第一章发酵工程知识点题库

组氨酸缺陷型沙门氏菌是由野生菌种突变形成的，自身不能合成组氨酸,将其接种在缺乏组氨酸的平板培养基上进行培养，有极少量菌落形成。2-氨基芴是一种致突变剂，将沾有2-氨基芴的滤纸片放到上述平板培养基中，再接种组氨酸缺陷型沙门氏菌进行培养，会有较多菌落出现。以下叙述错误的是（）

A . 在接种前，2-氨基芴和滤纸片须进行灭菌处理 B . 沙门氏菌所发生的突变对其本身是有害的 C . 基因突变的可逆性与致突变剂是否存在无关 D . 此方法可以用于检测环境中的化学致突变剂

下列有关微生物实验的叙述错误的是

A . 在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰 B . 土壤取样时，应铲去表层土3cm左右再取样 C . 两种刚果红染色法的结果均会出现透明圈 D . 采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数

用稀释涂抹平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（）

A . 比实际值高 B . 比实际值低 C . 和实际值一致 D . 可能比实际值高，也可能比实际值低

下列操作必需在严格无菌条件下进行的是（）

A . 称量牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分 B . 利用平板划线法接种大肠杆菌 C . 用酒精擦拭双手 D . 溶化牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分

下列有关用平板划线法和稀释涂布平板法纯化培养大肠杆菌的叙述，正确的是（　　）

①都需要用固体培养基

②都需要使用接种针进行接种

③都需要在火焰旁进行接种

④都可以用菌落数来计数活菌．

A . ①② B . ①③ C . ②④ D . ③④

生物技术的广泛应用，不仅带来了较好的经济效益和社会效益，更使人们的生活变得丰富多彩．请回答下列相关问题：

（1）果酒的制作离不开酵母菌．酵母菌是微生物，在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，一般将温度控制在℃；在缺氧、的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制．在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，反应式为
（2）醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动．当缺少糖源时，醋酸菌将变为，再将变为醋酸．
（3）毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和．在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐转变成风味独特的腐乳．
（4）制作泡菜时，所用盐水煮沸，其目的是．为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是．制作泡菜的过程中会产生亚硝酸盐，亚硝酸盐在特定的条件下会转变为，引起生物致癌．

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为．
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是．
（3）示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果．
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高的利用率．

研究发现乳酸菌素和香茅油均有抑菌作用，请回答下列问题：

（1）实验室中为获得纯净的乳酸菌菌种，常用的接种方法有稀释涂布平板法和．某同学在采用稀释涂布平板法分离乳酸菌时，其实验操作规范，结果发现培养基上菌落连成一片，请提出合理的改进措施．
（2）现要通过培养乳酸菌获得乳酸菌素，则发酵前要对发酵装置和培养基进行处理，在发酵过程中要保证的环境条件．
（3）香茅油难溶于水，化学性质稳定，现要从驱蚊草中提取香茅油，可采用法，利用该法提取香茅油的过程中需要加入NaCl和无水Na₂SO₄ ，其作用分别是和．
（4）在培养出大肠杆菌的平板上加入香茅油或乳酸菌素，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，可通过来比较香茅油和乳酸菌素的抑菌效果．

分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（）

选项	尿素	琼脂糖	葡萄糖	硝酸盐
A	+	+	+	+
B	﹣	﹣	﹣	﹣
C	+	+	+	﹣
D	+	﹣	﹣	+

注：“+”表示加入，“﹣”表示不加．

A . A B . B C . C D . D

为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：

（1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是
（2）该小组可采用上图②所示的（方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为．
（3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是．
（4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是（）

A . 每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次 B . 划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种 C . 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 D . 在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风．

微生物与细胞

“节约一张纸，增添一片绿”。纸的主要成分是木质纤维，以纤维素类物质生产燃料的研究越来越受重视。

（1）该技术需要从土壤中获得纤维素分解菌，已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物。获得该菌的方法是在含有纤维素的培养基上加入刚果红染料，然后筛选周围有________的菌落。培养基中的纤维素属于营养物质中的________。

A . 碳源 B . 氮源 C . 生长因子 D . 无机盐
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行（消毒 / 灭菌）。检测该菌数量可采用稀释涂布平板法计数，用该法接种培养后可得到图中（A / B）所示的结果。
（3）下列结构中的主要化学成分为纤维素、果胶等物质的是________。

