微生物的分离和培养知识点题库

回答与酵母菌相关的生物技术问题：

（1）用葡萄酿制果酒时，不可过度清洗葡萄，原因是避免大量流失．发酵装置如图，若阀a、b一直打开，最后的发酵产物是（填“果酒”或“果醋”）．若想得到另外一种发酵产物，阀a、b的正确操作应为．
（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌培养一段时间后，接受紫外线照射进行诱变处理．
步骤2：制备选择培养基：在基本培养基的基础上，注意添加和调低pH，加琼脂后灭菌，制成固体平板．
步骤3：将诱变处理后的菌液稀释涂布平板．
步骤4：根据选出突变菌．
（3）上述步骤3的目的是．
（4）植物秸秆的主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌却无法直接利用，原因是．

研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示．请据图回答：

（1）柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质．
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种．对新配制的培养基灭菌时所用的设备是．实验前需对超净工作台进行处理．
（3）培养基中添加的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供和．
（4）抑菌实验时在长满致病菌的平板上会出现以抑菌物质为中心的透明圈．可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果．

石油是重要的工业燃料，但海洋石油开发由于泄漏对海洋造成污染，已知假单孢杆菌能够分解石油．如图为分离和纯化假单胞杆菌的实验过程．

（1）图中②过程的目的是，③过程培养出的是．
（2）上述实验中，对选取的油性污泥（填“要”或“不要”）进行灭菌处理．对培养基灭菌的常用方法是．
（3）由③→④的接种可选用法，通过培养能获得．此菌种细胞呼吸的类型是．获得假单胞杆菌菌落后，在进行扩大培养时，应选用培养基．

如图为兰州环保部门对流经我市黄河中段水域大肠杆菌进行检测的操作和配方图．据图回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应（填“大于”或“小于”）大肠杆菌，该计数方法的名称是．
（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐和琼脂以外，还应加入．待各成分都熔化后，调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近．大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于培养基．
（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是．
（4）要检测样液中的大肠杆菌含量，取1mL河水样本，加入9mL无菌水，充分混匀后，在5个平板上用涂布平板法分别接入0.1mL样液，在37℃的培养箱中放置48小时，5个平板上的黑色菌落数分别为5、51、50、49、102．据此可得出1mL河水样本中活菌数为个．

培养禽流感病毒时，应该选用(　　)

A . 固体培养基 B . 含有多种无机盐的培养液 C . 牛肉汤 D . 活的鸡胚

下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中不正确的是（）

A . 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B . 取10²、10³、10⁴倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C . 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24〜48 h D . 应该选择菌落数在30～300的实验组平板进行计数

下列是用于从土壤中分离纯化某种细菌的培养基配方。请回答：

试剂	牛肉膏	蛋白胨	NaCl	琼脂	水
用量	5g	10g	5g	20g	1 000mL

（1）培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是该培养基从物理性质上分类属于。
（2）培养基配制完成以后，一般还要调节pH，培养霉菌时将培养基的pH调至，培养细菌时需将pH调至，并对培养基进行处理。
（3）分离纯化微生物最常使用的接种方法是和。
（4）假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？（列举两项）
①；
②。

检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题：

（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为。下图所示的四种菌落分布图中，图不是由该方法得到的是，而是利用方法得到的。
（2）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至10³稀释度。各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为。
（3）有三种材料或用具需要清毒或灭菌：（1）培养细菌用的培养基与培养皿；（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管；（3）实验操作者的双手。其中需要消毒的是，需要灭菌的是。
（4）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
根据用途划分该培养基属于培养基（选择、鉴别）。该培养基中的碳源是。利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行，与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入。
（5）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____________。

A . 制作果酒 B . 由果酒制作果醋 C . 制作泡菜 D . 制作腐乳

下图表示细菌细胞中氨基酸在酶的作用下产生另一种氨基酸的代谢过程，1～6代表不同的氨基酸，V～Z代表不同的酶，所有氨基酸对生命活动都是必需的。某种细菌的原始种只要培养基中有氨基酸1就能正常生长，而该细菌的变异种只有在培养基中有氨基酸1、2、5时才能正常生长，则该变异种中不存在的酶是（）

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A . V、W B . W、Y C . Y、Z D . V、Z

以下有关生物技术实践的叙述中，正确的是（）

A . 培养基中营养物质的浓度越高越好 B . 可以用稀释涂布平板法来测定某土壤溶液活菌数目 C . 任何培养基都必须添加碳源、氮源、水、无机盐 D . 制备葡萄酒的过程中，每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，其目的是向瓶中通气

