃．发酵后是否有酒精产生，可以用来检验．

（4）利用葡萄能生产果酒，进而生产果醋，生产果醋常用的菌种是醋酸杆菌，醋酸杆菌与酵母菌在代谢类型上的区别是

成都高新区某中学高二一班的同学学习选修1中所要求的个实验后，就自主地分了几个学习小组，有的成功，有的失败了．小王和小刘同学根据同学们的实验设计了以下问题．

（1）实验过程中，第一小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，他们采用的解决方法是用相关酶处理果汁．活细胞内合成该酶的原料是．
（2）第二小组要将酵母菌从其他细菌中分离出来，常采用向培养基中添加青霉素的方法，这种培养基叫做培养基，配制培养基时常用的灭菌方法为．
（3）在酸性条件下，可用（试剂）来检测发酵产物中是否有酒精产生．若想进一步检测所得果酒中酵母菌的数量，可采用法．
（4）发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级长期使用，可将菌液用的方法保存．

有关培养基配置原则表述正确的是（）

A . 任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子 B . 碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素 C . 微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响 D . 营养物质的浓度越高越好

中学印刷试卷多数使用蜡纸，蜡纸的主要成分是棉花纤维和石油蜡．蜡纸成本低，但在自然环境由于透水性差而难以降解．某课题小组尝试从土壤中筛选出能够分解石油蜡的微生物，流程如图．回答下列问题：

（1）实验用的土壤样品下列几个地方中的最可能筛选出目的菌，取样的工具在使用前都需要．
A．农田里 B．炼油厂附近 C．食品加工厂附近 D．化肥工厂附近
（2）培养基在配制时应该以石油蜡为唯一，培养瓶和培养皿中的培养基在成分上的差异是前者缺少．
（3）研究者希望通过培养皿中的分解圈来筛选分解能力最强的微生物，结果发现其中每个圈子几乎交错一起，还有很多菌落紧挨在一起，此时应该采取的措施是．
（4）有同学提出，将培养瓶中的石油蜡换为蜡纸碎屑，希望筛选出能够同时分解油蜡和棉花纤维的微生物，这种方法是否可行？，理由是．

利用不同的微生物的发酵作用制作食品，历史悠久，遍布民间，一般称为传统发酵技术．

（1）果醋的制作是否成功首先通过观察进行初步鉴定，再通过检测和比较醋酸作进一步的鉴定．此外，还可以通过在显微镜下观察发酵液中是否有，并统计其数量作进一步鉴定，统计方法用．
（2）吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，这层“皮”是；影响腐乳的风味和质量的因素有盐的用量、酒的种类和用量、、发酵时间等．
（3）制作泡菜时，配制的盐水要后才可使用，泡菜腌制的过程中要注意控制、温度和食盐的用量．腌制条件控制不当容易造成细菌大量繁殖，造成泡菜中含量增加，对人体健康不利．

2015年与我国女科学家屠呦呦平分诺贝尔生理学或医学奖的是爱尔兰科学家威廉一坎贝尔和日本药物科学博士聪大村，他们二人的贡献是发现了一种新的药物，名为阿维菌素，其衍生产品降低了河盲症和淋巴丝虫病的发病率，同时还能有效对抗其他寄生虫病，治疗效果显著．聪大村从土壤样品中分离链霉菌的新菌株，在实验室内通过成千上万链霉菌培养物筛选出一些较有发展前途的菌株，这就是阿维菌素的来源．

（1）制备链霉菌培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是
（2）图①是在纯化过程中通过法分离培养的结果，在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作，共需要灼烧接种环次．图②表示的是用法接种培养后得到的结果．
（3）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现表明菌已分离．在此过程中，正确的操作是　　

A . 每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次 B . 划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种 C . 在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风 D . 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连．