A . 植物细胞壁 B . 细菌细胞壁 C . 植物细胞膜 D . 动物细胞膜
（4）图为细胞膜的亚显微结构模式图，图中①所示的物质主要作用是________。

A . 阻止物质通过 B . 保护细胞内部 C . 进行信息交流 D . 将光能转变为化学能
（5）从结构角度分析，细胞膜具有一定流动性的特点。这个特点的结构基础是；试举一例说明细胞膜的流动性对生命活动的意义是。

为研究乙醇对椰冻驹形杆菌合成纤维素的影响，研究人员在Asai合成培养基中添加乙醇，分析其对不同菌种合成纤维素产量的影响。

（1）在Asai液体培养基中添加1.5%-2%的可制备固体培养基。为达到良好的灭菌效果，各培养基均在 ℃下，灭菌20min。椰冻驹形杆菌在固体培养基上会形成菌落，菌落是指。
（2）将取得的菌液接种在含不同浓度的乙醇培养基中，适宜条件下培养一段时间后，获取纤维素，测定纤维素的干重。结果如下图：

测定纤维素的含量，不需要用凝胶色谱法，凝胶色谱法的原理是。

该实验是一个（填：“对照”或“对比”）实验。根据实验结果分析，乙醇对椰冻驹形杆菌合成纤维素的影响（填：“有”或“没有”）两重性，判断的依据是。

关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述正确的是（）

A . 同一种物质既可作碳源也可作氮源，碳源都能提供能量 B . 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C . 待培养基冷却至40℃左右时进行倒平板 D . 待平板冷却约5～10s后将平板倒过来放置

请分析回答下列有关生物技术实践的问题：

（1）在测定亚硝酸盐含量的操作中，取泡菜样液及一系列已知浓度的亚硝酸分别与化学物质发生显色反应，然后通过，可以估测出泡菜样液中亚硝酸盐的含量。
（2）在生产高果糖浆的过程中若直接用固定化葡萄糖异构酶处理麦芽糖，能否得到高果糖浆? ，原因是。
（3）加酶洗衣粉不能用于洗涤丝质及羊毛衣料，其主要原因是。
（4）微生物实验中材料或用具需要消毒或灭菌，其中金属工具可选用的灭菌方法有和。
（5）血红蛋白提取和分离实验中，洗涤好的红细胞在和的作用下破裂，释放出血红蛋白。

科研人员通过实验研发含盐低，同时又保持产品质量与风味的低盐腐乳，过程如下：

①筛选分离菌种：将待筛选的菌种涂布到特定的选择培养基上进行分离，挑选菌种接种于酪蛋白培养基上筛选出蛋白酶活力高的毛霉菌株；

②菌种扩大培养：将毛霉接种在斜面培养基上，培养一段时间后将菌种制成悬液，加一定浓度的盐水调节菌种数。

③将含菌种的液体喷洒在豆腐块上，然后培养、装瓶、腌制。

④腐乳品质评定：通过氨基酸态氮含量和感官评价对腐乳品质进行综合评定，结果如图，请分析回答：

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（1）毛霉的同化类型是，豆腐块为毛霉的生长提供的营养物质有。腐乳制作的原理主要是利用微生物产生的酶水解蛋白质和脂肪。
（2）步骤①中，毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙，其菌落直径分别为 3.2cm、2.8cm、2.9cm，其菌落与透明圈一起的直径分别为 3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落（填甲、乙或丙）作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。
（3）步骤③中，装瓶时需加入卤汤，在配置卤汤时，一般将酒的含量控制在左右。步骤④中，水解产生的氨基酸态氮含量可代表。
（4）据图分析，盐含量为左右适宜制作腐乳。盐含量不宜过低，其原因是盐含量过低。

回答下列（1）、（2）小题：

（1）回答生物技术实践的相关问题：
①醋酸菌如果在充足、氧气充足的情况下，可以直接将葡萄糖变成醋酸；由于醋化醋杆菌不能直接利用淀粉等多糖类，所以，淀粉需要过程才能用来制醋，为了提高产量，往往筛选高产菌株，筛选出的高产菌株使用（工具）接种到上，放置于4 ℃的冰箱内进行保存备用。在酿醋前，将菌种放在锥形瓶内进行震荡培养，可用进行搅拌；

