第二节 基因工程的应用价值 知识点题库

（1） 据图分析，下列叙述错误的是________。

（2） 下列实践活动包含基因工程技术的是________。

（3） 软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是        。

（4） 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误是        。

（5） 下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是。

A．种植转基因作物应与传统农业种植区隔离

B．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中

C．种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性

D．转基因植物的目的基因可能转入根际微生物体内

（6） 在制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了反应，再从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是。

（7） 若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的中使其增殖，再从中提取、纯化获得。

（8） 通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白，其原因是该抗体具有和等特性。

（1） 在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是 ．

（2） 构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的限制酶进行酶切．

（3） 经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）．为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示．图中第泳道显示所鉴定的载体是正向连接的．

（4） 将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的与提取的蛋白质杂交．当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验．

（1） htPA基因与载体用切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用技术．

（2） 为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其．采集的精子需要经过，才具备受精能力．

（3） 将重组表达载体导入受精卵常用的方法是．为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行．利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的．

（4） 若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到，说明目的基因成功表达．

（1） 马铃薯易患多种疾病，导致其产量不高．通过导入抗病基因并使其表达可以提高马钤薯产量，基因工程中使用最多的抗病基因是和病毒的复制酶基因．

（2） 马铃薯是双子叶植物，常用（方法）将目的基因导入马铃薯受体细胞中．构建好的基因表达载体基本结构包括目的基因、标记基因、、、等五部分．

（3） 科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯，其设计方法：修饰除草剂作用的靶蛋白，使其对除草剂（填“敏感”或“不敏感”），或使靶蛋白过量表达，植物吸收除草剂后仍能．

（4） 将目的基因导入受体细胞后，还需对转基因植物进行．

（1） 表达出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的基因，由于“发卡”阻止了其在细胞内的（填“转录”或“翻译” ）过程，所以提高了果实中番茄红素的含量。

（2） 为保证第二个目的基因片段反向连接，处理已开环质粒所用的两种限制酶是

和。

（3） 科学家发现，培育成功的转基因番茄植株对光能的利用能力有所下降，据图一推测可能的原因是。为解决此问题，可以按照乳腺生物反应器的原理，在此表达出“发卡”的DNA片段前面加入只在果实中发挥作用的。

（4） 去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团。对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其，该DNA分子仍可以和目的基因连接，形成缺少个磷酸二酯键的重组质粒，随后在细胞中被修复。

（1） 过程①中采集的精子要进行处理，过程②得到的卵母细胞，一般要培养到阶段才能进行体外受精。

（2） 过程③中构建基因表达载体需要酶、酶，将基因表达载体通过法导入牛的受精卵。

（3） 过程⑤早期胚胎培养过程中不仅要加入氧气维持细胞呼吸，还要提供一定浓度的以维持培养液的pH。为让受体牛的生理状态与供体牛一致，需要对受体牛注射激素做处理。

（4） 当早期胚胎发育到阶段时，将胚胎移入受体母牛子宫内。通过胚胎分割能提高胚胎的利用率，胚胎分割属于动物(填“无性”或“有性”)繁殖的方法。

（1） 苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白，能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列，科研人员通过法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是。

（2） 重组质粒1和Bar基因（草丁膦抗性基因）各自用XbaⅠ酶处理，得到酶切片段。重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，目的是防止。

（3） 将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。

（4） 提取上述重组白僵菌全部mRNA，加入酶，获得cDNA，再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应，用以检测毒蛋白基因是否完成了。在PCR反应体系中除引物、模板外还需加入。

（5） 科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的，以判断重组白僵菌的杀虫效果。

（1） 由品种AABB、aabb经过①、②、③过程培育出新品种的育种方式称为。若经过②过程产生的子代总数为1552株，则其中基因型为AAbb理论上有株。基因型为Aabb的类型经过过程③，子代中AAbb与aabb的数量比是。

（2） 过程⑤常采用由AaBb得到Ab个体。与“过程①②③”的育种方法相比，过程⑤⑥的优势是。

（3） 过程④在完成目的基因与运载体的结合时，必须用到的工具酶是。与过程⑦的育种方式相比，过程④育种的优势是。

（1） 通过筛选得到耐高浓度酒精酵母菌的技术是。②、③过程需要重复几次，目的是。某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是。

（2） 为证明分离纯化得到的酵母菌能提高酒精产量，可将等量的和耐高浓度酒精的酵母菌分别接种于含等量葡萄糖的A、B两组发酵装置中，在℃条件下（填“密闭”或“充气”）培养。一段时间后取样，用检测，若实验结果为，则说明耐高浓度酒精的酵母菌能提高酒精产量。

（1） 方案I中，农杆菌转化法是将目的基因导人植物细胞最常用的方法，其中的Ti质粒上的T-DNA是指。从分子水平验测来说，抗虫棉培育已经获得成功的含义是。

（2） 方案Ⅱ中，通过基因工程导入该prG基因来制备单克隆抗体体外培养的细胞具有的特点，单克隆抗体最主要的优点是。

（3） 方案 中，将目的基因导入受精卵的常用方法是，若要同时获得多头与此优质山羊相同的山羊，可对囊胚进行，操作过程需要特别注意的问题是。

（4） 方案Ⅳ中，主要应用的生态工程原理是。

（1） 通过分析农杆菌转GUS基因的效率，筛选能进行高效的转化的菌种。GUS组织化学染色是将外植体浸没于GUS染液中染色。GUS瞬时表达率=（有相应级别GUS基因瞬时表达的外植体数/外植体总数）╳100%。使用不同农杆菌对抗性浮萍愈伤组织的GUS瞬时表达率检测结果如下图，通过检测结果显示，因此浮萍遗传转化确定选用农杆菌EHA105。

（2） 本实验使用添加不同浓度乙酰丁香酮的菌液侵染浮萍，据下图实验结果发现随着，侵染效率。乙酰丁香酮浓度为100μmol/L时，浮萍的侵染效率比乙酰丁香酮浓度为200μmol/L时高出了%。

（3） 在农杆菌介导的遗传转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。植物材料和农杆菌共培养结束后，转化组织需要脱菌培养，需要用抑菌类抗生素抑制农杆菌的生长，以防止农杆菌过度生长对转化组织产生毒害作用。因此选择合适的抑菌抗生素和浓度很关键。OD₆₀₀指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度，通常用于细菌细胞密度(OD₆₀₀)测量。由上图可知， 在低浓条件对农杆菌EHA105有更很好的抑制效果；其最佳浓度都选用300mg/L的原因是。

（4） 请总结如何正确提取坐标图中的信息，以（3）中图像为例加以说明。

（5） 浮萍已被成功用于植物生物反应器方面的开发和生产。植物生物反应器是指利用植物细胞、组织、器官或整株植株，大量生产具有重要功能的蛋白质，如抗体、疫苗或次生代谢产物等。与动物细胞和微生物发酵相比，具有明显的优势，如植物细胞具有，能够脱分化和再分化。

（1） 用“口”在图中的DNA分子上标示出限制酶M能识别的所有序列。

（2） 下列能与片段2重组的质粒是____________。（所示碱基序列为不同运载体中虚线方框内的序列）

（3） 下列关于质粒运载体的说法正确的是____________

（4） 基因工程除改造微生物外，还可以改造动植物细胞，下图显示是一种外源基因导入受体细胞的方法。

图所示的导入方法称为。

（5） 若想在山羊的乳汁中收获生长激素，则需将生长激素基因导入至山羊的细胞中。若生长激素进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是。