一 动物细胞培养 知识点题库

药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。

实验原理：，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。

Ⅰ制备细胞悬液：把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬液。

Ⅱ进行细胞培养：

①取A、B、C三个洁净的培养瓶，。

②。

③。

Ⅲ制作临时装片：

①当细胞繁殖到第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液迅速固定细胞，将细胞固定在不同的分裂时期。

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加1～2滴一定浓度的染色，3～5 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。

Ⅳ镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于期的细胞，并与对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数(Q值)。

实验结论：。

①用1.5%的NaCl溶液和蒸馏水，配制出质量分数为等具有相同浓度梯度的NaCl溶液（写出具体的质量分数）。

②取6片载玻片，标记为1～6号，滴加适量且等量的，再分别滴加等量的蒸馏水及不同浓度的NaCl溶液。

③制成临时装片持续观察。

分析与讨论：

①第6组中细胞皱缩但不恢复正常形态的原因是：。

②第5组细胞皱缩后恢复的原因是：细胞以方式吸收NaCl溶液中的离子，最终导致细胞渗透吸水。

③第1组细胞胀破后，进行等处理，从而得到纯度较高的细胞膜。

Ⅰ.在自然界中可以从某些微生物如等中获得果胶酶。在葡萄果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使

Ⅱ.用如图装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需对气阀进行关闭。比色法测定葡萄酒中的酒精含量：首先用和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管，用比色计测定后，绘制出标准曲线，再分别吸取等量经脱色处理的葡萄酒，加入，得到样品管，用比色计测得，最后计算得到酒精含量。

Ⅲ.在生产葡萄酒时由于操作不当，发现葡萄酒变酸。在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜，其形成原因是

Ⅳ.为了降低葡萄醋的生产成本，可对发酵菌进行处理。

Ⅰ.用对小鼠进行皮下注射可诱导小鼠发生相应的特异性免疫反应。

Ⅱ.无菌取小鼠脾脏，提取脾细胞后可使用效率很高的技术使其与骨髓瘤细胞融合。

Ⅲ.利用筛选出杂交瘤细胞并进行培养。通过抗体检验筛选阳性细胞系，经过多次，获得可稳定分泌抗HBP单克隆抗体的杂交瘤。

Ⅳ.若要使能产生抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，通常采用的方法是。单克隆抗体的研发成功解决了普通抗血清的问题。