②植物的组织培养是快速繁殖的一种方法，将剪下的部分枝条先放在发芽培养基中培养，使之长出更多的，再进行培养后移入生根培养基中，待生根后，将幼苗移至中进行锻炼
（2）已知拟南芥植物多次培养后依然具有全能性，常用拟南芥进行多方面的研究和应用，原生质体培养就是常用的技术之一，
①原生质体的制备：选取生长到3-4周的拟南芥叶片，先用70%的酒精消毒后，用冲洗5次，将叶片切成0.5-1mm的小片放置于盛有的培养皿中，另取一培养皿，加入灭菌后的酶液，将叶片放入酶液，震荡酶解3小时，酶解后过滤出大组织块，滤液中是酶和原生质体混合物，将滤液可以通过方法进行分离。影响原生质体纯度的因素有（写2种）

②筛选出具有活性的原生质体，可将处理后的目的基因通过法导入到受体细胞，原生质体只有再生出后才能进行细胞增殖，拟南芥的全能性的表达程度主要取决于该植物的。

要对从患者体内分离出的H7N9禽流感病毒毒株进行培养，应该选用（）

A . 牛肉膏蛋白胨固体培养基 B . 含有多种无机盐的液体培养基 C . 活的鸡胚 D . MS固体培养基

我国粮食产区产生大量的作物秸秆，科技工作者为使其变废为宝，研究出利用秸秆生产燃料酒精的技术，为汽车用乙醇汽油提供来源，其大致流程如下（以玉米秸秆为例）。请分析回答问题：

（1）玉米秸秆预处理后，应该选用特定的酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。以下微生物中最可能提取到上述酶的是___________。

A . 酿制果醋的醋酸菌 B . 生长在腐木上的霉菌 C . 制作酸奶的乳酸菌 D . 制作果酒的酵母菌
（2）若要从土壤中分离该微生物，按培养基的功能分类，其类型为培养基。对培养基灭菌常采用的方法是。
（3）为了确定该微生物产生的水解酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在25℃、30℃、35℃、40℃、45℃下降解10g玉米桔杆所需酶量依次为4mg、1mg、3mg、5mg、6mg。为了进一步确定该酶的最适温度，应在℃范围内设计后续实验。
（4）某同学对该微生物培养液进行数量测定，在稀释倍数为10⁵对应的培养基中涂布0.2mL菌液，测得平板上菌落数的平均值为43.4，那么每毫升样品中的活菌数约是。在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是。
A.酒精灯 B.培养皿 C.显微镜 D.无菌水

（5）上述流程图中，发酵阶段需要的菌种是。为纯化培养该菌体，某同学设计了A，B，C，D四种培养基（成分见下表），据表判断，最适合选用的是培养基。

培养基	A	B	C	D
马铃薯（去皮）	200g/L	200g/L	200g/L	200g/L
葡萄糖	20g/L	20g/L	20g/L	20g/L
NaNO₃	—	—	3g/L	—
蛋白胨	—	3g/L	—	3g/L
KH₂PO₄	1g/L	—	1g/L	1g/L
MgSO₄7H₂O	1g/L	—	1gL	1gL
氯霉素	—	0.1g	0.1g	0.1g
水	1000mL	1000mL	1000mL	1000mL
琼脂	20g/L	20g/L	—	20g/ L

老面馒头用面肥（上次发酵剩下的一小团面）发酵而成，面肥中主要含有酵母菌，兼有一定数量的乳酸菌和醋酸菌等。下列说法正确的是（）

A . 馒头松软多孔与乳酸菌产生CO₂遇热膨胀有关 B . 馒头发酵过程产生的酒精不能被醋酸菌利用 C . 馒头发酵过程的适宜温度是30-35℃ D . 面肥应在干燥、洁净、低温环境中保存

酵母菌在生产生活中应用广泛。在培养酵母菌用作饲料添加剂时，要给培养装置通气或振荡；在利用酵母菌生产葡萄酒时，却需要密封发酵。下列有关分析错误的是（）

A . 酵母菌是一种兼性厌氧菌，适合研究细胞呼吸方式 B . 通气有利于酵母菌进行旺盛的有氧呼吸而大量繁殖 C . 密封发酵时葡萄糖中的能量大部分以热能形式散失 D . 酵母菌通气培养和密封发酵都能产生二氧化碳

第一章 发酵工程 知识点题库

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