灭菌技术知识点题库

酸牛奶酒是在牛奶中加入乳酸菌和酵母菌混合发酵而成的一种乳饮料．回答下列有关问题：

（1）发酵所用牛奶在加入菌种前应进行（消毒、灭菌）．
（2）已知“改良MC琼脂培养基”中含有碳酸钙，遇酸溶解而使培养基变得透明；“孟加拉红琼脂培养基”含氯霉素，可抑制绝大多数细菌的生长．对乳酸菌进行计数时应选择上述培养基，用方法接种，挑选出的菌落进行计数．
（3）对乳酸菌、酵母菌双菌混合培养和各自单独培养过程中的活菌数进行定时检测，结果见图．由图可知，双菌培养时两种菌的最大活菌数均高于其单独培养时，从代谢产物角度分析，其原因可能是．双菌培养过程中两种生物的种间关系是、．

下列有关使用高压蒸汽灭菌锅的操作，错误的是（）

A . 加水时，水面应与三角搁架平齐 B . 加盖时，将排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内 C . 加热时，待冷空气完全排尽后关上排气阀 D . 切断电源后，打开排气阀使压力表降到零后开盖

分解尿素的微生物广泛存在于农田等土壤中，某生物实验小组尝试对分解尿素的微生物进行分离与计数，请回答下列问题：

（1）分解尿素的微生物含有的酶是，为筛选出能分解尿素的微生物，配制培养基时应以作为唯一氮源，因此该培养基属于培养基。
（2）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是。常用来统计样品中活菌数目的方法是。
（3）该小组对分解尿素的微生物进行计数时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是，然后将1mL样液稀释10000倍，在3个平板上用涂布法分别涂布0.1mL稀释液；经适当培养后，统计活菌数目，每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目，最后选取作为结果；3个平板的菌落数分别为39、42和45。据此可得出每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数为个。

金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，实验中下列做法错误的是( )

A . 对接种环进行灼烧处理 B . 带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉 C . 带菌培养基必须经加热后才能倒掉 D . 接种后双手必须经肥皂洗净，再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭

(生物—选修1:生物技术实践)

请回答下列有关问题。

（1）辣椒中产生辣味的物质是辣椒素，不溶于水，易溶于有机溶剂，可以用的方法提取，其效率主要取决于，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量等条件的影响。
（2）在对具有优良性状的辣椒进行组织培养，对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是,外植体的消毒所需酒精的体积分数是，用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是和纤维素酶。
（3）若组织培养过程中感染了某种霉菌，可采用法接种进行分离并计数。与这种方法相比，显微镜直接计数的不足是。
（4）使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是 (多选)。

A . 制作果酒 B . 由果酒制作果醋 C . 制作泡菜 D . 制作腐乳

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

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（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是。
（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为。
（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使，提高营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是。

下列操作属于灭菌方法的是（）

A . 接种前用酒精棉球擦拭双手 B . 接种时将试管口通过酒精灯火焰 C . 啤酒在80℃下煮15分钟以杀死其中的微生物 D . 用高锰酸钾熏蒸接种箱

下列有关高压蒸汽灭菌锅的使用，叙述错误的是（）

A . 灭菌桶内的物品不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果 B . 拧紧盖子的螺栓时，注意要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致 C . 加热高压蒸汽灭菌锅时关闭排气阀，然后让锅内温度随蒸汽压力逐步上升 D . 让锅内温度自然下降，当压力表指针回到零后打开放气阀，开启锅盖

下列关于《生物技术实践》中的实验操作处理，正确的是（）

A . 为获得无菌的某植物原生质体，需要使用过滤灭菌处理的混合酶 B . 若需在超净台操作，从接种前30分钟开始至接种结束，紫外灯和过滤风必须始终开着 C . 制作酵母悬液和用果汁制果酒时，都需要加入适量的蔗糖，其作用相同 D . α-淀粉酶固定化之后及淀粉水解作用的检测之后，用蒸馏水洗涤固定化酶柱的目的相同

某研究小组从黄色短杆菌(能合成 L－亮氨酸)中筛选 L－亮氨酸缺陷型(不能合成 L－

亮氨酸)突变菌株,实验流程如图所示. 回答下列问题:

（1）培养基灭菌常用的方法是_;图中将试管中的菌液进行振荡培养的目的是.
（2）过程①的接种方法是_. 过程②接种时,先将灭菌后的金丝绒与培养皿 A 中的菌落接触一次,然后像盖印章一样将菌种连续接种到培养皿 B和 C的培养基表面,这种接种方法便于将来比较 B、C培养皿中菌落的差异,原因是_.
（3）培养皿 A、B、C中的培养基都要使用固体培养基,原因是_. 若培养皿 B的培养基中含有 L－亮氨酸,培养皿 C的培养基中不含 L－亮氨酸,培养一段时间后菌落生长情况如图所示,研究人员应该从培养皿_ (填“B”或“C”)中选取目的菌落,确定目的菌落位置的依据是_.

