基因工程的基本操作程序 知识点题库

为使目的基因能够在受体细胞中稳定存在并能够表达和发挥作用,构建的基因表达载体所需的组成有
①同一种限制酶 ②具有某些标记基因的质粒 ③RNA聚合酶 ④目的基因 
⑤DNA连接酶  ⑥启动子 ⑦终止子

A . ①②③④⑤⑥⑦ B . ①②④⑤⑥⑦ C . ②④⑥⑦ D . ①②④⑤
要将目的基因与运载体连接起来,在基因操作中应选用(   )

A . 只需DNA连接酶 B . 同一种限制酶和DNA连接酶 C . 只需限制酶 D . 不同的限制酶和DNA连接酶
基因工程的正确操作步骤是
①目的基因与运载体相结合          ②将目的基因导入受体细胞
③检测目的基因的表达              ④提取目的基因

A . ③④②① B . ②④①③ C . ③④①② D . ④①②③
目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。下列检测与鉴定方法中错误的是(   )

A . 用显微镜观察染色体的形态和结构检测受体细胞是否导入了目的基因 B . 采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA C . 用相应的抗体进行抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质 D . 做抗虫或抗病的接种实验检测转基因生物是否具有抗性以及抗性的程度
在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是(  )

A . 化学合成法 B . 基因组文库法 C . cDNA文库法 D . DNA聚合酶链式反应

请回答有关下图的问题:

(1)图1中①~⑤所示的生物工程称为蛋白质工程.该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过对 的修饰或合成,对现有蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求.

(2)图1中④所示过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是 (请将模板链上的碱基写在前面).

(3)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产,则构建基因表达载体时,图2中序号[1]代表的是乳腺蛋白基因的 ;且在图1中⑨过程之前,要对精子进行筛选,保留含性染色体 的精子.

(4)图中[3]的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.

(5)为获得较多的受精卵进行研究,图1中⑥过程一般需要对供体用 激素处理,使其超数排卵;为提高培育成功率,进行⑩过程之前,要对供、受体动物做 处理.

(6)对早期胚胎进行 技术,可获得同卵双胎或多胎.

在培育转基因烟草过程中,下列操作错误的是(    )
A . 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B . 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和运载体 C . 将重组DNA分子导入烟草细胞 D . 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
请回答下列问题:
  1. (1) 基因工程的核心步骤是.如图甲是基因表达载体的模式图,图中抗生素抗性基因作为基因工程中的基因.

  2. (2) 模型是人们为了某种特定目的对认识的对象所做的一种简化的概括性描述,模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法.若图乙表示单克隆抗体制备过程,则从A、B到C的过程需要的生物方法是使用
  3. (3) 哺乳动物受精后不久,受精卵开始进行细胞分裂.经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化,最后发育成一个完整的幼体,完成胚胎发育的全过程.图丁中②、③依次为,胚胎从①中伸展出来的过程叫做.若要对图丁所示胚胎进行胚胎分割,则正确的操作方法是图戊中的
在基因表达载体的构建中,下列说法错误的是(    )

①一个表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子

②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA

③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止

④所有基因表达载体的构建是完全相同的.

