灭菌技术 知识点题库

（1） 实验过程中，第一小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，他们采用的解决方法是用相关酶处理果汁．活细胞内合成该酶的原料是．

（2） 第二小组要将酵母菌从其他细菌中分离出来，常采用向培养基中添加青霉素的方法，这种培养基叫做培养基，配制培养基时常用的灭菌方法为．

（3） 在酸性条件下，可用（试剂）来检测发酵产物中是否有酒精产生．若想进一步检测所得果酒中酵母菌的数量，可采用法．

（4） 发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级长期使用，可将菌液用的方法保存．

（1） 图中②过程的目的是，③过程培养出的是．

（2） 上述实验中，对选取的油性污泥（填“要”或“不要”）进行灭菌处理．对培养基灭菌的常用方法是．

（3） 由③→④的接种可选用法，通过培养能获得．此菌种细胞呼吸的类型是．获得假单胞杆菌菌落后，在进行扩大培养时，应选用培养基．

（1） 不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从环境采集。

（2） 富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。

（3） 下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，

请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。

（4） 配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行，接种前要进行，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。

（1） 研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装入图甲所示的试管中，再将污水水样滴加进去震荡摇匀，适宜条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为。

（2） 图乙滤膜的孔径应（“大于”、“小于”、“等于”）大肠杆菌。

（3） 制备图乙中牛肉膏蛋白胨固体培养基时，对培养基的灭菌方法是，待培养基冷却至℃左右时进行倒平板。

（4） 为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入染料，该研究机构通过统计色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际值（“偏高”、“偏低”或“相等”），理由是。

（1） 果酒制作的菌种是酵母菌，在分离和纯化酵母菌时对培养基要采用灭菌，在用液体培养基扩大培养酵母菌时，需要不断振荡和搅拌，其目的是。

（2） 制备袖子果酒时，先要对袖子榨汁并调整甜度，然后将调整好糖度的袖子果汁放90℃恒温水浴锅内，其目的是。若获得的发酵液中酒精浓度较低，而酵母菌的数量却很多，则导致该结果出现的原因可能是。

（3） 若利用抽果皮制取果胶，需预先将抽果皮在沸水中浸泡一段时间，目的是。研磨、酸萃取获得果胶初提物，并用无水乙醇处理，使其，获得果胶干制品。

（4） 果胶能与3，5二甲苯酚发生反应，产生红色物质。研究人员利用果胶的这一性质，进行果胶含量的测定。测定前，需用活性炭对果胶进行 处理。测定时，标准液和样本液测定时需保证(答2点即可)等一致。

（1） 从用途上来说，富集培养基属于培养基；进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入培养皿中，制成平板。此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，其中添加了一定量的。之后用法接种，若该过程所得平板上的平均菌落数为50个，稀释倍数为10⁵时，则每毫升样品中的细菌数为个。

（2） 培养基配置和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是；实验室中常使用（设备）对培养基灭菌。

（3） 若菌落的大小大致相同，菌落发生的时间也相同，（填“能”或“不能”）仅根据菌落周围透明圈的大小来判断该菌落所产生的淀粉酶单位酶量酶活力的高低，理由是。

（1） 纤维素酶是由多种酶组成的复合酶，其中能催化纤维二糖水解的酶是。若要测定纤维素酶的活性，可对纤维素酶分解纤维素后所产生的进行定量测定。

（2） 制备选择培养基时采用高压蒸汽灭菌法灭菌。灭菌的目的是。灭菌结束后，若提前打开灭菌锅的排气阀，锅内压力突然下降，会导致的后果是。

（3） 某同学将白蚁后肠中的微生物接种到适宜的培养液中·调节pH及温度至适宜条件，并持续通人无菌空气，结果一段时间后发现培养液中几乎没有菌体生存，出现这种结果最可能的原因是。

（4） 培养一段时间后，在长出菌落的培养基上滴加刚果红染液，观察菌落周围是否产生，就可初步筛选出能降解纤维素的目的菌株。利用刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理是。

（1） 实验室进行大肠杆菌的纯化培养包括制备培养基和两个阶段，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本流程是：→倒平板。

（2） 用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌，开始加热时，要打开排气阀，使水沸腾一段时间后再关闭排气阀，这样操作的目的是。