回答下列（1）、（2）小题：

（1）如图是利用果汁进行果醋发酵的装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡出现；中期可以闻到酒香；后期接种醋化醋杆菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。回答下列问题：
①制取果汁时，先用果胶酶将果胶分解成和半乳糖醛酸甲酯等物质，再用
酶处理，可得到比较澄清的果汁。
②发酵初期不通气，溶液中出现的气泡是，该气泡是由（填微生物）产生的。
③后期通气的原因是。对获得的醋化醋杆菌可用液体培养基进行培养，该液体培养基的配方不包括（A．蛋白胨 B．酵母提取物 C．甘露醇 D．尿素）。
④在发酵的整个过程中，某物质浓度随时间变化的示意图如下，该物质是。
（2）如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。请回答下列问题：
①由①到②通常先用合适的酶分别切割 Ti 质粒和含抗虫基因的 DNA，然后借助酶连接以形成重组 Ti 质粒。若含抗虫基因的 DNA 序列已知，可用方法对其进行扩增。
②由④到⑤经过培养基中营养物质和的诱导，可发生类似受精卵发育成胚的过程，即从单细胞依次到细胞团、球形胚、心形胚和，最后再生出完整的植株。若⑤表现出性状，则表明转基因成功。
③基因工程在多个领域具有广阔的应用前景，基因工程的应用不包括（A．可以定向改变生物的性状；B．可以迅速使某种生物形成群落；C．可以生产人们需要的某些蛋白质；D．可以治疗人类的某些遗传病）。

下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是( )

A . 微生物培养前，需对培养基进行消毒 B . 测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法 C . 分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度 D . 分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源

通过生物技术提取胡萝卜素的流程图如下：

（1）培养酵母菌D时，培养液中的葡萄糖为酵母菌D的生长提供。提取胡萝卜素所使用的玻璃器皿灭菌方法是。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素时需要尽量除去其内的水分，干燥过程应控制好温度和时间以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用方式加热，以防止温度过高；萃取剂宜选用（填“石油醚”“乙醇”或“乙酸乙酯”），主要原因是（答出两点即可），萃取的效率主要取决于。
（3）胡萝卜素粗品的鉴定方法是。

下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤。有关叙述错误的是（）

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A . 步骤①操作时，倒好平板后，待平板冷却凝固后将其倒置 B . 步骤②接种环经灼烧灭菌冷却后，再放入试管中蘸取菌液 C . 步骤③经连续划线后，使接种物逐步稀释，分离得到菌落 D . 步骤④经适宜条件培养一段时间后得到的都是X细菌菌落

回答下列（一）、（二）小题：

（1）回答下列米酒制作过程中相关问题：
Ⅰ.用糯米酿酒过程中，糯米经蒸煮、冷却后加入适量酒曲。该过程主要利用酒曲中的黑根霉和分泌产生的α-淀粉酶、 β-淀粉酶和酶对淀粉进行处理。与酒精发酵过程相比，该过程需要的外界条件为（A.有氧、较高温度B.有氧、较低温度C.无氧、较高温度D.无氧、较低温度）。

Ⅱ.配制酵母菌悬液时，要让优良菌种迅速发挥作用，可添加少量，混匀后放置片刻，待即可。

Ⅲ.欲得到带甜味的米酒，则可在发酵进行至一半时，人为地终止进程，常用的方法有两种：；。
（2）某重度免疫缺陷病是由于患者的腺苷脱氨酶（ADA）基因（ada）突变造成的。下图是利用基因工程技术治疗该病的方案。

回答下列问题：

Ⅰ.基因工程的核心是。该方案中，病毒的功能是作为基因ada的。

Ⅱ.如果基因ada的序列未知，通常可采用的方法来获取。在已获得少量基因ada后，为了获得大量的基因ada，可采用的方法有和。

Ⅲ.体外培养重组后的T淋巴细胞需要利用CO₂培养箱。CO₂培养箱主要是为了实现对、和等培养条件的调控。

随着生产生活和科技的发展，广泛应用很多微生物知识，请分析回答下列问题：

（1）利用蓝莓酿制的蓝莓酒，被称为“液体黄金”。如果酒的生产流程，压榨前需除去果柄，此操作要在冲洗（填“之前”或“之后”）进行。若从混杂的微生物中分离酿制蓝莓酒的菌种应使用培养基。喝剩的蓝莓酒开盖放置一段时间后会变酸，原因是。

（2）测定大肠杆菌数时，在稀释10⁵倍的培养基内，得到下表统计结果中准确可信的是组。对该菌种数目统计时，常用的方法是和显微镜直接计数法。但是，统计的菌落数也往往比实际活菌的数目低，是因为。

组别	平板数	统计的菌落数	取平均值
甲组	两个	250和220	235
乙组	三个	160、240和110	170
丙组	四个	280、200、340和160	245
丁组	五个	120、60、270、220和130	160