A . ②③ B . ①④ C . ①② D . ③④
以下是在现代生物工程中运用的有关操作技术,其中叙述正确的是(    )
A . 在基因工程中检测目的基因是否翻译成蛋白质,可选用含标记的目的基因探针进行分子杂交 B . 植物体细胞杂交,能克服远缘杂交不亲和的障碍,培育出的新品种一定不是单倍体 C . 试管苗、试管牛和克隆羊都属于无性生殖且能保持母本性状 D . 胚胎移植中的冲卵是指选择特定的装置将卵子冲出
下列关于基因工程工具的说法不正确的是(  )
A . 构建基因文库和构建基因表达载体都需要限制酶和DNA连接酶 B . DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列有专一性要求 C . 载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达 D . 在基因工程操作中,被用作载体的质粒,都是经过人工改造的
医学研究发现,人体肝细胞中产生的抗凝血酶Ⅲ在抗凝血、防血栓方面具有重要作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题:
  1. (1) 应从人的肝细胞中提取并分离mRNA,逆转录成单链DNA。根据已知的抗凝血酶Ⅲ基因的碱基序列设计特异性,经PCR和电泳,可得到大量抗凝血酶Ⅲ基因,此过程所用原料为
  2. (2) 重组后的人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成,其中决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
  3. (3) 山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞。在饲养层细胞上培养时,ES细胞具有的特性。将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时,目的基因表达载体进入ES细胞的方式为
  4. (4) 对山羊进行同期发情和超数排卵处理,得到代孕母羊和多个卵母细胞,当卵母细胞培养至时,可去核并移入上述ES细胞的细胞核,完成核移植。为选择雌性胚胎,可在囊胚时取细胞做DNA分析用以鉴定性别。检测羊奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ的方法是
科研人员培育了一种能够降解餐厨废弃物并生成乳酸的转基因毕赤酵母。基本思路是在乳酸脱氢酶基因(LDH)的单基因表达载体中逐个接入糖化酶基因(Ga)表达盒与α-淀粉酶基因(Amy)表达盒,构建出AGL-三基因表达载体,如图1所示:(ori为复制原点;Zeocin R为博来霉素抗性基因;)LDH-单基因表达载体①②GL-二基因表达载体AGL-三基因表达载体oriZeocin RLDHAmyGaBglⅡBamHⅠA.糖化酶基因表达盒BglⅡBamHⅠB.α-淀粉酶基因表达盒BglⅡBamHⅠ③C④D.基因重组毕赤酵母E.表达检测。

  1. (1) 获取目的基因:利用PCR技术获得目的基因的过程中,需要在PCR反应体系中加入模板、Taq酶及
  2. (2) 将图1所示结构“导入”毕赤酵母后,要筛选出含有三基因表达载体的毕赤酵母的操作思路是:
  3. (3) 对筛选出的菌株进行进一步鉴定的方法有:(写出一种)。利用转基因毕赤酵母降解餐厨废弃物生成乳酸,既减少了环境污染,也降低了乳酸的生产成本,这符合生态工程中的原理。
  4. (4) 构建三基因表达载体的难点在于构建目的基因的表达盒,图2LDH-单基因表达载体①②GL-二基因表达载体AGL-三基因表达载体oriZeocin RLDHAmyGaBglⅡBamHⅠA.糖化酶基因表达盒BglⅡBamHⅠB.α-淀粉酶基因表达盒BglⅡBamHⅠ③C④D.基因重组毕赤酵母E.表达检测为构建α-淀粉酶基因表达盒的示意图(糖化酶基因表达盒构建与之类似,此处省略)。

    注:pro为启动子;AOX TT为终止子;Bsp119Ⅰ、XbaⅠ、Bgl II、BamHⅠ为四种限制酶)LDH-单基因表达载体①②GL-二基因表达载体AGL-三基因表达载体oriZeocin RLDHAmyGaBglⅡBamHⅠA.糖化酶基因表达盒BglⅡBamHⅠB.α-淀粉酶基因表达盒BglⅡBamHⅠ③C④D.基因重组毕赤酵母E.表达检测

    操作➀的处理是:将质粒1与α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ与XbaⅠ两种不同的限制酶处理,然后拼接。与用一种限制酶切相比,优点是;在此之前,科研人员还利用点突变技术对α-淀粉酶基因序列进行了同义密码子替换(即不影响氨基酸序列)改造,推测其原因。操作➁中必需用酶对质粒2处理,才能获得能正常表达的α-淀粉酶基因表达盒。

下图是培育抗冻番茄的过程示意图。下列相关叙述正确的是(    )