（3） 某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现，培养基上的微生物几乎全部死亡，但在其中一个培养基上存在一个正常生长的细菌菌落，该实验室研究人员对此提出“该种细菌能利用琼脂(一种多糖类物质)”的假说。若要验证该假说的正确性，基本的实验思路是：。该琼脂分解菌能分泌脱色酶，分解糖蜜发酵废液的黑褐色色素。将该琼脂分解菌接种到含有从糖蜜发酵废液中提取到的黑褐色色素的固体培养基上，一段时间后发现菌落周围形成圆形凹穴和透明圈，原因是：。

（4） 利用固体培养基分离纯化目的菌株，可采用平板划线法或稀释涂布平板法接种，理由是：。

（1） 小组成员分别称取了根、茎、叶并用75%的酒精浸泡适宜时间，再用无菌水冲洗，根、茎、叶属于豌豆的结构层次，用 75%的酒精浸泡的目的是，为验证证该操作是否已达到目的，可进行的操作是（写出简单思路即可）。

（2） 取上述根、茎、叶进行研磨获得滤液，将滤液接种在灭菌后的培养基上并放入恒温箱中培养48h。实验室中对培养皿常采用的灭菌方法为。灭菌后的培养基倒入培养皿后，为防止皿盖上的冷凝水滴落入培养基造成污染，可进行的操作是

（3） 实验结果：接种根、茎、叶滤液的培养基上均出现菌落，可根据菌落的等特征判断其是否为同一种菌。接种根部滤液的培养基上所形成的菌落最可能属与菌（写出一种即可），挑取的单菌落可在温度条件为下进行临时保藏。

（1） 步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤③培养基中以唯一碳源。从功能上讲，步骤③中使用的培养基属于培养基。

（2） 配置好的培养基通常使用法灭菌。 接种时，若在培养基表面连续进行4次划线（如图2），则需要对接种环灼烧次。

（3） 为了对石油分解菌进行计数采用法，得到了如图3所示的平板。运用这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目（填“偏高”或“偏低”）。将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经过适当培养后，3个平板上的菌落分别为56、58和57.据此可得出每升样品中的活菌数为个。

（4） 若想要长期保存优质菌种，可以采用的方法。

（1） 在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。

（2） 纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行，以避免环境中微生物的污染。

（3） 对这些微生物的临时保藏，通常首先将菌种接种到试管的固体培养基上，在合适的温度下培养，菌落长成后，将试管放入℃的冰箱中保藏。

（4） 醋酸杆菌是生产葡萄醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，一般采用平板倒置培养，原因是。

（1） 图1所示操作为，所使用的培养基常采用的灭菌方法是。

（2） 在图2平板上采用的接种方法是，接种工具为，在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是36、40、38，则1 g土壤中的酵母菌数约为个。

（3） 为了提高酵母菌产酶能力，对分离的酵母菌进行辐射诱变处理。将处理后的酵母菌涂布在以为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径（填“较大”或“较小”）的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。

（4） 在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图3所示。据图分析，应选择菌株进行后续相关研究，理由是。

（1） 从土壤取样后，一般用（填溶剂）将土壤菌进行系列梯度稀释。

（2） 培养基A中含有的营养物质有水、牛肉膏和蛋白胨等，其中蛋白胨提供的主要营养是，培养基的pH需要调至。对接种使用的涂布器可采用法灭菌。

（3） 根据D的染色结果可判断，平板B中的（填图中的数字）是高产油细菌的菌落。

（4） 将平板B中高产油细菌的单菌落进一步纯化培养得到E。将E中的菌落接种到试管F的固体斜面培养基上进行培养后，放入4℃的冰箱中进行临时保藏，这种方法不适合长期保藏菌种，原因是。如果需要长期保藏菌种，可采用的方法。

（1） 果胶酶在食品加工中用途较广，某食品公司通常从（填“新鲜”或“腐烂”）水果上分离产果胶酶的微生物，其原因是。取水果相应部分，用制成微生物悬液，并进行梯度稀释，然后用将其转移到以果胶为唯一碳源的培养基上培养，分离得到A、B两种产果胶酶的微生物。