菌种 M 和菌种 N 在发酵工程应用上具有不同的优越性，为了获得具有它们共同优良性状的融合菌，进行了下图所示的实验。已知菌种M 为组氨酸依赖（组氨酸合成相关基因突变为B-），菌种 N 为色氨酸依赖（色氨酸合成相关基因突变为 A-），下列分析错误的是（）

A . 菌种M 和N 可通过人工诱变和选择性培养筛选获得 B . 用 PEG 诱导融合之前需要去除菌种 M 和N 的细胞壁 C . 在培养基X 中添加组氨酸和色氨酸以筛选出杂种融合菌 D . 从培养基X 中分离出的杂种融合菌P 对两种氨基酸均不依赖

酸豆乳是以豆乳（豆浆和脱脂奶粉按适当比例混合制成）为原料，经乳酸菌发酵而成，营养丰富且胆固醇和乳糖的含量低。研究人员为了提高酸豆乳的品质进行了相关实验。回答下列问题。

（1）乳酸菌繁殖所需要的营养物质有水、无机盐、。
（2）为筛选目的乳酸菌种，在严格无菌操作下，先将含豆乳的培养液灭菌，，再分别接种待选的不同乳酸菌种，37℃恒温发酵l0h，发酵过程中某些组别需要排气，原因是产生气体。发酵后，需要检测和比较的发酵液主要指标有（写出3个）。
（3）利用海藻酸钠作为载体，固定上述筛选所得菌种并进行实验，流程为：配制海藻酸钠溶液一海藻酸钠溶液与乳酸菌混合一固定化乳酸菌细胞一无菌水清洗一固定化乳酸菌产酸效率实验。
①实验中固定化乳酸菌的技术属于法，与不进行固定化相比，采用该技术的优点是。

②无菌水清洗凝胶珠的目的是。

实验室有四个人培养的细胞相继被污染，污染类型相同，细胞污染后快速变混，大量团状圆泡状的微生物悬浮，中间透亮。可依据菌落特征鉴定是细菌污染还是酵母菌污染，并提出预防再次污染的方案。

（1）欲鉴定是细菌污染还是酵母菌污染，可通过肉眼观察菌落大小、（至少答两项）等特征来鉴定；酵母菌的代谢类型为。
（2）对于已被污染的培养基、试剂等应如何处理？。
（3）再次制作固体培养基的操作顺序为：计算、称量、、灭菌、倒平板；在灭菌前通常需要调整培养基的；在接种前，随机选取灭菌后的空平板在恒温箱中先行培养24h，这样做的目的是。
（4）分离培养细菌通常使用（填：“牛肉膏蛋白胨”或“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基，若将酵母菌划线接种在平板上培养一段时间后可观察到菌落，菌落是指。

异烟肼（isoniazid）又名雷米封（rimifon），是吡哆醇的结构类似物或代谢拮抗物。科研人员为了定向培育抗异烟肼的吡哆醇高产酵母菌突变株，采用梯度平板法进行了如下实验：

①在灭菌后的培养皿中加入10 mL融化的普通培养基，皿底斜放（一边垫起），待凝（如图1）；

②待培养基凝固后将培养皿放平，倒上第二层含适当浓度的异烟肼的培养基（10 mL），这样便得到异烟肼含量从一边到另一边逐渐升高的梯度平板（如图2）；

③用移液管移取经诱变处理后的酵母菌细胞悬液0.1 mL到梯度平板上，进行涂布；

④将平板倒置于22℃恒温培养箱中培养一段时间，可观察到梯度平板上酵母菌的生长情况（如图3）。

据分析回答：

（1）从作用来看，本研究使用的培养基属于培养基，为了使其能够凝固，在配制时通常需要在培养基中加入。
（2）步骤①中培养基常用的灭菌方法是，步骤③中移液管常用的灭菌方法是。
（3）步骤③中，滴加到梯度平板上的酵母菌细胞悬液一般不超过0.1 mL的原因是。
（4）步骤④中，培养基上接种后将平板进行倒置培养的目的是，恒温培养箱的温度控制在22℃左右，其主要目的是。
（5）根据实验结果推测，图3抗性菌落主要位于图2 中端，其具有抗药性的主要原因是。

某研究小组对长江中大肠杆菌含量进行检测，并研究在高盐度（NaCl）工业废水中提取可降解有机物的耐盐菌，请分析回答有关问题：

（1）大肠杆菌进行检测的操作和配方图如下：

图甲中所示大肠杆菌进行活菌计数的方法称为法。
（2）若要将图乙中大肠杆菌检测配方修改后用于培养可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌，则应去除的成分有，同时需要添加的成分是。
（3）将高盐度工业废水采用平板划线法接种在含3%NaCl的固体培养基上（如图一）。然后置于适宜条件下培养一段时间，观察形成的菌落特征；再将分离纯化后的菌株制成菌液，取等量菌液，分别加入到不同NaCl浓度的液体培养基中摇床培养35小时，定时取样统计活菌数目，测定结果（如图二）。