下列有关微生物培养技术的操作,正确的是(　　)

A . 为了防止污染,接种环经灼烧灭菌后应立即挑取菌种 B . 培养基灭菌后,应将pH调到适于微生物生长的范围 C . 倒平板时,应将打开的培养皿盖放在一边,防止培养基溅到皿盖上 D . 高压蒸汽灭菌后,通常将实验用具放入60~80 ℃的烘箱中烘干

下列有关常见无菌操作的叙述，错误的是(　　　)

A . 用酒精擦拭双手 B . 用氯气对水源消毒 C . 实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D . 玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭灭菌

培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是( )

①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法

A . ⑤③②①④⑥ B . ①②③④⑤⑥ C . ⑥②③④①⑤ D . ③④②①⑥⑤

将甲、乙、丙和丁四种细菌分别接种到A、B、C、D四种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如下表所示：

培养液组别	培养液成分	繁殖一代所需时间（分钟）
培养液组别	培养液成分	甲	乙	丙	丁
A	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄	43	100	—	—
B	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄、8种氨基酸	28	40
C	葡萄糖、NaCl、PO₄^3-、MgSO₄、19种氨基酸	25	25	80	—
D	NaCl、MgSO₄、NO₃^-、PO₄^3-	—	—	—	80

注：—表示细菌没有生长

下列相关分析正确的是（）

A . 甲乙相比，均能生长在A培养基，且乙增长较快 B . 甲、乙、丙和丁四种细菌，丁代谢类型与蓝细菌相似 C . 四种培养基均需要通过121℃高压蒸汽灭菌15min D . 氨基酸是甲、乙、丙、丁四种细菌生长的限制条件

硒是一种生命活动必需的微量元素。亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。

请回答下列问题：

（1）在接种土壤样品之前，需要对①中的培养基进行高压蒸汽灭菌。灭菌时间到后，要先切断电源，待灭菌锅内温度自然下降至压力表降到零时再打开排气阀。这样做的目的是。
（2）在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中，用到的器具除了烧杯、酒精灯之外，还有，从功能上看，③中的培养基属于培养基，在④中，可根据对符合要求的目的菌株进行筛选。
（3）研究者要根据培养基④中的菌落数目来计算出②的培养液中的菌体数目，其依据的原理是：当样品的时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
（4）上述实验的各个环节都必须做到严格的操作，有些用品还必须进行灭菌处理。灭菌是指。

测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。滤膜法的大致流程如下图1所示：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到含有伊红美蓝的培养基(EMB培养基)上培养→统计菌落数目。培养基中的指示剂伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈现紫黑色。请回答下列问题：

（1）从培养基的功能看，EMB培养基属于培养基。过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是，与过滤有关的操作都要在旁进行。
（2）图1中，将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，可将滤膜上的菌体“复印”在培养基上，这个步骤属于微生物培养中的操作。培养时，平板的放置应如图2中所示。
（3）某生物兴趣小组的同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将10 mL待测水样加入到90 mL无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，紫黑色菌落数平均为31，则推测1 L待测水样中的大肠杆菌数目为。
（4）将大肠杆菌进行扩大培养时，用摇床振荡培养的目的是。
（5）不同微生物培养的温度和时间往往不同，在培养箱中培养时，细菌培养温度（填“高于”“低于”或“等于”）霉菌培养温度，培养时间则（填“长于”或“短于”）霉菌培养时间。

下列操作能达到灭菌目的的是（）

A . 用免洗酒精凝胶擦手 B . 制作泡菜前用开水烫洗容器 C . 在火焰上灼烧接种环 D . 防疫期间用石炭酸喷洒教室

塑料膜的主要成分聚乙烯是一种碳氢化合物，稳定性好，不易被分解，易造成“白色污染”。研究人员经过分离筛选最终获得一种能降解聚乙烯的真菌-桔青霉，为利用微生物降解农用地膜提供依据。回答下列问题：

（1）在实验过程中，研究人员将获得的聚乙烯粉末均匀洒在培养基甲上，从培养基的碳源及物理性质分析，培养基甲是以培养基，对配制的甲培养基常采用法进行灭菌。一段时间后，从培养基甲上挑选能生长的菌株，采用法接种获得5个真菌的单菌落，储存备用。若要长期保存菌株，常采用的方法是。
（2）为确定分离得到的不同菌株分解地膜能力的强弱，可将分离纯化获得的真菌分别接种到含的液体培养基中，在一定转速下的摇床上进行培养，摇床培养的目的是（答两点），最后观察比较各组培养液中地膜体积（面积）的大小，进而筛选出高效降解地膜的菌株。
（3）为确定某一培养液中桔青霉的数量，从中吸取1mL培养液，稀释100倍，取0.1mL接种到4个培养基平板上，一段时间后获得的菌落数分别为：25、35、40、42个，则统计的平均菌落数是个。
（4）在不同的土壤使用桔青霉分解地膜的效果存在差异的原因是。

生物培养过程中，要十分重视无菌操作，下列有关叙述正确的有（）

① 干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

② 家庭制作泡菜过程中产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长

③ 加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

④ 涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌

⑤ 培养基、锥形瓶都要进行干热灭菌

⑥ 家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

⑦ 带菌培养基必须经灭菌后才能倒掉

A . 一项 B . 二项 C . 三项 D . 四项

金黄色葡萄球菌（SAU）是细菌性肺炎的病原体之一。细菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素进行治疗，当细菌出现耐药性时疗效下降。A、B、C、D四种抗生素均可治疗SAU引起的肺炎。为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于SAU均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列相关叙述错误的是（）

A . A、B、C、D四种抗生素，抑菌效果最佳的是抗生素A B . 配制培养基时应将培养基的pH调至中性或弱碱性 C . 对培养基可以采用干热灭菌的方法灭菌 D . 滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，可能是该菌落发生了基因突变

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