（3）将某杆菌的淀粉酶基因转入到利用淀粉能力较弱的酵母菌中，经筛选得到高效工程菌菌种，此过程依据的生物学原理是。以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种菌的发酵罐需要先排气。
（4）相关实验结束后，使用过的微生物培养基应进行后才能倒掉。

在某细菌均匀分布的平板上，放置含有不同抗生素的纸片后进行培养，在纸片周围会出现透明区域——抑菌圈，可测定该细菌对各种抗生素的敏感性。下列叙述错误的是（）

A . 该实验中使用涂布平板法接种细菌 B . 不同抗生索在平板上的扩散速率会影响抑菌圈的大小 C . 形成的抑菌圈越大表示细菌对抗生素的敏感性越高 D . 未出现抑菌圈可能是由于抗生素诱导细菌产生了抗药性变异

生物技术实践在实际生产生活中有着多种应用。请回答下列有关问题：

（1）泡菜发酵过程会产生少量的亚硝酸盐，若泡菜中的亚硝酸盐总量达到一定值，则会引起中毒，故需要检测泡菜中亚硝酸盐的含量，测定亚硝酸盐含量的常用方法是。
（2）微生物的接种方法存多种，常用于统计活菌数目的接种方法是，使用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏低，原因是。统计微生物数目的方法除利用菌落进行活菌计数外，还有法。
（3）精油在日常生活中有着广泛的应用，不同精油的制备过程不同，这与其原料的性质等有关。柚皮在水中蒸馏时容易焦糊，宜采用法提取柚皮精油；玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，常选择法进行提取。
（4）天然胡萝卜素具有使癌细胞恢复成正常细胞的功能。根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，常采用法提取胡萝卜素；提取的胡萝卜素粗产品可通过法进行鉴定。

人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学为观察自然状态下手掌上附着的微生物，将自己的手掌在配制好的LB固体培养基上轻轻按压，然后将平板倒置于恒温培养箱中培养48h，结果如右图所示。下列叙述错误的是（）

A . 对配制的培养基需要进行高压蒸汽灭菌 B . 对手掌需要充分清洗并用75%酒精擦拭消毒 C . 可通过观察菌落的形态和颜色初步判断微生物的类型 D . 手掌上的某些微生物未能在该培养基上生长繁殖形成菌落

人类很早就能制作果酒，并用果酒进一步发酵生产果醋。

（1）人们利用水果及附着在果皮上的菌，在18～25℃、无氧条件下酿造果酒；在利用醋酸菌在条件下，将酒精转化成醋酸酿得果醋。酿造果醋时，得到了醋酸产率较高的醋酸菌群，为进一步纯化获得优良醋酸菌菌种，采用的接种方法是。
（2）先酿制果酒再生产果醋的优势有（填编号）。
①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率

②酿制果酒时形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的产率

③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中
（3）果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果见图。

该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有（填写两种）。据图可知，醋酸发酵的最适初始酒精浓度是；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，此时，若要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有（填写两个方面）。

微生物絮凝剂是一类由微生物或其分泌物产生的代谢产物，它是利用微生物技术，通过细菌、真菌等微生物发酵、提取、精制而得的，不仅具有絮凝沉降废水的作用，同时具有自身降解的能力，是一类无毒、安全、环保、不造成二次污染的絮凝剂。科研人员通过生物技术筛选稳定、高效的微生物絮凝剂产生菌。回答下列问题：

（1）将所取的土壤样本加入制成菌液，从培养基的物理形态上讲，一般将菌液接种到培养基中进行富集培养，再通过法接种到固体培养基，数天后，挑选出生长较好、表面光滑带黏性的单个菌落，分别接种到M型液体培养基中继续培养。
（2）已知微生物絮凝剂可以将水体中的颗粒集聚变大形成絮团，从而加快粒子的聚沉，达到固—液分离的目的。为研究不同微生物絮凝剂去除生活污水中有机物颗粒的效果，科研人员又进行了如下实验：
①向上述过程（1）中多个M型液体培养基中（假设每个培养基中微生物数目相等）加入等量且适量的生活污水，其中对照组设置为，目的是。

②经过一定时间后，观察，从而对不同微生物的絮凝效果做出判断。

第1章 发酵工程 知识点题库

第1章发酵工程知识点题库