图一所示操作，第一次划线灼烧接种环的目的是防止杂菌污染，第二次及之后的几次划线前灼烧接种环的目的是。图二所示活菌数目在进行统计时，直接从静置的培养液中取样计数的做法是错误的，正确的操作是将培养液后取样计数，且每种浓度需设3个重复实验求其平均值。
（4）由图二可知，该耐盐菌最适合处理含（浓度）NaCl的工业废水，原因是。

微生物修复目前已成为去除农药残留污染的一种重要方法，而筛选高效农药降解菌是开展农药污染生物修复工作的重要前提。回答筛选降解溴氰菊酯（一种具有高效杀虫性的拟除虫菊酯类农药）的有关问题：

（1）分离纯化溴氰菊酯降解菌株：培养基中加入溴氰菊酯作为唯一碳源，这样的培养基从功能上看称为培养基。
（2）对获取的菌株进一步纯化时，用稀释涂布平板法接种后培养的两个平板中菌落长出后分别如下平板甲和平板乙：

出现平板甲的原因是，出现平板乙的原因是。
（3）菌株降解溴氰菊酯的能力可以用来表示。
（4）请补充完成“探究溴氰菊酯浓度对菌株降解溴氰菊酯能力的影响”的探究实验思路：取相等且适量的菌悬液分别接种到液体培养基中，恒温摇床振荡培养一定时间，检测各组菌株降解溴氰菊酯的能力。
（5）上述降解菌能否运用于生产实际，在外界环境中保持稳定的数量和较高的降解活性是生物修复技术亟待解决的问题。除上述（4）提到的因素外，还应该研究（写出1点，合理即可）等外环境因素对该菌株的影响。

为了研究抗生素X对四种不同细菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了下图抗菌实验，下列有关分析正确的是（　　）

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A . 抗生素X 对细菌3 的抑制效果最差，因为四天后细菌3 的灰雾地带最长 B . 四天后细菌2 的灰雾地带最短，说明抗生素X 对细菌2 的抑制效果最差 C . 用抗生素X 对细菌2 的抑制比对细菌3 的抑制效果好 D . 可以用抗生素X 去治疗由细菌1 引起的疾病

绿水青山就是金山银山，污水治理是生态文明建设的一项重要任务，利用微生物降解是水污染治理的有效手段之一。苯酚是工业废水中的主要有毒污染物质，研究人员从土壤中筛选获得了能降解苯酚的细菌菌株。请回答下列问题：

（1）制备培养基时，培养目的菌株的选择培养基中应加入作为唯一碳源。
（2）在无菌条件下，将土样加到含有适量的三角瓶中，振荡摇匀，获得细菌悬液，并依次稀释制备不同浓度的土壤稀释液，采用方法在培养基上获得降解菌（菌落周围出现降解圈）。
（3）比较不同菌株降解苯酚能力的大小可釆用的方法有：
①将不同菌株接种在苯酚量相同的固体培养基上，比值大的菌株降解能力强。

②将不同菌株接种于初始苯酚浓度相同的模拟废水中进行降酚处理，相同时间后，可测定培养液的苯酚含量计算来判断降酚能力。测定苯酚最的原理是在pH=10左右时，在铁氰化钾的作用下与4-氨基安替吡啉作用生成橙红色的吲哚酚安替吡啉染料，它的水溶液在510nm波长处有最大的。若环境条件适宜的情况下测得样品溶液的该值太大影响数据的有效性，则应该。
（4）为了便于工业化处理含苯酚废水，可采用技术处理目的菌株。

下列关于“分离以尿素为氮源的微生物”实验的叙述，正确的是（）

A . 在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌 B . 液体培养基振荡培养的目的是使微生物均匀分布以便涂布 C . 对含有尿素的培养基进行灭菌时，需降低高压蒸汽灭菌的压力与温度 D . 称取土壤、稀释土壤溶液、涂布平板这些操作都需要在酒精灯火焰旁进行

物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌才能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。下列相关叙述正确的是（）

A . 步骤③用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在培养基表面 B . 乙培养基中的Y物质可能为琼脂 C . 步骤5应选择物质S浓度最低的锥形瓶中的菌株 D . 物质S诱发细菌发生了突变，提高了其降解S的能力

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