（2） 为了鉴定的A、B两种微生物降解果胶的能力，将等量的两种微生物接种于等量相同浓度的经的果胶溶液中进行降解果胶处理。一段时间后，将处理后的果胶溶液离心取上清液，除去残余果胶，用显色剂显色，并在特定的光下测定OD值。若经A组微生物处理后的溶液所测得的OD值较，则说明该种微生物降解果胶的能力较强。

（3） 为了进一步获得更高产果胶酶的微生物，通常对分离得到的微生物悬液进行处理，再进一步分离得到单菌落，发现大多数菌种对果胶的降解能力没有变化，其原因是。

（4） 通过鉴定筛选出高产果胶酶菌种后，可对其进行固定化处理形成固定化菌株，这样处理的优点是；在建立和优化固定化菌种处理工艺时，除考虑温度、pH、作用时间等因素外，还需考虑的主要因素有（至少写出2点）。固定化菌株保存一段时间后，发现降解果胶的能力明显下降，原因可能是（至少写出2点）等。

（1） BTB培养基以为唯一氮源，使用法进行灭菌。待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是。 

（2） 将污泥样品梯度稀释后，使用将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在环境中培养2-3天后，挑选显色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。 

（3） 将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶空检测到N₂O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，原因是。 

（4） C/N（碳氮含量比）对反硝化效率有一定的影响。科研人员测得不同C/N条件下目的菌对硝酸盐的去除率，结果如图所示： 

 

 科研人员提出，在利用目的菌株处理工业污水时，需要适当向污水中投放少量淀粉，据图分析这样做的主要目的是。 

（1） 从发臭的生活污水中分离到产硫化氢的微生物的依据是。为了解某生活污水中微生物的种类和数量，应采用法进行接种，接种前培养基用（方法）进行灭菌。在普通培养基上加入硫酸亚铁铵，采用（固体／液体）培养基培养，根据即可鉴定分离得到的微生物能否产生硫化氢。

（2） 某同学取0.1ml稀释的污水进行接种，在10³倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为450、542和361，经计算得每克污水中微生物的数量为4.51×10⁶个。请评价该同学统计得到的数据结果是否准确，。

（3） 用穿刺接种的方法将产硫化氢的两种菌分别接种在甲、乙两个培养基内，如图所示。请推测出现图中甲、乙两种菌落分布差异的原因是。

（1） 图中A过程进行振荡培养的目的是。

（2） B过程中的处理方法及测定结果如下表所示。其中对照组处理办法为。高压蒸汽灭菌时待灭菌物品不要装得太挤，以免妨碍而影响灭菌效果，加热灭菌锅时，首先需打开排气阀，直到水沸腾，目的是。

组别		处理方法	组培苗相关指标
			蛋白质含量（mg•g-1）	干重（g）	可溶性糖（%）	青蒿素（mg•g-1）
对照组			2.16	0.054	5.1	2.98
不同处理的实验组	1组	培养液和菌丝混合物制成匀浆，高压蒸汽灭菌后备用	4.52	0.059	6.50	4.07
	2组	用尼龙网将培养液与菌丝分离，取培养液高压蒸汽灭菌后备用	3.67	0.059	6.01	4.24
	3组	用尼龙网将培养液与菌丝分离，取培养液经0.22呻滤膜过滤后备用	3.15	0.078	7.10	4.70

注：菌丝是由孢子萌发成的丝状或管状结构，肉眼可见。

（3） 第3组中滤膜过滤的目的是。分析第1组和第2组的结果可推知，菌丝中含有促进合成的诱导因子。从提高青蒿素的产量看，青霉菌产生促进青蒿素合成的物质（填“全是”或“不全是”）蛋白质。

（4） 由上述实验及青霉菌的营养方式推断，内生青霉菌与黄花蒿之间在长期的共同进化中形成了关系。

（1） 实验时，培养基通常采用_的方法进行灭菌。A培养体系内的培养基中提供氮源的物质是_。

（2） 尿素分解菌可以葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是和 用移液管吸取1 ml样液后，注入①号试管中，使样本与稀释液充分混匀，依次操作后.④号试管中的细胞浓度是样本中的_倍。

（3） 在培养过程中，空白对照组一个平板上出现个别菌落，说明在此次培养过程中出现了现象。单个细菌在平板上会形成菌落.研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是_。