A . 过程①和过程②所用的酶相同 B . 转基因抗冻番茄植株的获得是定向变异的结果 C . 重组质粒转入农杆菌的主要目的是筛选目的基因 D . 可用DNA探针检测抗冻基因是否在番茄植株中表达
下列有关实验操作流程的叙述中,正确的是(   )
A . 腐乳制作:豆腐长毛霉-加盐腌制-加卤汤装瓶-密封腌制 B . 血球计数板的使用:盖盖玻片-滴培养液-等待沉降-镜检计数-刷洗 C . 果酒果醋制作:挑选葡萄-冲洗-榨汁-果醋发酵-果醋-酒精发酵-果酒 D . 基因工程:获取目的基因-构建表达载体-导入受体细胞-目的基因的检测与鉴定
近日,美国和澳大利亚的研究人员发现,从锥形蜗牛体内提取出的毒液可望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。他们研究表明锥形蜗牛毒蛋白(Con-InsG1)能加速受体细胞信号转换,比人类胰岛素更加快速的发挥作用。因此制造这类“速效胰岛素”以及利用转基因技术实现批量生产成为I型糖尿病治疗的新思路。请回答下列问题:
  1. (1) 利用基因工程制造Con-InsC1这种速效胰岛素过程中,构建基因表达的载体一般包括目的基因、启动子、标记基因和。启动子的作用是,标记基因的作用是
  2. (2) 为了获得目的基因可以通过提取分析Con-InsGl毒蛋白中的序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列,再用DNA合成仪直接大量合成。基因工程中需要DNA连接酶,根据酶的来源不同分为两类。
  3. (3) 将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内,一般先用药物处理大肠杆菌使之成为细胞。再将重组DNA溶于中与该类细胞融合,在一定温度下促进细胞吸收重组DNA分子完成转化过程。
  4. (4) 经过目的基因的检测和表达,获得的Con-InsC1毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性,导致这种差异的原因可能是
下列有关基因工程和酶的相关叙述,正确的是(   )
A . 基因工程可以使大肠杆菌发生基因突变,产生新基因、新性状 B . 目的基因和质粒需用同一种限制酶切割,说明限制酶没有专一性 C . 目的基因进入受体细胞后即可表达 D . 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物的细胞中
基因工程操作的基本程序可表示为“过程①→过程②目的基因与运载体结合→过程③→过程④”。下列对培育真核转基因生物相关操作的叙述,错误的是(   )
A . 通过基因工程操作可直接定向地改变生物,培育新品种 B . 过程①中必须用限制性核酸内切酶,而过程②中必须用DNA连接酶 C . 过程②必须用质粒是为了过程③中能将目的基因成功导入受体细胞 D . 过程④为目的基因的表达和检测,其中表达是通过转录、翻译实现
里氏木霉能高效表达并分泌纤维二糖水解酶I(由cbh1基因编码)等多种蛋白质,且不会产生对人体有害的毒素。中国科学家用里氏木霉作为受体细胞成功表达出Nb20(一种高亲和性抗新冠病毒抗体)。操作流程如图6.

回答下列问题:

  1. (1) 纤维二糖水解酶I是土壤微生物分解纤维素所需酶之一,推测里氏木霉在生态系统中的成分是。与大肠杆菌相比,采用里氏木霉作为工程菌可以生产结构相对复杂的药用蛋白,推测其原因是
  2. (2) pUC19质粒是经人工改造过的一种载体质粒,一般要利用技术扩增以备用。
  3. (3) Nb20编码基因插入至cbh1基因启动子下游的目的是;构建的表达载体还需要的结构有(答出两点即可)。
  4. (4) 培养液中非目标蛋白较多,导致目标蛋白(Nb20)纯度和特异性不足,为提高目标蛋白的纯度,从基因角度思考,改造里氏木霉可采取的思路是
转基因抗虫棉也称为转Bt基因抗虫棉,它是将苏云金芽孢杆菌的Bt基因导入到棉花的受体细胞中,然后将其培养成新的植株。请回答问题:
  1. (1) 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是
  2. (2) 若要获取转基因植物人工种子,需培养到阶段,再进行人工种皮的包裹;若用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产,培养到阶段即可。
  3. (3) 若采用植物体细胞杂交技术获得新的植物体,细胞间杂交一般采用作为诱导剂诱导细胞融合,与传统的有性杂交相比,其优势是
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